一种提高罗非鱼抗低温能力的中草药饲料及制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明设及一种水产动物养殖饲料领域，具体设及一种提高罗非鱼抗低溫能力的 中草药饲料，同时还设及一种提高罗非鱼抗低溫能力的中草药饲料的制备方法，该饲料主 要适用于处于低溫条件下的罗非鱼。
【背景技术】
[0002] 罗非鱼（Oreochromis niloticus，tilapia)，原产于非洲，属驴形目丽鱼科罗非鱼 属，是仅次于經科和娃科鱼类的世界第Ξ大养殖品种，在热带和亚热带地区具有广泛的养 殖，然而其耐低溫能力较差，最适溫度范围25~28 °C，生长溫度范围为16~38 °C。据统计，我 国2011年的罗非鱼产量为144万吨，2012产量达到155万吨，中国已成为世界最大的罗非鱼 养殖国家。然而，受其耐低溫能力差的影响，我国罗非鱼的养殖受到气候与溫度的制约，导 致了其南北地理位置分布极不均衡。此外，罗非鱼在我国广大地区均不能自然越冬，每年需 花费大量人力和财力来解决越冬问题。根据已有报道，2008年1~2月我国南方地区持续低 溫，致使30多万吨罗非鱼死亡，其死因与非致死低溫（10.0~13.(TC)的持续期有直接关系。 因此，如何提高罗非鱼耐低溫能力已成为其增养殖产业发展所面临的重要问题之一。
[0003] 为了提高罗非鱼在寒灾和早春期间的耐低溫能力，降低持续低溫对罗非鱼的损 害，提高低溫环境下罗非鱼的存活率，减少经济损失，拓展罗非鱼的养殖区域。本发明团队 W此为研究目标，测试了复合中草药提取浓缩粉、维生素 C、维生素 A、维生素 E对罗非鱼在低 溫环境中的影响，得到了一种改善罗非鱼耐低溫特性的饲料配方。
【发明内容】
[0004] 本发明的目的是在于提供了一种提高罗非鱼耐低溫特性的中草药饲料，配方合 理，使用方便。该饲料添加剂可有效的提高了罗非鱼的耐低溫特性，降低了低溫环境中的罗 非鱼的死亡率5倍W上（与不添加含有中草药提取浓缩粉的对照饲料相比），同时可明显的 提高了罗非鱼的抗氧化性能，抑制了低溫诱导的调亡发生，提高了罗非鱼抗低溫应激能力。 [000引本发明的另一个目的是在于提供了一种提高罗非鱼耐低溫特性的中草药饲料的 制备方法。方法易行，操作简便，该饲料添加剂使用的中草药为等级较低的原料中草药，只 需经过简单煎制处理，即可与其它原料直接混合，该方法简单易用。
[0006] 为了实现上述的目的，本发明通过如下技术方案来实现：
[0007] -种提高罗非鱼抗低溫能力的中草药饲料，它由W下重量份的原料制成： 原料 重量份 菜稍 20-30 豆稍 21 - 31 棉稍 8-12 面粉 15-巧 鱼粉(秘鲁鱼粉） 3-9 玉米油 化5-2.日 大豆油 0. 5 -2..扫 憐酸二氨巧 1-3
[000引 氯化胆碱 Q,巧一3日 纤维素（變甲基纤维素钢，99%) 1.85-2.巧 錐生素 C 0. 5-1，5 维生素 A 化02-Q. 05 维生素臣 化游…日,挂 中草药复漓物为：干姜 0.3-1. 2 陈皮 化1-0. 4 良姜 0. 05-0. 2 青皮 0. 05-0. 2
[0009] -种提高罗非鱼抗低溫能力的中草药饲料，它由W下重量份的原料制成(优选范 围）：
[0010] 原料 重量份 菜巧 22-2这 豆巧 23-数 棉相 9-U 面粉 巧一23 鱼粉 4 一8 玉米油 0.7 -2,3 大豆油 0.8-2. 4 憐酸二氨巧 1. 5-2. 8
[0011] 氯化胆碱 0.18-0.32 纤维素 1.. S-2, 1 维生素 C 化7-1. 3 维生素 A Θ,艇-打.腑 维生素 E 0. 2-0. 4. 5 中草药复混物为平姜 Q. 5-1.1 陈皮 0. 15-0. 35 良姜 化腿-0.1.沒 青皮 0.08-0.18。
[0012] -种提高罗非鱼抗低溫能力的中草药饲料，它由W下重量份的原料制成(较好范 围）： 原料 重曇份 菜粧 23-巧 豆巧 M-雑
[0013] 棉巧 9.目一 10.5 面粉 巧一2这 鱼粉 4-8 玉米池 0. U-L8 大盘組 1-2.图 磯酸二氨巧 1.:8-么:6 氯化胆碱 0.2 - 0.. 3 巧维素 I. 85-2. 0日 维生素 C 0. 8-1. 2
[0014] 维生素 A 化拟-0. Μ自 维生素 R (). 2-化斗2 中草药复混物为：干姜 0.6-1 陈皮 0. 18-0. 32 良姜 0. 09-0. 17 青皮 0.09-0.17。
[0015] -种提高罗非鱼抗低溫能力的中草药饲料，它由W下重量份的原料制成(最佳范 围）： 原料 重量份 菜巧 Μ-説 豆巧 巧一巧 棉化 9.8-10.2 面粉 巧一21 鱼粉 4-8
[0016] 玉米油 0.13-1.Θ 大豆油 1. 4-2 磯酸二氨巧 2-2.4 氯化胆碱 0.巧一0,泌 纤维素 L 88-2. 02 维生素 C 化9-1. I 维生素 A 0.胳5-0. 042 维坐素 ? 0.3-0.4 中草药复混物为;干姜 0.?-化9
[0017] 陈皮 0. 2-0.3 良姜 日.1-0. 15 青皮 Q. 1-庄;1邑。
[0018] -种提高罗非鱼抗低溫能力的中草药饲料，它由W下重量份的原料制成（最佳 值)： 原料 重量份 菜巧 25 豆巧 26 棉巧 12 面粉 沸 鱼粉 6 玉米油 2 大豆油 2 磯酸二氨巧 1.5
[0019] 氯化胆碱 0.巧 纤维素 2.. ：1日. 维生素 C 1 维生素 A 0.娘 维生素 E 0.巧 中草药复漉物：干姜 日.6 陈皮 0.2 良姜 化1 青皮 .0. 1.6
[0020] -种提高罗非鱼抗低溫能力的中草药饲料的制备方法，其步骤是：
[0021] A.按干姜、陈皮、良姜、青皮的比例称取中草药，按照中草药与双蒸水100g:900mL 的比例置于烧杯中，浸泡55-65分钟，加热升溫至煮沸，溫度控制在98-100°C，煮沸1-2分 钟，煮沸后减少加热量维持煮沸状态28-32分钟，用纱布过滤，收集药汁，剩下的中草药继 续加双蒸水，中草药与双蒸水的比例为100g:800mL，煎制38-42分钟，用纱布过滤药汁，与 第一次的药汁混合，将得到的滤液通过冷冻干燥机去除水分，即可得到中草药水煎剂粗提 干粉；
[0022] B.将一定比例的菜巧、豆巧、棉巧、面粉、鱼粉、憐酸二氨巧、氯化胆碱、纤维素、维 生素 C、维生素 A、维生素 E粉碎过70-90目筛后，再加入步骤A中的中草药水煎剂粗提干粉 (0.1-0.4份），准确称质量后逐级混匀，获得饲料原料。
[0023] C.将步骤B得到的饲料原料与一定比例的玉米油和大豆油混合均匀，加入占原料 质量分数10%-15%的纯净水，用绞肉机加工成直径2.0mm条状，电风扇吹干后，破碎成长 约4.0mm圆柱形颗粒料，即得到一种提高罗非鱼抗低溫能力的中草药饲料。
[0024] 本发明与现有技术相比，具有W下优点和效果：
[0025] 本发明的饲料不仅能够可有效的提高了罗非鱼的耐低溫特性，降低了低溫环境中 的罗非鱼的死亡率5倍W上（与不添加含有中草药提取浓缩粉的对照饲料相比），另外使用 该饲料添加剂，同时可明显的提高了罗非鱼的抗氧化性能，抑制了低溫诱导的调亡发生，提 高了罗非鱼抗低溫应激能力。
[0026] 本发明中干姜及其水煎剂药效如下：
[0027] 干姜具有驱风、抗寒，消炎镇痛的作用。其水煎剂主效成分姜辣素类物质具有抗氧 化、清除自由基的功效，并且能刺激屯、脏和屯、血管，加速血液流动，促进排汗，并且对加强动 物抗低溫胁迫能力具有一定的作用。
[0028] 本发明主要通过复合中草药提取浓缩粉与合理的营养物质相配合，通过提高了抗 氧化能力，增强免疫功能及调节新陈代谢从而增强罗非鱼耐低溫能力，降低了低溫环境中 的罗非鱼的死亡率。
[0029] 所述的一种提高罗非鱼耐低溫特性的饲料，与不添加含有中草药提取浓缩粉的对 照饲料，在罗非鱼中进行了应用实验。
[0030] 实验方法：
[0031] 试验前用基础料驯养2周，随后用复合饲料W及对照饲料分别饲喂2周，每个组设 置Ξ个平行，每个平行放30尾罗非鱼。然后控制水溫，将水溫从3(TC缓慢降至10°C，梯度为 每两天降低一度，在水溫为30°C、25 °C、20°C、15 °C、10°C时每缸随机取Ξ尾，采样。其主要结 果如下：
[0032] 随着溫度降低，罗非鱼摄食量减少，20°C时，对照组摄食量大幅减少，实验组进食 正常，至17°C时对照组基本停止进食，复合饲料实验组的摄食量于18°C时开始减少，16°C时 停止摄食。
[0033] 表1饲喂复合饲料的实验组与对照组罗非鱼在不同溫度下死亡数情况
[0034]
[0035] NO被认为是重要的气体第二信使，参与多种生物过程。具有促进细胞调亡及抑制 细胞调亡的双重作用，大量研究显示高剂量的NO更促进细胞的死亡。
[0036] 表2饲喂复合饲料的实验组与对照组罗非鱼在不同溫度下血浆中NO浓度的变化
[0037]
[0038] 从表2中可W看出，随着养殖溫度的降低，实验组其血浆中NO浓度显著低于对照 组，说明饲喂复合饲料在低溫环境下能够显著抑制罗非鱼的细胞调亡，从而降低其死亡率。
[0039] 表3饲喂复合饲料的实验组与对照组罗非鱼在不同溫度下血浆中血糖浓度的变化
[0040]
[0041] 表4饲喂复合饲料的实验组与对照组罗非鱼在不同溫度下血浆中甘油Ξ醋浓度的 变化
[0042]
[0043] 谷脫甘肤过氧化物酶(Glu1:athione peroxidase，G甜-Px)是机体内广泛存在的一 种重要的过氧化物分解酶。它能保护细胞膜的结构及功能不受过氧化物的干扰及损害。
[0044] 表5饲喂复合饲料的实验组与对照组罗非鱼在不同溫度下血浆中GSH-PX比活力的 变化
[0045]
[0046] 从表3,4,5中可W看出，当水溫降至15°CW下时，实验组中甘油Ξ醋浓度显著低于 对照组，而血糖浓度及GSH-PX比活力水平高于对照组，说明在罗非鱼停止进食时，饲喂了复 合饲料的罗非鱼能够更主动有效的利用机体中存胆的营养物质给机体提供能量，维持机体 生理活动，抗氧化，降低氧化带来的损伤，从而抵抗低溫。
【附图说明】
[0047] 图1饲喂对照组饲料的罗非鱼在不同溫度下肝脏中GAS2基因表达情况的变化。
[0048] 图2饲喂复合饲料的罗非鱼在不同溫度下肝脏中GAS2基因表达情况的变化。
[0049] 调亡是导致细胞死亡的一个调节性生理过程，在一定的生理或病理条件下，多细 胞生物会遵循自身的程序，自己结束生命。GAS2基因作为细胞调亡的启动子，在接收到调亡 信号后期表达量会升高，介导细胞调亡。图1与图2相关结果显示，随着溫度的下降，对照组 GAS2基因的表达量显著升高，而实验组变化不明显，说明饲喂了复合饲料的罗非鱼的细胞 调亡数显著下降，对低溫的抵抗力显著升高。
[0050] W上结果显示，饲用了复合饲料添加剂的罗非鱼显著降低了罗非鱼在低溫环境中 的死亡率30% W上，并且有效提高了罗非鱼在低溫环境中的代谢活动，显著抑制了细胞的 调亡，最终提高了罗非鱼耐低溫、抗低溫应激的能力。
[0051] W上具体阐述了本发明的基本原理、主要特征和显著优点，本发明不受上述实施 例的限制，上述实施例和说明书中的相关描述只能阐述发明的原理，在不脱离本发明精神 和范围的前提下，本发明还会有各种变化和改进，运些变化和改进都落入要求保护的本发 明范围内，本发明要求保护范围由所附的权利要