γ-聚谷氨酸的制备方法及保湿面霜和面霜的制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及化妆品的技术领域，具体说是一种γ-聚谷氨酸的制备方法及保湿面 霜和面霜的制备方法。
【背景技术】
[0002] 面霜是一种含有多种抗衰老、保湿、养护等的修护成分，面霜的功效各有不同，每 种功效的效果都很显著。保湿面霜是其中的一种，其原理是基于其含水度很高，容易均匀地 涂抹开，并且快速渗透到皮肤表皮当中，可以让滋润皮肤的成分容易被保留下来，不容易被 蒸发，维持皮肤的一定含水量，从而达到保湿的目的，在涂抹保湿面霜之后可以让水分轻松 渗入表皮的角质层，皮肤变得柔软，肌肤自然光亮有弹性。尤其对于干性皮肤的补水效果最 为明显，由于干性皮肤容易在干燥的秋季形成细小皱纹，所以使用偏油质的保湿产品会有 很好的保湿效果。
[0003] 聚谷氨酸具有极强的保水性，可以在皮肤表面上形成一层保护膜来防止肌肤水分 的蒸发，同时它也可以渗透到皮肤深层，恢复肌肤自我保湿系统。对于干性皮肤来说，长期 处于缺水状态会让皮肤极易老化，出现干裂，伴随小皱纹的产生，而添加了聚谷氨酸的面霜 可以改善皮肤的缺水状况，补水保湿，同时从皮肤深层改善自我保湿系统。因此聚谷氨酸对 于人类的皮肤具有很好的美容保湿的效果。
【发明内容】
[0004] 本发明要解决的技术问题是提供一种γ -聚谷氨酸的制备方法及保湿面霜和面霜 的制备方法。
[0005] 本发明的γ -聚谷氨酸的制备方法，采用菌株为地衣芽孢杆菌Bacillus licheniformis，该菌株已于2009年10月14日保藏于位于北京市朝阳区北辰西路1号院3号 (邮编：100101)的中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC N0.3336； 具体包括以下步骤： (1) 菌种活化:将地衣芽孢杆菌的原始菌株接种在斜面培养基上，于35-40°C培养15-20 小时之后活化2-3次，制备成熟的斜面种子； (2) 种子液的制备:将一环活化后的斜面种子接种至装有40-60ml液体培养基的三角瓶 中，35-40°C，200-250rpm培养15-20小时至对数生长期； 所述种子培养基组成为:K2HPO4 〇.5g/L，MgS〇4?7H2〇 0.5g/L，葡萄糖40g/L，胰蛋白 胨8g/L ρΗ7·2,其余为水； (3) 发酵罐发酵:将步骤(2)中的种子液以3-6%的接种量接种至发酵罐，30L发酵罐发 酵培养基装液量为151^，初始发酵温度35-38°(：，罐压0.01-0.051^ &通风量0.5-1.0^111，转速 450-600印111;当发酵液的00 66()在0.550-0.600时，控制发酵温度30-35°(：，调节转速至330-450rpm，通风量1.5-2. Ovvm，利用流加3mol/L氢氧化钠溶液控制pH在7.3-7.8至发酵结束前 4-7小时； 所述发酵培养基组分为:葡萄糖80g/L，氯化钠 8g/L，MgS〇4 · 7H2〇 1.5g/L，无水氯化钙 1.5g/L，FeS〇4 · 7H2〇 0.02g/L，甲硫氨酸0.6g/L，精氨酸0.8g/L，谷氨酰胺0.5g/L，胆碱 0.318/1，吡哆醇0.05 8/1，其余为水； (4)聚谷氨酸的提取:发酵结束后15000r/min离心去菌体，然后用5倍上清液体积的乙 醇，醇沉析出聚谷氨酸，然后再复溶于上清液体积的蒸馏水，利用喷雾干燥方法制备出干粉 聚谷氨酸，同时将上清液用流动相稀释至γ-聚谷氨酸的含量在l_3g/L，通过高效液相对其 分子量进行检测，分子量在80万到220万道尔顿。
[0006] 本发明还可以采用以下技术措施： 步骤(1)中，原始菌株接种在斜面培养基上，于37°C培养16小时之后活化2次，制备成熟 的斜面种子。
[0007] 本发明的保湿面霜，由下列重量份数的原料组成:蒸馏水40-50份、棕榈酸5-7份、 橄榄油5-8份、甘油4-5份、水溶性维生素 E 2-3份、氢氧化钾1-3份、聚乙二醇-8 1-3份、传 明酸粉2-6份、γ -聚谷氨酸5-15份、乳化剂2-6份、苯氧乙醇抗菌剂3-5份、玫瑰精油1份、色 素 1份。
[0008] 本发明的保湿面霜的制备方法，包括以下步骤： Α、按组分配比将蒸馏水、棕榈酸、氢氧化钾、水溶性维生素 Ε、传明酸粉、聚乙二醇-8 混合并搅匀； Β、将橄榄油、甘油、γ-聚谷氨酸加入乳化剂中充分搅匀； C、 将步骤Β所得液体缓缓倒入步骤Α所得液体中，混合隔水加热，倒入时均匀搅拌； D、 将苯氧乙醇抗菌剂加入步骤C形成的乳霜中，再加入玫瑰精油和色素，搅拌并降值常 温。
[0009] 本发明具有的优点和积极效果是： 本发明的γ -聚谷氨酸的制备方法中，采用地衣芽孢杆菌CGMCC N0.3336,经菌种活化、 种子液制备、发酵罐发酵和聚谷氨酸提取后获得γ-聚谷氨酸，制备聚谷氨酸的工艺流程简 单，能够大幅度的减少生产成本，同时也能减少聚谷氨酸的损失率，使得聚谷氨酸的最后产 率提高；另外，该方法能够获得高分子量的聚谷氨酸，对于后续制作的保湿面霜更为有利。 本发明的保湿面霜和面霜制备方法中，在面霜制备过程中添加 γ -聚谷氨酸生物高分子材 料，聚谷氨酸降解后无毒，可生物降解，对皮肤有营养成分的高端产品。聚谷氨酸可以针对 各种不同肤质的皮肤进行保水保湿，可以提供比透明质酸(ΗΑ)更好的保湿效果。
【具体实施方式】
[0010] 以下通过具体实施例对本发明中的技术方案进行详细说明。
[0011]本发明的γ -聚谷氨酸的制备方法，采用菌株为地衣芽孢杆菌Bacillus licheniformis，该菌株已于2009年10月14日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通 微生物中心，保藏号为CGMCC N0.3336; 具体包括以下步骤： (1)菌种活化:将地衣芽孢杆菌的原始菌株接种在斜面培养基上，于35-40°C培养15-20 小时之后活化2-3次，制备成熟的斜面种子； (2) 种子液的制备:将一环活化后的斜面种子接种至装有40-60ml液体培养基的三角瓶 中，35-40°C，200-250rpm培养15-20小时至对数生长期； 所述种子培养基组成为:K2HP〇4 0.5 g/L，MgS〇4*7H20 0.5 g/L，葡萄糖40 g/L，胰蛋 白胨8 g/L ρΗ7·2,其余为水； (3) 发酵罐发酵:将步骤(2)中的种子液以3-6%的接种量接种至发酵罐，30L发酵罐发酵 培养基装液量为15L，初始发酵温度35-38°C，罐压0.01-0.05Mpa通风量0.5-1. Ovvm，转速 450-600印111;当发酵液的0066()在0.550-0.600时，控制发酵温度30-35°(：，调节转速至330-450rpm，通风量1.5-2. Ovvm，利用流加3mol/L氢氧化钠溶液控制pH在7.3-7.8至发酵结束前 4-7小时； 所述发酵培养基组分为：葡萄糖80 g/L，氯化钠8g/L，MgS〇4*7H2〇 1.5g/L，无水氯化 |丐1.58/1，？6304?7!120 0.028/1，甲硫氨酸0.68/1，精氨酸0.88/1，谷氨酰胺0.58/1，胆碱 0.318/1，吡哆醇0.05 8/1，其余为水； (4) 聚谷氨酸的提取:发酵结束后15000r/min离心去菌体，然后用5倍上清液体积的乙 醇，醇沉析出聚谷氨酸，然后再复溶于上清液体积的蒸馏水，利用喷雾干燥方法制备出干粉 聚谷氨酸，同时将上清液用流动相稀释至γ-聚谷氨酸的含量在l_3g/L，通过高效液相对其 分子量进行检测，分子量在80万到220万道尔顿。
[0012] 本发明的保湿面霜，包括下列重量份数的原料:蒸馏水40-50份、棕榈酸5-7份、橄 榄油5-8份、甘油4-5份、水溶性维生素 E 2-3份、氢氧化钾1-3份、聚乙二醇-8 1-3份、传明 酸粉2-6份、γ -聚谷氨酸5-15份、乳化剂2-6份、苯氧乙醇抗菌剂3-5份、玫瑰精油1份、色素1 份。
[0013] 本发明的保湿面霜的制备方法，包括以下步骤： Α、按组分配比将蒸馏水、棕榈酸、氢氧化钾、水溶性维生素 Ε、传明酸粉、聚乙二醇-8 混合并搅匀； Β、将橄榄油、甘油、γ-聚谷氨酸加入乳化剂中充分搅匀； C、 将步骤Β所得液体缓缓倒入步骤Α所得液体中，混合隔水加热，倒入时均匀搅拌； D、 将苯氧乙醇抗菌剂加入步骤C形成的乳霜中，再加入玫瑰精油和色素，搅拌并降值常 温。
[00M] 实施例1: 高分子γ -聚谷氨酸的制备方法如下： (1) 菌种活化:将地衣芽孢杆菌的原始菌株接种在斜面培养基上，于37 °C培养16小时之 后活化2次，制备成熟的斜面种子； (2) 种子液的制备:将一环活化后的斜面种子接种至装有50ml液体培养基的500ml三角 瓶中，37°C，220rpm培养16小时至对数生长期； 所述种子培养基组成为:K2HP04 0.5 g/L，MgS04.7H20 0.5 g/L，葡萄糖40 g/L，胰蛋 白胨8 g/L ρΗ7·2,其余为水； (3) 发酵罐发酵:将步骤(2)中的种子液以5%的接种量接种至发酵罐，30L发酵罐发酵培 养基装液量为15L，初始发酵温度37°C，罐压0.04Mpa通风量1. Ovvm，转速500rpm;当发酵液 的0D66Q在0 · 580时，控制发酵温度35°C，调节转速至350rpm，通风量1 · 8vvm，利用流加3mol/L 氢氧化钠溶液控制pH在7.5至发酵结束前5小时； 所述发酵培养基组分为：葡萄糖80 g/L，氯化钠 8g/L，MgS〇4*7H2〇 1.5g/L，无水氯化 |丐1.58/1，？6304?7!120 0.028/1，甲硫氨酸0.68/1，精氨酸0.88/1，谷氨酰胺0.58/1，胆碱 0.318/1，吡哆醇0.05 8/1，其余为水； (4)聚谷氨酸的提取:发酵结束后15000r/min离心去菌体，然后用5倍上清液体积的乙 醇，醇沉析出聚谷氨酸，然后再复溶于上清液体积的蒸馏水，利用喷雾干燥方法制备出干粉 聚谷氨酸，同时将上清液用流动相稀释至γ-聚谷氨酸的含量在2g/L，通过高效液相对其分 子量进行检测，分子量在180万道尔顿。
[0015] 本发明的保湿面霜包括如下重量份数的原料：蒸馏水40份、棕榈酸5份、橄榄油6 份、甘油4份、水溶性维生素 E 2份、氢氧化钾1份、聚乙二醇-8 2份、传明酸粉4份、γ-聚谷氨 酸5份、乳化剂4份、苯氧乙醇抗菌剂3份、玫瑰精油1份、色素 1份。
[0016] 本发明的保湿面霜的制备方法，包括以下步骤： Α、按组分配比将蒸馏水、棕榈酸、氢氧化钾、水溶性维生素 Ε、传明酸粉、聚乙二醇-8 混合并搅匀； Β、将橄榄油、甘油、γ-聚谷氨酸加入乳化剂中充分搅匀； C、 将步骤Β所得液