液，将发酵液分别经喷干和冻干制备而成。发酵培养和喷干、冻干操作 均为现有技术中的常规技术手段。
[0068]红法夫酵母为购自中国工业微生物菌种保藏管理中心，菌株编号为CICC33064,具 有产虾青素功能的酵母菌株。
[0069]酵母培养基的原料组成为:葡萄糖1.5 %、蛋白胨1.0 %、酵母膏0.5 %、磷酸二氢钾 0.15%、硫酸镁0.02%、氯化钠2.0%、氯化钙0.02%、谷氨酸0.06%，均为质量百分比。 [0070] 乳酸菌发酵产物为戊糖片球菌PP(Pediococcus pentosaceus PP)经发酵培养得 到的发酵产物;戊糖片球菌PP已于2012年02月22日保藏于中国典型培养物保藏中心，其保 藏编号为CCTCC NO:M 2012029。
[0071] 抗菌肽为山东宝来利来生物工程股份有限公司的产品，商品名称:抗菌肽CEC-38。
[0072] 2制备方法
[0073] 按上述重量份称取原料，混合均匀，即得。
[0074]实施例3:生物增色剂的制备
[0075] 原料组成：
[0076]红法夫酵母喷干粉60份、红法夫酵母冻干粉12份、乳酸菌发酵产物8份、抗菌肽8 份、石粉2份、谷氨酰胺1.5份。
[0077]制备方法同实施例2。
[0078]实施例4:生物增色剂的制备 [0079] 原料组成：
[0080]红法夫酵母喷干粉80份、红法夫酵母冻干粉8份、乳酸菌发酵产物12份、抗菌肽4 份、石粉4份、谷氨酰胺0.5份。
[0081 ]制备方法同实施例2。
[0082]实施例5:生物增色剂在水产动物养殖中的应用 [0083] 1材料与方法
[0084] 1.1试验动物的饲养
[0085] 试验用彩鲫，平均体重(9±0.5)g，暂养于室内水族箱(0.9111\0.5111\0.5111)中，有 效水体积为100L。以充分曝气除氯的自来水作为水源，水温控制在（24± I) °C，24h持续充 氧；日投喂量为鱼体重的1.5%，早、中、晚定时投喂。经过14d的适应训练后将试验鱼按体重 随机分为4组，分别为对照组(CK)、试验组I(YI)、试验组Π (ΥΠ )、竞品组(L)，每组25尾，分 别于 14(1、28(1、42(1、56(1、60(1采样。
[0086] 1.2增色剂的添加量(YI、ΥΠ 为本发明实施例2制备的生物增色剂的两个剂量组）
[0087] 表7生物增色剂添加量(每公斤基础日粮）
[0089] 注:L竞品组是化学合成虾青素的纯品。
[0090] 1.3增色剂的添加方法
[0091] 按表7的添加量，将增色剂用水溶解后均匀喷洒到彩鲫全价饲料当中，通风处至半 干后保存至4°C冰箱。
[0092] 1.4测定的指标
[0093]着色指标:皮肤、鳞片、鳍条总类胡萝卜素的测定，皮肤色度的测定，色素细胞计数； [0094]生长指标:体重、肝体指数；
[0095]免疫性能:脾脏指数、中肾指数；
[0096] 1.5指标测定方法
[0097]肝体指数:肝胰脏重/体重；
[0098]脾脏指数:脾脏重/体重；
[0099] 色素细胞计数:显微镜40x下找到色素细胞，统计一个视野下色素细胞数目进行计 数。
[0100] 色度:采用比色卡比色，记录色度值；
[0101]虾青素的测定:二甲基亚砜法；
[0102] 2试验结果
[0103] 2.1着色指标
[0104] 2.1.1总类胡萝卜素
[0105] 鳞片、皮肤、鳍条总类胡萝卜素含量测定结果，见表8。
[0106] 表8鳞片、皮肤、鳍条总类胡萝卜素含量
[0108] 注：同列具有同字母表示差异不显著(P>〇.05)，具有不同字母表示差异显著(P< 0·05)〇
[0109] 从表8中可以看出，鳞片对总类胡萝卜素的积累规律是先降低然后再小幅度上升， 在14d时，试验组I、试验组Π 、竞品组与对照组均无显著差异，在60d时均显著高于对照组； 皮肤对总类胡萝卜素的显著性关系出现在28d，至60d时仅添加生物增色剂组显著高于对照 组;鳍条总类胡萝卜素的显著性关系也出现在28d，至60d仅添加高剂量生物增色剂组显著高 于对照组。分析原因可能是前期投放到白化桶中，由于鱼类有自动的体色调节机制，类似于 动物的保护色，自动贴近生活环境的颜色，致使色素积累能力下降，出现白化趋势，由于色 素的长期添加情况出现转好，但是由于在42d时，时间进入11月中旬，气温开始下降，摄食减 少，摄入的生物增色剂等均减少，所以色素积累有呈下降趋势。总体，从各组之间的比较来 看，生物增色剂添加组效果要好于竞品组，效果稳定，竞品组添加的虾青素属于化学合成虾 青素，自身虽有增色能力，但是化学合成的虾青素成分单一，且合成过程中会有一些无法去 除的有害物质，长期使用会影响鱼体机能，导致色素积累效果差。
[0110] 2.1.2皮肤色度及色素细胞计数
[0111] 表9皮肤色度及色素细胞计数均值
123456 从表9中可以看出，经60d投喂，试验组I(YI)、试验组Π (ΥΠ )的皮肤色度均值、色 素细胞均值均高于对照组;从图1、图2也可以看出色素细胞个体和色素细胞密度均高于对 照组，所形成的扇区面积也大于对照组，说明本品可以促进色素细胞发育、增殖。 2 2.2生长指标 3 2.2.1体重 4 表10各组体重变化 5
6 从表10中可以看出，试验组I、试验组Π 、竞品组与对照组均无显著性差异，但试验 组I和试验组Π 体重是持续上升的趋势，仅竞品组和对照组出现了一个拐点，说明添加生物 增色剂组无论是在低剂量还是高剂量组均可较好提高体重且效果稳定，高剂量生物增色剂 组效果要优于低剂量组。
[0119] 2.2.2肝体指数
[0120] 表11各组肝体指数变化
[0122] 从表11可以看出，试验组I、试验组Π 、竞品组的肝体指数与对照组均无显著性差 异，但是均呈持续上升的趋势，且生物增色剂高剂量组效果最优。
[0123] 2.3免疫指标
[0124] 表12各组免疫指标
[0127] 从表12可以看出，试验组I、试验组Π 、竞品组与对照组均无显著性差异，添加生物 增色剂组效果稍优于竞品组和对照组，竞品组出现拐点的可能原因是：人工合成虾青素含 有副产物，副产物的长期使用可能会导致鱼体免疫器官受损，限制免疫器官发育。而生物增 色剂自身含有的天然虾青素及营养成分可以促进免疫器官发育，起到提高机体免疫力的作 用。
[0128] 2.4消化指标
[0129] 2.4.1肠道消化酶 [0130]表13各组肠道消化酶变化
[0133] 从表13可以看出，添加生物增色剂组在60d时，蛋白酶活性显著高于对照组和竞品 组，淀粉酶仅添加高剂量生物增色剂组显著高于其他各组，说明添加生物增色剂可以显著 提高消化酶活性且随剂量增加效果显著。
【主权项】
1. 一种生物增色剂，其特征在于，其原料组成为： 红法夫酵母喷干粉60-80份、红法夫酵母冻干粉8-12份、乳酸菌发酵产物8-12份、抗菌 肽4-8份、石粉2-4份、谷氨酰胺0.5_1.5份。2. 如权利要求1所述的生物增色剂，其特征在于，其原料组成为： 红法夫酵母喷干粉70份、红法夫酵母冻干粉10份、乳酸菌发酵产物10份、抗菌肽6份、石 粉3份、谷氨酰胺1份。3. 如权利要求1或2所述的生物增色剂，其特征在于，所述红法夫酵母喷干粉和红法夫 酵母冻干粉，是由红法夫酵母在酵母培养基上进行发酵培养得发酵液，将发酵液分别经喷 干和冻干制备而成。4. 如权利要求3所述的生物增色剂，其特征在于，所述红法夫酵母为高产虾青素功能的 酵母菌株，菌株编号为CICC33064。5. 如权利要求3所述的生物增色剂，其特征在于，所述酵母培养基的原料组成为：葡萄 糖1.5%、蛋白胨1.0%、酵母膏0.5%、磷酸二氢钾0.15%、硫酸镁0.02%、氯化钠2.0%、氯 化钙0.02%、谷氨酸0.06% ;均为质量百分比。6. 如权利要求1或2所述的生物增色剂，其特征在于，所述乳酸菌发酵产物为戊糖片球 菌PP(Pediococcus pentosaceus PP)经发酵培养得到的发酵产物;戊糖片球菌PP的保藏编 号为CCTCC N0:M 2012029。7. 权利要求1-6任一项所述的生物增色剂的制备方法，其特征在于，将红法夫酵母喷干 粉、红法夫酵母冻干粉、乳酸菌发酵产物、抗菌肽、石粉和谷氨酰胺混合均匀，即得。8. 权利要求1-6任一项所述的生物增色剂在水产动物养殖中应用。9. 如权利要求8所述的应用，其特征在于，应用方法为:将权利要求1-6任一项所述的生 物增色剂按质量分数为1-3%。的比例添加到水产动物饲料中，30天为一个投喂周期或长期 投喂。10. -种水产动物养殖增色用饲料，是由在水产动物基础饲料中按质量分数为1-3%。添 加权利要求1 -6任一项所述的生物增色剂制备而成。
【专利摘要】本发明公开了一种生物增色剂，其原料组成为：红法夫酵母喷干粉60-80份、红法夫酵母冻干粉8-12份、乳酸菌发酵产物8-12份、抗菌肽4-8份、石粉2-4份、谷氨酰胺0.5-1.5份。本发明还公开了该生物增色剂的制备方法和在水产动物养殖中的应用。本发明的生物增色剂以红法夫酵母为有效成分，营养价值丰富，蛋白含量高且富含多种微量元素及辅酶，还富含虾青素，并配以多种营养物质，作为水产动物养殖用增色剂，具有增色效果稳定的优点。
【IPC分类】A23K20/147, A23K20/142, A23K50/80, A23K10/16
【公开号】CN105639204
【申请号】
【发明人】单宝龙, 陈雷, 谷巍, 陈玉春, 王红, 赵倩, 高绪娜, 郭婷婷, 李光, 辛国芹, 张高娜, 王春凤
【申请人】山东宝来利来生物工程股份有限公司
【公开日】2016年6月8日
【申请日】2016年1月18日