一种新的环金合欢烷型倍半萜类化合物及其制备方法和医药用图
【技术领域】
[0001] 本发明属于药物技术领域，具体涉及从金钗石斛的干燥茎中分离得到的一种具有 神经保护作用的环金合欢烷型倍半萜类化合物及其制备方法。
【背景技术】
[0002] 金钗石斛(Dendrobium nobile Lindl.)为我国传统名贵中药，为兰科石斛属植 物，又名金钗石、扁金钗、扁黄草等，其茎为传统中药石斛的来源之一，为历版中国药典所收 载。石斛早在《神农本草经》中就有记载，《本草纲目》称它有"强阴益精、厚肠胃、补内孢不 足、轻身延年"之功效。《本草衍义》、《本草纲目拾遗》及《本草从新》等历代本草都备加推崇， 素有"千金草"之称。金钗石斛，性微寒，味甘，用于热病伤津、口干烦渴、病后虚热、目暗不 明、萎缩性胃炎、浅表性胃炎、慢性结肠炎等，是石斛夜光丸、石斛明目丸、石斛浸膏溶液、石 斛清胃散等制剂的重要配伍。金钗石斛在中国药典2010年版中列为药用石斛的首要来源。
[0003] 近20年来，国内外学者对石斛属植物的化学成分进行了探索和研究，发现这些植 物所含的化学成分类型多样。金钗石斛的化学成分主要有生物碱类、多糖类、黄酮类、酚类、 倍半萜类、香豆素类及留体糖苷类化合物。生物碱类成分是最早从石斛属植物中分离并进 行结构鉴定的化合物，也是兰科植物的特征性成分。近些年来，国内外学者对金钗石斛中的 生物碱类成分进行了大量的研究，至今已鉴定出的生物碱主要为倍半萜类生物碱，其中石 斛碱是其特征性成分。
[0004] 金钗石斛的药理作用主要表现在对心血管系统的作用、对神经系统的作用、抗肿 瘤和抗诱变作用、抗氧化和抗衰老作用、抗白内障作用及免疫抑制、钙通道抑制、抗炎作用 和对胃肠道的作用。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的是提供一种从金钗石斛的干燥茎中分离得到的一种具有神经保护 作用的环金合欢烷型倍半萜类化合物及其制备方法。
[0006] 本发明的上述目的是通过下面的技术方案得以实现的：
[0007] 具有下述结构式的化合物(I)，
[0009]所述的化合物（I)的制备方法，包含以下操作步骤：（a)将金钗石斛的干燥茎粉碎， 用80~90 %乙醇热回流提取，合并提取液，浓缩至无醇味，依次用石油醚、乙酸乙酯和水饱 和的正丁醇萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（b)步骤(a)中 乙酸乙酯萃取物用大孔树脂除杂，先用10%乙醇洗脱6个柱体积，再用75%乙醇洗脱10个柱 体积，收集75%乙醇洗脱液，减压浓缩得75%乙醇洗脱物浸膏；（c)步骤(b)中75%乙醇洗脱 浸膏用正相硅胶分离，依次用体积比为85:1、55:1、25:1、10:1和1:1的二氯甲烷-甲醇梯度 洗脱得到5个组分；（d)步骤(c)中组分4用正相硅胶进一步分离，依次用体积比为15:1、10:1 和5:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到3个组分；（e)步骤(d)中组分2用十八烷基硅烷键合的 反相硅胶分离，用体积百分浓度为70 %的甲醇水溶液等度洗脱，收集8~10个柱体积洗脱 液，洗脱液减压浓缩得到纯的化合物(I)。
[0010]进一步地，所述大孔树脂为AB-8型大孔吸附树脂。
[0011] 进一步地，所述用乙醇热回流提取采用的乙醇浓度为85%。
[0012] -种药物组合物，其中含有治疗有效量的所述的化合物（I)和药学上可接受的载 体。
[0013] 所述的化合物(I)在制备神经保护的药物中的应用。
[0014] 所述的药物组合物在制备神经保护的药物中的应用。
[0015] 本发明化合物用作药物时，可以直接使用，或者以药物组合物的形式使用。
[0016] 该药物组合物含有治疗有效量的本发明化合物（I)，其余为药物学上可接受的、对 人和动物无毒和惰性的可药用载体和/或赋形剂。
[0017] 所述的可药用载体或赋形剂是一种或多种选自固体、半固体和液体稀释剂、填料 以及药物制品辅剂。将本发明的药物组合物以单位体重服用量的形式使用。本发明药物可 通过口服或注射的形式施用于需要治疗的患者。用于口服时，可将其制成片剂、缓释片、控 释片、胶囊、滴丸、微丸、混悬剂、乳剂、散剂或颗粒剂、口服液等;用于注射时，可制成灭菌的 水性或油性溶液、无菌粉针、脂质体或乳剂等。
【附图说明】
[0018] 图1为化合物(I)结构式；
[0019 ]图2为化合物（I)理论ECD值与实验ECD值比较。
【具体实施方式】
[0020]下面结合实施例进一步说明本发明的实质性内容，但并不以此限定本发明保护范 围。尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对 本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。
[0021 ]实施例1:化合物(I)分离制备及结构确证
[0022] 试剂来源：乙醇、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、二氯甲烷为分析纯，购自上海凌峰化 学试剂有限公司，甲醇，分析纯，购自江苏汉邦化学试剂有限公司。
[0023] 制备方法：（a)将金钗石斛的干燥茎（8kg)粉碎，用85 %乙醇热回流提取（25L X 3 次），合并提取液，浓缩至无醇味(3L)，依次用石油醚(3LX3次）、乙酸乙酯(3LX3次)和水饱 和的正丁醇(3LX3次)萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物(345g)和正丁醇萃取 物；（b)步骤(a)中乙酸乙酯萃取物用AB-8型大孔树脂除杂，先用10%乙醇洗脱6个柱体积， 再用75%乙醇洗脱10个柱体积，收集75%乙醇洗脱液，减压浓缩得75%乙醇洗脱物浸膏 (133g);(c)步骤(b)中75%乙醇洗脱浸膏用正相硅胶分离，依次用体积比为85:1(8个柱体 积）、55:1 (8个柱体积）、25:1 (6个柱体积）、10 :1 (8个柱体积)和1:1 (5个柱体积）的二氯甲 烷-甲醇梯度洗脱得到5个组分；（d)步骤(c)中组分4(27g)用正相硅胶进一步分离，依次用 体积比为15:1(8个柱体积）、10:1(10个柱体积)和5:1(6个柱体积)的二氯甲烷-甲醇梯度洗 脱得到3个组分；（e)步骤(d)中组分2(13g)用十八烷基硅烷键合的反相硅胶分离，用体积百 分浓度为70 %的甲醇水溶液等度洗脱，收集8-10个柱体积洗脱液，洗脱液减压浓缩得到纯 的化合物（I)(32mg)。
[0024] 结构确证:无色油状物;册43頂3显示[1+似]+为111/2 269.1224，结合核磁特征可 得分子式为C15H18〇3，不饱和度为7。核磁共振氢谱数据δ Η(ΡΡπι，DMS〇-d6，500MHz): H-2 (2.48， m)，H-2(2.21，m)，H-4(3.19，m)，H-4(3.05，m)，H-6(2.48，br，d，J=10.0)，H-7(6.04，dd，J = 16.1，10.0)，H-8(6.37，d，J=16.1)，H-10(5.81，br，s)，H-12(0.82，s)，H-13(0.94，s)，H-14 (4.86，111)，!1-14(4.47，111)，!1-15(4.96,8,2!〇 ;核磁共振碳谱数据5。(？?111，〇13〇-(16，1251抱）： 27.9(Ca-C)，59.8(CH2,2-C)，204.6(C，3-C)，51.7(CH2,4-C)，145.5(C，5-C)，56.4(CH，6-C)，138·7(CH，7-C)，124.2(CH，8-C)，161·1(C，9-C)，114.5(CH，10-C)，173.6(C，11-C)，21.1 (01 3，12-〇,30.3(013，13-〇，111.2((：!12，14-〇,70.2((：!12，15-〇;碳原子标记参见图1。红 外光谱表明该化合物含有α，β-不饱和-γ -内酯和羰基（1760,1648CHT1) ,Η-NMR谱数据显示 两个甲基信号[δH0.82(s，Me-12)，0.94(s，Me-13)]，一个含氧亚甲基信号[δH4.96(2H，s，H-l5)]，一个烯属亚甲基信号[δH4.47(m，H-14)和4.86(m，H-14)]，以及三个烯属次甲基质子 [SH5.81(br，s，H-10)，6.04(dd，J=16.1，10.0Hz，H-7)，6.37(d，J=16.1Hz，H-8)]</ 3CNMR 谱 显示了 15个碳信号，包括两个甲基，四个亚甲基[一个含氧亚甲基SC70.2(C-15)，一个烯属 亚甲基6(：111.2((：-14)]，四个次甲基[三个烯属次甲基6(：114.5((：-10)，124.2((：-8)和138.7 (0-7)]，五个季碳[两个烯属季碳6(：145.5((：-5)和161.1((：-9)，两个羰基碳6(：173.6((：-11) 和204.6(03)]。腿8<：谱中!1-2( 5!12.48)，!1-4(5!13.19)，!13-12，!13-13和!12-14与次甲基碳（(：-6)，H 2-2，H-6，H3-12和H3-13与C-1，以及H2-4，H-6和H 2-14与C-5的相关性表明该化合物含有 一个环己烷，且其连有羰基，偕二甲基基团，以及一个环外亚甲基。次甲基C-6与反式烯烃(J =16.1抱）相连，反式烯烃的另一侧((：-8)与€^-不饱和-丫-内酯环相连。腿8(：谱中!1-7与(：-9，!1-8与09，(：-10和(：-15，!1-10与(：-11，以及!12-15与(：-8，(：-9，(：-10和(：-11