一种用于提取庆大霉素的提纯竿的制备方法
【技术领域】
[0001]本发明公开了一种用于提取庆大霉素的提纯竿的制备方法，属于药物提取领域。
【背景技术】
[0002]庆大霉素是小单孢菌产生的一种氨基糖苷类抗生素，主要用于治疗细菌感染，尤其是革兰氏阴性菌引起的感染。庆大霉素是一种多组分抗生素，其中，主要包含Cl、Cla、C2、C2a四种组分，临床上常用其硫酸盐的形式。
[0003]庆大霉素传统的制备方法是采用柱色谱对含有庆大霉素的发酵液进行一次性的分离处理。该方法虽然简单易行，但所得产品的纯度不高。《中华人民共和国药典》2010版(以下简称《药典》)对庆大霉素的质量提出了更高的要求。《药典》规定，庆大霉素中各组分的比例，以质量百分比计为:Cl占25%-50%，Cla占15%-40%，C2和C2a的总量占20%_50%。此外，《药典》还规定了庆大霉素的杂质限量:以质量百分比计，西索米星<2.0%，小诺霉素<3.0%;单杂< 2.0%，总杂质< 5.0%。《药典》的上述规定，导致传统的制备方法很难制备出合格的药用级庆大霉素。
【发明内容】
[0004]本发明主要解决的技术问题:针对目前传统庆大霉素的制备方法，虽然方法易行，但所得产品纯度不高，达不到合格的药用级庆大霉素的问题，本发明首先利用竹竿中竹纤维具有良好的透气性、吸湿除湿及抗紫外线的特性，通过与碳酸钠溶液预处理，再高压下进行保持处理，扩大竹竿内部纤维空间结构，随后将其炭化，形成改性炭化竹纤维，然后与硅酸钠混合，在强碱环境下，在竹竿内部形成硅凝胶后吸附所添加的生物活性剂，提高吸附特性，最后在庆大霉素所针对的病原体溶液中浸泡，提高对庆大霉素的吸附，从而制备得用于提取庆大霉素的提纯竿。
[0005]为了解决上述技术问题，本发明所采用的技术方案是:
(1)取直径为3?5cm，长为I?1.5m的竹竿浸泡于质量分数为35 %的乙醇溶液中，在温度为40?45°C，700?900MHz下浸泡I?3h，再将竹竿取出放入90 °C的干燥箱中干燥20?30min，待干燥完成后将竹竿浸泡在质量分数为50%的碳酸钠溶液中，在80°C下浸泡30?40min；
(2)待上述浸泡结束后，将竹竿取出放入高温高压炉中，再进行升压，待竹竿表面有裂纹出现时，停止升压，保持压力40?50s后进行泄压，在2?3min内泄压至标准大气压，将竹竿取出放入管式炭化炉中，使用氮气，以20°C/min升温至400?500°C，保持温度I?2h;
(3)待上述炭化结束后将竹竿取出放入容器中，向其中加入蒸馏水浸泡竹竿，分别向容器中加入蒸馏水体积5?8 %的质量分数为20 %的硅酸钠溶液、炭化后竹竿质量I?2 %的琥珀酸二异辛酯磺酸钠及炭化后竹竿质量0.4?0.9 %的烷基多苷，搅拌均匀；
(4)在上述搅拌结束后，使用质量分数为46%的氢氧化钠溶液调节pH至10?11，密封容器，使用氢气将容器内的空气排出后，再对容器进行加热，加热至80?90°C，保持温度2?3h，停止加热，自然冷却至室温后将竹竿取出放置于紫外灯下40?50min;
(5)待上述照射结束后将竹竿取出，放置在玻璃容器中，向其中加入浓度为1.3 X 15?1.8X 105CFU/mL的大肠杆菌菌液，再将玻璃容器移至培养室内，在30?35°C下放置12?13h后取出，放置于O?4°C下储藏，即可得到用于提取庆大霉素的提纯竿。
[0006]本发明的应用方法:将庆大霉素发酵液放入离心机中，在1300?1500r/min下，离心分离5?7min后收集离心液，将本发明所制得的提纯竿的一端密封，将收集的离心液从提纯竿的另一端倒入提纯竿中后密封提纯竿，使用氮气向其中冲压至0.2?0.3MPa，在30?35°C下直至提纯竿内的液体全部渗出，再将提纯竿取出放入容器中，向其中加入混合溶液浸泡提纯竿，在22?23KHz下振荡30?40min后进行过滤，收集过滤液放入旋转蒸发仪中，在80?90°C下旋转蒸发10?15min后，将浓缩液放入喷雾干燥机中进行喷雾干燥即可得到纯度达到93%以上，杂质小于3%，C1含量为38%?45%，Cla含量为38%?42%的药用级庆大霉素。
[0007]本发明的有益效果:
(1)本发明所得的提纯竿制作成本低，易于操作；
(2)本发明所得的提纯竿提取的庆大霉素达到药用级。
【具体实施方式】
[0008]取直径为3?5cm，长为I?1.5m的竹竿浸泡于质量分数为35 %的乙醇溶液中，在温度为40?45°C，700?900MHz下浸泡I?3h，再将竹竿取出放入90 °C的干燥箱中干燥20?30min，待干燥完成后将竹竿浸泡在质量分数为50%的碳酸钠溶液中，在80°C下浸泡30?40min;待上述浸泡结束后，将竹竿取出放入高温高压炉中，再进行升压，待竹竿表面有裂纹出现时，停止升压，保持压力40?50s后进行泄压，在2?3min内泄压至标准大气压，将竹竿取出放入管式炭化炉中，使用氮气，以20°C/min升温至400?500°C，保持温度I?2h;待上述炭化结束后将竹竿取出放入容器中，向其中加入蒸馏水浸泡竹竿，分别向容器中加入蒸馏水体积5?8%的质量分数为20%的硅酸钠溶液、炭化后竹竿质量I?2%的琥珀酸二异辛酯磺酸钠及炭化后竹竿质量0.4?0.9 %的烷基多苷，搅拌均匀;在上述搅拌结束后，使用质量分数为46%的氢氧化钠溶液调节pH至10?11，密封容器，使用氢气将容器内的空气排出后，再对容器进行加热，加热至80?90°C，保持温度2?3h，停止加热，自然冷却至室温后将竹竿取出放置于紫外灯下40?50min;待上述照射结束后将竹竿取出，放置在玻璃容器中，向其中加入浓度为1.3 X 15?1.8 X 105CFU/mL的大肠杆菌菌液，再将玻璃容器移至培养室内，在30?35°C下放置12?13h后取出，放置于O?4°C下储藏，即可得到用于提取庆大霉素的提纯竿。
[0009]实例I
取直径为4cm，长为1.2m的竹竿浸泡于质量分数为35%的乙醇溶液中，在温度为42°C，800MHz下浸泡2h，再将竹竿取出放入90 °C的干燥箱中干燥25min，待干燥完成后将竹竿浸泡在质量分数为50 %的碳酸钠溶液中，在80 0C下浸泡35min;待上述浸泡结束后，将竹竿取出放入高温高压炉中，再进行升压，待竹竿表面有裂纹出现时，停止升压，保持压力45s后进行泄压，在2min内泄压至标准大气压，将竹竿取出放入管式炭化炉中，使用氮气，以20°C/min升温至450 0C，保持温度2h;待上述炭化结束后将竹竿取出放入容器中，向其中加入蒸馏水浸泡竹竿，分别向容器中加入蒸馏水体积7%的质量分数为20%的硅酸钠溶液、炭化后竹竿质量1.5%的琥珀酸二异辛酯磺酸钠及炭化后竹竿质量0.6%的烷基多苷，搅拌均匀;在上述搅拌结束后，使用质量分数为46%的氢氧化钠溶液调节pH至11，密封容器，使用氢气将容器内的空气排出后，再对容器进行加热，加热至85°C，保持温度2.5h，停止加热，自然冷却至室温后将竹竿取出放置于紫外灯下45min;待上述照射结束后将竹竿取出，放置在玻璃容器中，向其中加入浓度为I.5 X 105CFU/mL的大肠杆菌菌液，再将玻璃容器移至培养室内，在32°C下放置12h后取出，放置于2°C下储藏，即可得到用于提取庆大霉素的提纯竿。
[0010]将庆大霉素