一种人体对日照反应的检测试剂盒和方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及基因检测，具体涉及人体日照反应基因检测试剂盒。
【背景技术】
[0002] 日光对皮肤造成的损害有很多种。首先是光老化，使得皮肤变粗糙，导致色素沉 着、毛细血管扩张。其次是引起光线性皮肤病，如多形日光疹、慢性光化性皮炎、类网织细 胞增生症等。最后，光线会加剧很多皮肤病的病情，这些疾病包括色素性皮肤病（如雀斑、 黄褐斑）、脂溢出性皮肤病（如痤疮）、结缔组织病（如红斑狼疮、皮肌炎）、皮肤癌（基底细 胞癌、鳞状细胞癌等）。 在我国，皮肤癌作为一种恶性肿瘤占全部恶性肿瘤发病的1. 5%，南方地区高于北方地 区。不适量的日光照射是皮肤健康的主要原发因素。人体本身对日光，尤其是其中的紫外 线敏感程度不同，也导致皮肤患病风险不同。
[0003] 随着我国人民群众生活水平的日益提高，越来越多的人热衷各种户外运动和旅 游，这也无形中加剧了皮肤病的隐患。同时，越来越多的人，尤其是女士对自身皮肤的美容 美白要求越来越高。这都需要我们从更根本的角度来对自身皮肤对抗日照的机理有清晰的 了解。
【发明内容】
[0004] 有鉴于此，本发明提供了一种人体对日照反应的基因检测试剂盒，该试剂盒对受 测者的相关基因进行检测，分析得到其对日照的敏感程度，评估皮肤健康风险，且PCR扩增 反应在同一台PCR仪上同步进行并具备检测的高效性、特异性。
[0005] -种日照反应基因检测试剂盒，包括盒体及盒体内单独存放的试剂，存放的试剂 包括： (1)针对3个基因 SNP多态位点的PCR反应引物组： 针对SNP RS12203592的引物组在： 5, -GGTGGGTAAAAGAAGGC-3， 5' -CCACAGGGGAATTTA-3' 5' -GATTTTAAGTTGGGGA-3' 5, -TAAGAAGCACTGGCAT-3， 针对SNP RS12896399的引物组： 5' -GTCAGTATATTTTGGGG-3' 5, -GCTGTGACAAAGAGAA-3' 5' -GAATGAATTCAAATATTGC-3' 5' -ATCCAGTTAAGAGAAC-3' 针对SNP RS1393350的引物组： 5' -AGTCCCTTCTCTGCAACA-3' 5' -AAAAGACCACACAGATTTC-3' 5, -TACCTGGCCCCTCAG-3' 5, -TCAAGGAGCAAATAGCTC-3， (2) PCR扩增试剂； (3) 琼脂糖凝胶电泳分析试剂。
[0006] 本发明提供的日照反应基因检测试剂盒的有益效果是：通过PCR引物的设计使多 个PCR扩增反应在同一台PCR仪上同步进行，对受测者的相关基因进行检测，并实现检测的 高效性、特异性，分析得到其对日光照射的反应，皮肤癌风险评估，从而为受测者提供一个 保护皮肤健康，降低皮肤癌风险和合理户外活动的有效方案。
【附图说明】
[0007] 图1是反应产物琼脂糖凝胶电泳图。
【具体实施方式】
[0008] 日照反应基因检测试剂盒，包括盒体及盒体内单独存放的试剂，存放的试剂包 括： (1) 针对3个基因 SNP多态位点的PCR反应引物组： 针对SNP RS12203592的引物组在： 5, -GGTGGGTAAAAGAAGGC-3， 5' -CCACAGGGGAATTTA-3' 5' -GATTTTAAGTTGGGGA-3' 5, -TAAGAAGCACTGGCAT-3， 针对SNP RS12896399的引物组： 5' -GTCAGTATATTTTGGGG-3' 5, -GCTGTGACAAAGAGAA-3' 5' -GAATGAATTCAAATATTGC-3' 5' -ATCCAGTTAAGAGAAC-3' 针对SNP RS1393350的引物组： 5' -AGTCCCTTCTCTGCAACA-3' 5' -AAAAGACCACACAGATTTC-3' 5, -TACCTGGCCCCTCAG-3' 5, -TCAAGGAGCAAATAGCTC-3， (2) PCR扩增试剂； (3) 琼脂糖凝胶电泳分析试剂。
[0009] 下面将结合实施例对本发明提供的方法予以进一步的说明。
[0010] 本实施例对测试者采用日照反应基因检测试剂盒同时检测3个基因的SNP多态 位点，并根据基因分型结果，分析其对日光照射的反应，皮肤癌风险评估，从而为受测者提 供一个保护皮肤健康，降低皮肤癌风险和合理户外活动的有效方案。
[0011] 使用到的日照反应基因检测试剂盒内试剂由以下组成： (1) 针对3个基因 SNP多态位点的PCR反应引物组： 针对SNP RS12203592的引物组在： 5, -GGTGGGTAAAAGAAGGC-3， 5' -CCACAGGGGAATTTA-3' 5' -GATTTTAAGTTGGGGA-3' 5, -TAAGAAGCACTGGCAT-3， 针对SNP RS12896399的引物组： 5' -GTCAGTATATTTTGGGG-3' 5, -GCTGTGACAAAGAGAA-3' 5' -GAATGAATTCAAATATTGC-3' 5' -ATCCAGTTAAGAGAAC-3' 针对SNP RS1393350的引物组： 5' -AGTCCCTTCTCTGCAACA-3' 5' -AAAAGACCACACAGATTTC-3' 5, -TACCTGGCCCCTCAG-3' 5, -TCAAGGAGCAAATAGCTC-3， (2) PCR 扩增试剂：10XPCR 缓冲液，该 PCR 缓冲液为 100mM Tris-HCl pH8. 3,500mM KC1，15mM MgC12 ;dNTPs混合物，该dNTPs混合物为三磷酸鸟嘌呤脱氧核苷酸dGTP，三磷 酸腺嘌呤脱氧核苷酸dATP，三磷酸胸腺嘧啶脱氧核苷酸dTTP，三磷酸胞嘧啶脱氧核苷酸 dCTP四种核苷酸，各组分浓度为2. 5mM ;5υ/μ 1热启动Taq酶。
[0012] (3)琼脂糖凝胶电泳分析试剂：琼脂糖、TAE缓冲液、DNA分子量标准、Goldview 染色液和DNA上样缓冲液，该缓冲液以溴酚蓝为指示剂稀释至IX后使用。
[0013] 使用上述日照反应基因检测试剂盒按如下步骤进行检测： (1)提取样本基因组DNA。
[0014] 采集该测试者唾液，向l_2ml唾液样品中加入500ul提取缓冲溶液，该DNA提取 缓冲溶液溶剂为50mM的Tris-HCl pH7. 4、0. 5mM的EDTA和50mM的NaCl，反复吹打混匀 后，8000Xg离心5分钟，弃去上清，此步骤重复一次；得到的沉淀中加入500ul裂解液， 该裂解液溶剂为 50mM Tris-HCl pH7.4,50mM Tris-HCl ρΗ7· 4,150mM NaCl，lmM EDTA，1% Triton x_100，l% Sodium deoxycholate，0.1% S