分离测定丁酸氯倍他松及其制剂中工艺杂质的方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于分析化学领域，具体涉及一种分离测定丁酸氯倍他松及其制剂中工艺 杂质的方法。
【背景技术】
[0002] 丁酸氯倍他松是由英国的葛兰素史克公司开发，用于短期治疗和控制湿疹和皮 炎，包括特应性湿疹、原发刺激性和过敏性皮炎。最早于1975年在英国上市，后陆续在爱尔 兰、加拿大、比利时、德国、意大利、瑞士、荷兰、日本等国家上市，但未在美国上市。2011年5 月5日，GLAXO WELLCOME制药公司在国内获得进口注册批件，原料药未在国内上市，丁酸氯 倍他松化学名21-氯-9α-氟-17α-羟基-16β_甲基孕留-1,4-二烯-3,11，20_三酮丁酸酯，分 子式为C26H32CIFO5。丁酸氯倍他松结构式为：
[0003]
[0004] 通常来说，一种药物杂质总含量应小于1.0%，单个杂质含量要小于0.1 % ;对于制 备丁酸氯倍他松过程中产生的杂质或引入的有关物质，不论是在原料药还是制剂中均需要 进行严格控制。目前公开的分离测定丁酸氯倍他松及其相关杂质的方法中，其中公开的杂 质Α与本申请中杂质列表中的杂质Α、公开的杂质F与本发明杂质列表中的杂质D结构相同， 其余均不同，且方法中杂质A与杂质F、杂质C与杂质D完全不能分离、丁酸氯倍他松主峰与相 邻杂质也不能很好的分离。
[0005] 因此到目前为止，还没有公开的方法报道可同时分离本申请中A-G和I的杂质。因 此开发一种有效分离丁酸氯倍他松及其制剂中8种工艺杂质的方法，对于药物的质量控制 及降解途径研究都十分有意义。
【发明内容】
[0006] 有鉴于此，本发明的目的在于提供一种分离测定丁酸氯倍他松及其制剂中工艺杂 质，用高效液相色谱法分离测定丁酸氯倍他松及其制剂中工艺杂质A-G和I，可同时实现丁 酸氯倍他松及A-G和I的分离和检测，该方法分离度好，专属性强，灵敏度高;且操作简单，具 有简便、快速的优点。
[0007] 为实现上述目的，本发明的技术方案为：
[0008] 分离测定丁酸氯倍他松及其制剂中工艺杂质的方法，以十八烷基硅烷键合硅胶为 固定相，以流动相A和流动相B为流动相梯度洗脱进行固液分离，所述制剂中工艺杂质为A-G 和I的一种或多种，具体结构式如下所示：
[or…
[0010] 所述流动相A为无机相，所述的流动相B为有机溶剂。
[0011] 目前公开的分离测定丁酸氯倍他松及其相关杂质的方法中，其中公开的杂质A与 本申请中杂质列表中的杂质A、公开的杂质F与本发明杂质列表中的杂质D结构相同，其余均 不同，且方法中杂质A与杂质F、杂质C与杂质D完全不能分离、丁酸氯倍他松主峰与相邻杂质 也不能很好的分离。本申请中的方法成功解决了丁酸氯倍他松及其制剂中工艺杂质A-G和I 的有效分离问题，进而实现了杂质有效控制，从根本上保证了产品质量。
[0012] 进一步，所述梯度洗脱设置如下：
[0013]
[0014] 所述流动相A为水，所述流动相B为乙腈。
[0015]作为一种优选，所述梯度洗脱设置如下：
[0016]
[0017] 本发明的目的之二在于提供一种利用高效液相色谱法分离测定丁酸氯倍他松及 其制剂中工艺杂质的方法，采用的色谱柱是以十八烷基硅烷键合硅胶为填料，以流动相A和 流动相B为流动相进行梯度洗脱，进入检测器进行检测;所述的流动相A为水，所述的流动相 B为乙腈;所述制剂中工艺杂质包括A-G和I的一种或多种。
[0018] 进一步，所述制剂中工艺杂质为A-G和I，具体方法包括以下步骤：
[0019] 1)分别取待测样品丁酸氯倍他松及其制剂中工艺杂质A-G和I的对照品，用稀释剂 溶解制成待测样品及所述各杂质的对照品溶液，分别取待测样品丁酸氯倍他松及其各工艺 杂质对照品溶液进样，进行高效液相色谱分析，确定待测样品丁酸氯倍他松及其各杂质的 保留时间；
[0020] 2)取供试品加稀释剂制成供试品溶液，再取稀释剂作为空白溶液，分别取供试品 溶液及空白溶液进样，进行高效液相色谱分析，记录色谱图，按限度法根据供试品溶液与对 照品溶液中杂质的峰面积比较杂质A-G和I的含量。
[0021] 判定结果:若供试品溶液记录色谱图中有与对照品溶液记录色谱图中保留时间一 致的色谱峰，其峰面积不得大于对照品溶液中相应杂质的峰面积，则判为符合规定。
[0022] 作为一种优选，具体可按照以下步骤实现：
[0023] (1)取丁酸氯倍他松适量，用乙腈溶解样品，配制成每lml含丁酸氯倍他松1.0-3.0mg的样品溶液；
[0024] (2)选用型号为岛津LC-2010AHT的色谱仪，色谱柱型号为YMC-Pack 0DS-A(150X 4.6mm，3μπι)，流动相A为水;流动相B为乙腈;取步骤(1)的样品溶液10μ1注入液相色谱仪中， 设置流动相流速为1.5ml/min，检测波长为241nm，色谱柱柱箱温度为40°C，按下表1所示的 数据进行线性梯度洗脱，完成丁酸氯倍他松有关物质的分离及测定。
[0025] 表1进行线性梯度洗脱流动相A和流动相B的体积
[0026]
[0027] 作为一种优选，所述色谱柱选择的是YMC-Pack 0DS-A色谱柱。
[0028]进一步，在分离测定之前，采用乙腈溶解待测样品，配制的待测样品浓度为： 1·Omg/ml-3·Omg/ml〇
[0029] 进一步，其特征在于，所述色谱柱的规格为150 X 4.6mm，3μηι。
[0030] 进一步，所述流动相流速为0 · 5-2 · Oml/min。
[0031] 进一步，所述检测器为紫外检测器，所述检测器的检测波长为210-280nm。
[0032] 进一步，所述色谱柱柱箱温度为25-45°C。
[0033]进一步，所述稀释剂为乙腈。
[0034] 本发明的有益效果在于:本发明提供的分离测定丁酸氯倍他松及其制剂中工艺杂 质的方法，采用高效液相色谱法对丁酸氯倍他松及其制剂中工艺杂质A-G和I进行分离和检 测，可在44分钟内将丁酸氯倍他松及其制剂中工艺杂质A-G和I完全分离并进行检测，该色 谱系统可将样品所有杂质和碱、光照的剧烈降解条件下产生的杂质均能很好分离，表明本 方法的灵敏度及专属性好。本发明解决了丁酸氯倍他松及其制剂的8种工艺杂质的分离测 定问题，从而确保了丁酸氯倍他松及其制剂的质量可控，并最终确定产品的安全有效，从根 本上保证了产品质量。该方法分离度好，且准确度高;且操作简单，具有简便、快速的优点。
【附图说明】
[0035] 图1为空白溶剂的高效液相色谱图。
[0036] 图2为丁酸氯倍他松及杂质A-G和I的混合溶液高效液相色谱图。
[0037] 图3为丁酸氯倍他松对比试验的高效液相色谱图。
[0038] 图4为丁酸氯倍他松乳膏空白辅料的高效液相色谱图。
[0039] 图5为丁酸氯倍他松乳膏的高效液相色谱图。
[0040] 图6为丁酸氯倍他松碱降解的高效液相色谱图。
[0041 ]图7为丁酸氯倍他松光降解的高效液相色谱图。
【具体实施方式】
[0042] 以下将参照附图，对本发明的优选实施例进行详细描述。优选实施例中未注明具 体条件的实验方法，通常按照常规条件，所举实施例是为了更好地对本发明的内容进行说 明，但并不是本发明的内容仅限于所举实施例。所以熟悉本领域的技术人员根据上述发明 内容对实施方案进行非本质的改进和调整，仍属于本发明的保护范围。
[0043] 以下实施例中，采用的仪器及色谱条件如下：
[0044] 高效液相色谱仪:岛津LC-2010AHT
[0045] 色谱柱：YMC-Pack ODS-A( 150X4.6mm，3μπι)
[0046] 流动相:流动相Α:水；
[0047] 流动相B:乙腈。
[0048] 流动相A和流动相B按下表进行线性梯度洗脱：
[0049]
[0050] 检测器检测波长:241nm [0051 ]流动相流速：1 · 5ml/min
[0052] 色谱柱柱箱柱温:4(TC
[0053] 进样量：10μ1
[0054] 稀释剂(溶解对照品和待测样品的溶剂）：乙腈。
[0055] 实施