人体lbm（瘦体重）检测试剂盒和方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及基因检测，具体涉及人体LBM基因检测试剂盒。
【背景技术】
[0002] 肥胖是身体成分发生了变化，身体成分是指人的所有组织器官的总成分，它的单 位就是体重，分成脂肪和非脂肪两种成分。前者称为脂体重(或称肥体重)，后者称为瘦体重 (或称去脂体重)，亦称"去脂体重"（化t-化ee body),为除脂肪W外身体其他成分的重量， 肌肉是其中的主要部分。
[000引"瘦体重"由身体细胞重量（BCW)、细胞外水分（ECW)、和去脂的固体部分（FFS)组 成。其主要成分是骨骼、肌肉等。正常情况，瘦体重与身体脂肪含量有一定比例。测量瘦体 重对促进能量转换和耗氧、调节水盐代谢等具有重要意义。在运动训练中，运动员保持较高 的瘦体重，对提高有氧耐力和运动能力是非常有好处的。运动员的运动能力在相当程度上 决定于骨骼肌类型和骨骼肌的收缩能力，因此，W骨骼肌为主要成分的瘦体重占总体中的 比例，对运动员的运动能力有很大影响。瘦体重发达说明身体强壮体质好，如运动员或一些 平时就注重锻炼身体的人，他们肌肉强健，虽然体重高但却不属于肥胖。
[0004] 瘦体重的计算公式是： 瘦体重=体重(W)-脂肪重量（f ) 脂肪重量=体重（W) X体脂率（F%) 瘦体重主要由肌肉组成，而肌肉在体内的最大含量是高度遗传的，基因是决定因素。后 天的训练和运动增加的瘦体重只能在基因决定的最高含量W下。
【发明内容】
[0005] 有鉴于此，本发明提供了一种LBM基因检测试剂盒，该试剂盒对受测者的相关基 因进行检测，分析得到其体内潜在的LBM含量水平，并计算瘦体重数值，且PCR扩增反应在 同一台PCR仪上同步进行并具备检测的高效性、特异性。
[0006] 一种LBM基因检测试剂盒，包括盒体及盒体内单独存放的试剂，存放的试剂包括： (1)针对2个基因 SNP多态位点的PCR反应引物组： 针对SNP RS16892496的引物组： 5' -GTTGAAGAGCAAGCCCCCA-3' 5' -GTGACTTGTACCCACG-3' 5' -GAACCAATAATACTCTCCTC-3' 5> -CATTTGGAATGGAAAC-3> 针对SNP RS7832552的引物组： 5' -GTGATAGTGTGAGGTAC-3' 5' -GTTTATTMGAGCATTCA-3' 5' -ATCTTTMAGAATTCTAG-3' 5> -TGCATTGGATTTTG-3> (2) PCR扩增试剂； (3) 琼脂糖凝胶电泳分析试剂。
[0007] 本发明提供的瘦体重基因检测试剂盒的有益效果是；通过PCR引物的设计使多个 PCR扩增反应在同一台PCR仪上同步进行，对受测者的相关基因进行检测，并实现检测的高 效性、特异性，分析得到其瘦体重的遗传因素，计算体内LBM数值，从而为受测者获得一个 合适的健康方案，了解自身的肌肉含量和质量，在健身运动中采取相应的策略避免对其无 效甚至是有害的方法。同时为专业运动员的选材和训练提供科学依据。
【附图说明】
[0008] 图1是反应产物琼脂糖凝胶电泳图。
【具体实施方式】
[0009] 瘦体重基因检测试剂盒，包括盒体及盒体内单独存放的试剂，存放的试剂包括： (1) 针对2个基因 SNP多态位点的PCR反应引物组： 针对SNP RS16892496的引物组： 5' -GTTGAAGAGCAAGCCCCCA-3' 5' -GTGACTTGTACCCACG-3' 5' -GAACCAATAATACTCTCCTC-3' 5> -CATTTGGAATGGAAAC-3> 针对SNP RS7832552的引物组： 5' -GTGATAGTGTGAGGTAC-3' 5' -GTTTATTMGAGCATTCA-3' 5' -ATCTTTMAGAATTCTAG-3' 5> -TGCATTGGATTTTG-3> (2) PCR扩增试剂； (3) 琼脂糖凝胶电泳分析试剂。
[0010] 下面将结合实施例对本发明提供的方法予W进一步的说明。
[0011] 本实施例对测试者采用瘦体重基因检测试剂盒同时检测2个基因的SNP多态位 点，并根据基因分型结果，分析得到其瘦体重的遗传因素，计算体内LBM数值，从而为受测 者获得一个合适的健康方案，了解自身的肌肉含量和质量，在健身运动中采取相应的策略 避免对其无效甚至是有害的方法。
[0012] 使用到的瘦体重基因检测试剂盒内试剂由W下组成： (1)针对2个基因 SNP多态位点的PCR反应引物组： 针对SNP RS16892496的引物组： 5' -GTTGAAGAGCAAGCCCCCA-3' 5' -GTGACTTGTACCCACG-3' 5' -GAACCAATAATACTCTCCTC-3' 5> -CATTTGGAATGGAAAC-3> 针对SNP RS7832552的引物组： 5' -GTGATAGTGTGAGGTAC-3' 5' -GTTTATTMGAGCATTCA-3' 5' -ATCTTTMAGAATTCTAG-3' 5> -TGCATTGGATTTTG-3> (2)PCR扩增试剂；10XPCR缓冲液，该PCR缓冲液为lOOmM Tris-肥1 P册.3,500mM KC1，15mM MgC12 ;dNTPs混合物，该dNTPs混合物为Η磯酸鸟嘿岭脱氧核巧酸dGTP，Η磯 酸腺嘿岭脱氧核巧酸dATP，Η磯酸胸腺嚼巧脱氧核巧酸dTTP，Η磯酸胞嚼巧脱氧核巧酸 dCTP四种核巧酸，各组分浓度为2. 5mM ;5υ/μ 1热启动Taq酶。
[001引（3)琼脂糖凝胶电泳分析试剂谅脂糖、TAE缓冲液、DNA分子量标准、Goldview 染色液和DM上样缓冲液，该缓冲液W漠酪藍为指示剂稀释至IX后使用。
[0014] 使用上述瘦体重基因检测试剂盒按如下步骤进行检测： (1)提取样本基因组DNA。
[0015] 采集该测试者唾液，向l-2ml唾液样品中加入500ul提取缓冲溶液，该DNA提取 缓冲溶液溶剂为50mM的化is-肥1 pH7. 4、0. 5mM的邸TA和50mM的化C1，反复吹打混匀 后，SOOOXg离必5分钟，弃去上清，此步骤重复一次；得到的沉淀中加入500ul裂解液， 该裂解液溶剂为 50mM Tris-肥 1 pH7. 4,50mM Tris-肥 1 pH7. 4，150mM 化Cl，lmM 邸TA，1% Triton x-100，l% Sodium deoxycholate, 0.1% SDS,蛋白酶 K20mg/mL,彻底悬浮沉淀并 充分混匀后，室温放置30分钟，期间来回颠倒离必管数次；得到的混合液中，加