专利名称：银杏作为植物杀虫剂的应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及银杏的用途，属于农药加工领域，尤其涉及的是银杏作为植物杀虫剂的应用。
背景技术：
银杏Ginkgo biloba L.是银杏科银杏属植物，为我国特有树种，素有“活化石”之称，又名白果树、公孙树、鸭脚树。各地广泛种植，以华东和西南地区较多。现已为世界各国所广泛引种。但是，中国的银杏资源占世界总量的70％左右。银杏叶具有药用和保健、营养等方面的价值，故研究较多。作为医药和保健品等进行研究时，有效成分的提取、产品开发等已经相当成熟。但是作为杀虫植物的研究和报道至今很少，迄今未发现有以银杏为主要原料，制造植物性杀虫剂的报道。我们的研究结果表明，银杏叶、外果皮的提取物对多种害虫有效，包括同翅目和鳞翅目的害虫，如对斜纹夜蛾、二化螟和小菜蛾的防效达80％以上，对飞虱、叶蝉和蚜虫的防效达90％以上。通过生物活性追踪和化学分离技术相结合的方法，分离出活性成分。本发明的目的在于以银杏为主要原料，配制出一种高效、低毒、低残留的植物性杀虫剂。
发明内容
本发明的目的是提供银杏的新用途，即在植物杀虫剂中的新应用。
本发明解决其技术问题所采用的技术方案。本发明所述银杏作为植物杀虫剂的应用，以银杏叶、外果皮等为主要原料，经干燥、粉碎后，用不同溶剂进行提取，并测定各提取物的杀虫效果。银杏叶、果皮在用乙醇提取后进行有效成分分离，经过一定的加工过程，可制成乳油、水乳剂、微乳剂、可湿性粉剂等剂型的植物性杀虫剂。
本发明所述银杏作为植物杀虫剂的应用，应用对象为多种害虫，包括同翅目和鳞翅目的害虫，如对斜纹夜蛾、二化螟和小菜蛾的防效达80％以上，对飞虱、叶蝉和蚜虫的防效达90％以上。
为了更好地理解本发明的实质，下面通过试验及结果来说明其在植物杀虫剂领域中的新用途。(一)、银杏叶粗提物对褐飞虱的生物活性1.1银杏提取物对褐飞虱的拒避作用结果见表1，银杏叶提取物对褐飞虱有着较强的拒避作用，用4mg/ml提取物处理24h后的水稻茎对褐飞虱的拒避率高达92.59％。拒避作用随时间的增加而降低，但在96h后仍有较高的拒避率。处理24h、48h和96h的水稻茎对褐飞虱的拒避中浓度(AFC50)分别为0.57、0.98和1.70mg/ml。
表1银杏叶提取物对褐飞虱的拒避率(％)处理时间浓度 AFC50拒避率(％)毒力回归方程 95％置信区间(h) (mg/ml)(mg/ml)0.25 25.100.5 56.5224 161.74y＝1.596x+3.7945 0.570.46～0.68276.25492.590.25 16.670.5 44.9348 150.00y＝1.4663x+3.5488 0.980.93～1.03272.62477.940.25 11.760.5 15.4596 130.65y＝1.5909x+3.0425 1.701.54～1.86263.87469.66
1.2银杏提取物对褐飞虱的内吸拒避作用结果见
图1，银杏叶提取物对褐飞虱有较强的内吸拒避作用，并且拒避率随着浓度的递增而增高。银杏叶提取物的浓度为0.01mg/ml时，对褐飞虱若虫的拒避率为21.67％；而当浓度为10mg/ml时，拒避率则达83.56％，各浓度之间有显著差异。
图1银杏提取物对褐飞虱的内吸拒避作用1.3银杏提取物对褐飞虱的触杀作用银杏叶提取物对褐飞虱若虫几乎不具有触杀作用，当浓度达50mg/ml时，褐飞虱的死亡率仅有4％。1.4小区试验结果见表2，在小区试验中，银杏提取物对褐飞虱仍具有较高的拒避作用。施用0.1％银杏叶提取物后，水稻上残存褐飞虱虫数明显低于对照，校正拒避率均在98％以上。
表2银杏提取物对褐飞虱的小区试验效果虫数(头)时间拒避率(％) 校正拒避率(％)对照处理药前 19.73 19.97 - -药后1天 25.13 0.497.60±2.41a 98.12±1.89a药后3天 22.47 0.199.41±0.59a 99.48±0.52a药后5天 18.87 0.17 99.22±0.31a 99.19±0.33a药后7天 24.27 0.07 99.60 ±0.34a99.68±0.28a注字母相同表示无显著相关性。
结果用0.4％银杏叶提取物处理24h的水稻茎对褐飞虱的拒避率高达92.59％，并且在处理96h后对褐飞虱仍有着较强的拒避作用。(二)、银杏叶粗提物对桃蚜种群的抑制作用2.1银杏叶粗提物对桃蚜的拒食作用银杏叶粗提物对桃蚜有较强的拒食作用，在1.0％和0.8％的浓度，桃蚜在处理过的叶片上的着落率分别仅为4.64％和9.03％，拒食率分别达90.71％和81.95％(见表1)。求得回归方程为Y＝3.5331X-0.8205(r＝0.9906，F＝546.4075**)，拒食中浓度AFC50为0.4440％。表1银杏叶粗提物对桃蚜的拒食作用每重复平均 着落情况浓度/％ 拒食率％虫数/头 处理/头对照/头 着落率/％1.0 36.61.734.9 4.64 90.710.8 42.13.838.3 9.03 81.950.6 33.46.027.4 17.9664.070.4 27.98.119.8 29.0341.940.2 25.611.2 14.4 43.7512.502.2银杏叶粗提物对桃蚜成虫寿命及生殖能力的影响结果表明，在处理过的叶片上取食5d后，桃蚜成虫的存活受到较明显的抑制。1.0％的浓度下，蚜虫的存活率为56.67％，比对照下降约40％。但在较低浓度下则影响较弱。同时桃蚜成虫的寿命和产仔量在不同的浓度下均受到较明显地抑制，1.0％浓度下桃蚜寿命和产仔量分别比对照减少了60.31％和66.95％，0.2％浓度下，桃蚜寿命和产仔量分别比对照减少25.01％和50.07％，与对照也呈显著性差异。说明银杏提取物对桃蚜成虫有一定的毒杀作用，但作用较弱，浓度较高时，毒杀作用较为明显，而浓度较低时，银杏提取物对桃蚜的杀虫活性主要表现为寿命和生殖能力均受到较强的抑制。在寿命和生殖能力两个方面，桃蚜生殖力所受到抑制作用更大(见表2)。
表2银杏叶粗提物对桃蚜成虫寿命和生殖能力的影响浓度/％ 5d后存活率/％ 平均寿命/d 产仔量(头/雌)1.0 56.679.17±0.83c 18.29±3.49c0.8 71.427.85±1.09c 16.34±4.87c0.6 78.3016.54±1.32b 32.16±7.81b0.4 86.7515.77±1.04b 33.87±6.76b0.2 96.4217.33±2.27b 27.63±5.11bCK 96.6723.11±3.16a 55.34±7.75a注平均值后有相同字母者表示在5％的水平上差异不显著.2.3银杏叶粗提物对初产仔蚜存活率和生长的影响结果见表3。银杏粗提物对初产仔蚜有较强的杀伤作用。药后1d，1.0％处理的存活率仅为16.67％。表3银杏叶粗提物对初产仔蚜的存活率和生长的影响1d后存活 5d后存活浓度/％ 平均存活时间/d 产仔量(头/雌)率/％ 率/％1.0 16.67 6.861.67±0.39e11.6±9.5bc0.8 24.37 14.72 1.95±0.30e8.7±11.4bc0.6 33.49 23.11 4.07±0.27cd 11.3±21.2bc0.4 47.49 38.76 6.75±1.72c9.2±9.8bc0.2 67.76 55.74 16.89±2.34ab 20.1±10.2abCK 95.56 94.67 21.11±3.27a 36.4±13.6a而0.2％的浓度下，也有32.24％的仔蚜死亡。仔蚜多数在处理1d后死亡，此后每d的死亡数量就相对较少。处理5d后，各浓度下仔蚜的存活率均比1d的存活率低10％左右。取食经银杏提取物处理的叶片，存活下来的蚜虫生长发育受到了影响，表现为存活时间缩短，发育至成蚜后其产仔量显著降低，1.0-0.4％的浓度之间，桃蚜的存活时间仅为对照的7.91-31.98，产仔量在对照的1/3以下，0.2％浓度下也受到了一定程度的影响。2.4银杏叶粗提物对桃蚜种群增长的影响随着浓度的增高，银杏粗提物对桃蚜种群的控制作用逐渐增强。在1.0％浓度处理过的叶片上取食的桃蚜的种群数量是24.0头/叶，而对照为78.1头/叶，仅为对照的30.73％，0.2％浓度也有一定的控制作用，种群数量比对照减少21.79％(见
图1)。
图1.不同浓度的银杏叶粗提物对桃蚜种群增长的影响2.5银杏叶粗提物对甘蓝桃蚜的盆栽防治试验结果见表4。银杏叶提取物的乳油制剂对田间桃蚜有着较好的防效。药后3d，0.2％浓度以上的处理对桃蚜的防效达95％以上。随着时间的延长，药液对桃蚜种群的抑制作用不断加强，低浓度的处理尤其明显，0.1％处理防效药后1d为22.22％，药后3d和7d分别达85.55％和89.86％。0.05％处理药后3d与药后1d的虫口相比未有增加，防效由药后1d的23.06％提高到药后7d的77.93％。药后7d各处理甘蓝植株上残留虫量均有不同程度地增加，但对照的虫口已高达药前虫口的5.86倍，此时各处理的防效均高于3d，由此可见，银杏粗提物的乳油制剂对桃蚜可保持7d左右的药效期。
表4银杏叶粗提物乳油对甘蓝上桃蚜的盆栽防治试验效果药后1d 药后3d药后7d药前虫口浓度残留虫 虫口校正残留虫虫口校正残留虫 虫口 校正基数(头//％ 量 减退防效 量 减退防效 量 减退 防效叶)(头/株) 率/％/％(头/株) 率/％/％(头/株)率/％/％0.80 131.514.8 88.78 88.57 4.0 96.96 98.39 23.5 85.1797.470.40 197.542.8 78.35 77.94 13.593.16 96.38 33.3 83.1697.130.20 238.857.5 75.92 75.45 19.391.94 95.73 81.3 65.9794.190.10 248.9178.8 25.29 22.22 65.372.73 85.55 142.340.5489.860.05 310.0234.0 24.52 23.06 234.3 24.44 59.97 401.0-29.35 77.93CK 171.5168.3 1.90 323.8 -88.781005.3 -486.15结果表明，银杏叶提取物对桃蚜有较强的拒食作用、胃毒毒杀作用和生长发育抑制作用。经提取物处理，可导致桃蚜寿命(存活时间)缩短，生殖力下降，并导致个体死亡，对初产仔蚜尤其具有明显的杀伤力，从而有效地抑制桃蚜的种群增长。银杏叶粗提物配制成乳油制剂后，在田间可达到较好的杀虫效果，1000倍的稀释液防效达89.86％，2000倍的稀释液的防效也达到了77.93％，持效期约为7d。(三)、银杏叶乙醇提取物对二化螟的生物活性3.1银杏叶乙醇提取物对二化螟产卵忌避作用结果见表1。银杏叶的乙醇提取物对二化螟成虫有较强的产卵忌避作用，且随着浓度的增高对二化螟成虫的产卵忌避作用逐渐增强。经药液处理过的的茭白叶片的卵量均远低于对照，占对照卵量的16.29-38.24％，在0.125％的浓度，银杏提取物对二化螟的忌避率达到61.76％，而0.50％的浓度下其忌避率高达83.71％。
表1银杏叶乙醇提取物对二化螟产卵忌避作用浓度(％) 总卵量(粒) 平均卵量(粒/重复) 3d后忌避率(％)0.125 312 104.0 61.760.250 213 71.0 73.900.50 133 44.3 83.71Ck 816 272.03.2银杏叶乙醇抽提物对二化螟幼虫拒食作用测定结果见表2、表3。银杏叶粗提物对二化螟幼虫有较强的拒食作用。在选择性拒食试验中，银杏叶提取物对2龄虫的AFC50(拒食中浓度)为0.23％，非选择条件下，其AFC50(拒食中浓度)为0.38％。
表2银杏叶乙醇提取物对二化螟幼虫的选择性拒食作用平均蛀入虫数/头浓度/％ 拒避率/％ AFC50/％ 毒力回归方程对照处理0.0415.113.2 12.580.1217.412.0 31.03Y＝4.4241+1.5604x0.2817.8 9.2 48.31 0.23r＝0.9846**0.3518.0 6.6 63.330.4921.6 6.0 72.22注**表相关系数r达极显著水平(p＜0.01)表3银杏乙醇提取物对二化螟幼虫的非选择性拒食作用
注**表相关系数r的显著性达极显著水平(p＜0.01)3.3银杏叶乙醇提取物对二化螟幼虫生长发育的影响结果见表4。银杏叶提取物对二化螟幼虫具有较强的生长发育抑制作用，且随着浓度的增加其作用相应加强。0.1％的浓度下，2龄虫在处理后5d的体重增加量为对照的70.89％，发育抑制率为29.11％，而1.6％的处理，体重增加量为对照的17.72％，发育抑制率为82.28％。其毒力回归线为Y＝3.6410+1.9324(r＝0.9976**)，抑制中浓度为0.51％。
表4银杏叶乙醇提取物对茭白二化螟幼虫生长发育的影响体重增加量 发育抑制中浓度/％ 发育抑制率/％ 毒力回归方程(mg/头) 浓度/％0.1 7.2±0.9abA 9.110.2 6.4±0.6bAB 19.42Y＝3.6410+1.9324x0.4 4.4±0.5cB 44.300.51 r＝0.9976**0.8 2.6±0.7dC 67.091.6 1.4±0.4eD 82.28CK7.9±1.0aA3.4银杏叶乙醇提取物对二化螟蚁螟的触杀作用结果见
图1。银杏叶乙醇抽提物对初孵蚁螟具有一定的触杀作用。0.1％和0.5％的浓度与对照无显著性差异。但在1.0％的较高浓度下，造成11.67％的蚁螟死亡，与对照的差异达显著水平。
图1银杏叶乙醇抽提物对二化螟蚁螟的触杀作用试验结果表明，银杏叶的乙醇提取物对二化螟成虫有较强的产卵忌避作用，对幼虫有较强的拒食和抑制生长发育作用，对低龄幼虫也有一定的触杀作用，银杏叶粗提物对二化螟有较高的活性。
本发明有益的效果是具有药效显著、高选择性、低毒低残留、害虫不易产生抗药性等特点。制造工艺简单，成本低，符合目前农药的发展趋势。
具体实施例方式
下面结合实施例对本发明作进一步描述。银杏作为植物杀虫剂的应用，以银杏叶、外果皮等为主要原料，经干燥、粉碎后，用不同溶剂进行提取，并测定各提取物的杀虫效果。银杏叶、果皮在用乙醇提取后进行有效成分分离，经过一定的加工过程，可制成乳油、水乳剂、微乳剂、可湿性粉剂等剂型的植物性杀虫剂。具有药效显著、高选择性、低毒低残留、害虫不易产生抗药性等特点。制造工艺简单，成本低，符合目前农药的发展趋势。
实施例1按以下配比，经过一定的加工过程，制成乳油银杏提取物10～60％溶剂 30～75％乳化剂5～25％其它助剂如高渗剂等5～10％乳油中的溶剂选用二甲苯、甲醇、乙醇、乙酸乙酯等中的一种或几种，乳化剂选用辛基酚聚乙烯醚、苯乙酚聚氧乙烯聚氧丙烯醚、十二烷基苯磺酸钙、十八醇聚氧乙烯醚磷酸酯、壬基酚聚氧乙烯醚等中的一种或几种。
乳油的制造方法首先将银杏叶或外表皮粉碎成5mm以下的粗粉碎物，再用不同的溶剂提取，将提取物减压浓缩到一定的浓度，再与乳化剂、溶剂及其它助剂等按一定的比例混合均匀即可。
实施例2按以下配比，经过一定的加工过程，制成水乳剂银杏提取物10～40％水35～70％溶剂 5～25％乳化剂5～20％
共乳化剂 1～5％水乳剂中的溶剂选用二甲苯、甲醇、乙醇、乙酸乙酯等中的一种或几种；乳化剂选用烷基聚二乙醇醚、烷基苯基聚乙二醇醚、聚氧乙烯山梨醇糖醇酐酯、聚氧乙烯脂肪酸酯等中的一种或几种；共乳化剂选用丁醇、异丁醇、十二烷醇-1、十八烷醇-1等链烷醇类的一种或几种。
水乳剂的制造方法将银杏提取物、溶剂和乳化剂、共乳化剂按一定的比例加在一起，常温下高速搅拌即可。
实施例3按以下配比，经过一定的加工过程，制成微乳剂银杏提取物10～50％水40～60％乳化剂10～25％微乳剂中采用的乳化剂为苯乙烯酚聚氧乙烯醚、聚乙烯苯乙基酚醚油酸酯、壬基酚聚氧乙烯醚、联苯酚聚氧乙烯醚等中的一种或几种。
微乳剂的制造方法先将乳化剂溶于水中，在搅拌的情况下，向其中滴加银杏提取物，在40～65℃恒温搅拌12小时，冷却至室温即可。
实施例4按以下配比，经过一定的加工过程，制成可湿性粉剂银杏组织细粉50～85％填料20～60％农药助剂5～20％可湿性粉剂中采用的填料为滑石粉、白碳黑、硅澡土、膨润土中的一种或几种，农药助剂是十二硫基硫酸钠、分散剂Z、木质素黄酸钠、拉开粉、辛基磷酸钠、脂肪醇聚氧乙烯基乙醚等的一种或几种。
可湿性粉剂制造方法将银杏叶、外表皮用植物粉碎机粉碎成5mm以下的粗粉碎物，再将粗粉碎物用高能粉碎机粉碎并过300目筛，然后与填料、农药助剂按比例充分混合均匀后即可。
权利要求
1.银杏作为植物杀虫剂的应用。
2.根据权利要求1所述的银杏作为植物杀虫剂的应用，其特征在于按以下配比，首先将银杏叶或外表皮粉碎成5mm以下的粗粉碎物，再用不同的溶剂提取，将提取物减压浓缩到一定的浓度，再与乳化剂、溶剂及其它助剂等按一定的比例混合均匀即可，制成乳油银杏提取物10～60％溶剂 30～75％乳化剂5～25％其它助剂如高渗剂等 5～10％
3.根据权利要求2所述的银杏作为植物杀虫剂的应用，其特征在于乳油中的溶剂选用二甲苯、甲醇、乙醇、乙酸乙酯等中的一种或几种，乳化剂选用辛基酚聚乙烯醚、苯乙酚聚氧乙烯聚氧丙烯醚、十二烷基苯磺酸钙、十八醇聚氧乙烯醚磷酸酯、壬基酚聚氧乙烯醚等中的一种或几种。
4.根据权利要求1所述的银杏作为植物杀虫剂的应用，其特征在于按以下配比，将银杏提取物、溶剂和乳化剂、共乳化剂按一定的比例加在一起，常温下高速搅拌即可，制成水乳剂银杏提取物10～40％水35～70％溶剂 5～25％乳化剂5～20％共乳化剂 1～5％
5.根据权利要求4所述的银杏作为植物杀虫剂的应用，其特征在于水乳剂中的溶剂选用二甲苯、甲醇、乙醇、乙酸乙酯等中的一种或几种；乳化剂选用烷基聚二乙醇醚、烷基苯基聚乙二醇醚、聚氧乙烯山梨醇糖醇酐酯、聚氧乙烯脂肪酸酯等中的一种或几种；共乳化剂选用丁醇、异丁醇、十二烷醇-1、十八烷醇-1等链烷醇类的一种或几种。
6.根据权利要求1所述的银杏作为植物杀虫剂的应用，其特征在于按以下配比，将乳化剂溶于水中，在搅拌的情况下，向其中滴加银杏提取物，在40～65℃恒温搅拌1～2小时，冷却至室温即可，制成微乳剂银杏提取物10～50％水40～60％乳化剂10～25％
7.根据权利要求6所述的银杏作为植物杀虫剂的应用，其特征在于微乳剂中采用的乳化剂为苯乙烯酚聚氧乙烯醚、聚乙烯苯乙基酚醚油酸酯、壬基酚聚氧乙烯醚、联苯酚聚氧乙烯醚等中的一种或几种。
8.根据权利要求1所述的银杏作为植物杀虫剂的应用，其特征在于按以下配比，将银杏叶、外表皮用植物粉碎机粉碎成5mm以下的粗粉碎物，再将粗粉碎物用高能粉碎机粉碎并过300目筛，然后与填料、农药助剂按比例充分混合均匀后即可，制成可湿性粉剂银杏组织细粉50～85％填料20～60％农药助剂5～20％
9.根据权利要求8所述的银杏作为植物杀虫剂的应用，其特征在于可湿性粉剂中采用的填料为滑石粉、白碳黑、硅澡土、膨润土中的一种或几种，农药助剂是十二硫基硫酸钠、分散剂Z、木质素黄酸钠、拉开粉、辛基磷酸钠、脂肪醇聚氧乙烯基乙醚等的一种或几种。
全文摘要
本发明是涉及银杏作为植物杀虫剂的应用，以银杏叶、外果皮等为主要原料，经干燥、粉碎后，用不同溶剂进行提取，并测定各提取物的杀虫效果。银杏叶、果皮在用乙醇提取后进行有效成分分离，经过一定的加工过程，可制成乳油、水乳剂、微乳剂、可湿性粉剂等剂型的植物性杀虫剂。本发明所述银杏作为植物杀虫剂的应用，应用对象为多种害虫，包括同翅目和鳞翅目的害虫，如对斜纹夜蛾、二化螟和小菜蛾的防效达80％以上，对飞虱、叶蝉和蚜虫的防效达90％以上。本发明有益的效果是具有药效显著、高选择性、低毒低残留、害虫不易产生抗药性等特点。制造工艺简单，成本低，符合目前农药的发展趋势。
文档编号A01P7/00GK1398524SQ02136799
公开日2003年2月26日 申请日期2002年9月4日 优先权日2002年9月4日
发明者俞晓平, 吕仲贤, 陈建明, 郑许松, 徐红星 申请人:浙江省农业科学院植物保护研究所