专利名称：高效诱导丛生侧芽发生的林木植物组织培养方法
技术领域：
本发明涉及植物组织培培养方法。
背景技术：
由于林木种子繁殖和扦插繁殖速度较慢，不能满足市场的需求，林木组织培养技术已显示出巨大的优越性组织培养不受气候因素的影响，一年四季可以在室内繁殖，繁殖速度极快，每年可递增上百万倍；其次，林木的组织培养能够很好地保持其优良种性，避免了种子繁殖的分离，获得遗传性状高度一致的优良苗木。植物组织培养的一般方法是首先在诱导培养基上诱导愈伤组织发生，培养愈伤组织，然后将愈伤组织转移到分化培养基，分化出芽，最后再转移到生根培养基生根，形成完整植株。也有用顶芽或侧芽作为外植体，通过诱导不定芽达到繁殖的目的。通过愈伤组织诱导不定芽。繁殖倍数较高，但是后代植株容易发生变异，产品质量不稳定；通过顶芽或侧芽诱导不定芽发生，变异率可以得到控制，但是植株不整齐，繁殖倍数不稳定。
发明内容
本发明的目的在于提供一种通过组织培养高效诱导丛生侧芽发生的快速繁殖林木树种苗的方法，本发明的技术思路是定向诱导丛生侧芽的发生，根据这一思路，本发明的特征是在基本培养基1/4MS～MS中，以mg/L为单位加入0.02～0.1NAA(萘乙酸)用于抑制单个顶芽和单个侧芽徒长，加入6-BA(苄基嘌呤)0.1～0.2促进丛生侧芽发生和繁殖；加入GA(赤霉素)0.02～0.3促进侧芽生长，将外植体放入上述培养基中培养，在常规培养方法下可得到丛生侧芽。本发明的培养基能够保证抑制外植体顶芽，控制不定芽，促进侧芽的发生和繁殖，从而实现定向诱导侧芽、促进侧芽丛生，侧芽一般能达到2～4个。本发明能使侧芽快速生长，一般20～25天可达4～5厘米，繁殖率平均高达6倍。
具体实施例方式
一、繁殖香花槐种苗1、外植体处理。在7、8月份，采取香花槐幼嫩枝条作为外植体。把嫩茎剪成至少含一个侧芽的茎段，用水冲洗干净消毒，然后切去切口处约3毫米的死组织，待用；2、起始培养基的组成。在MS基本培养基中按3％和0.48％的比例加入蔗糖和琼脂构成培养基，再按每升培养基加入1.0毫克6-BA、0.05毫克NAA和0.1毫克的GA比例加入上述物质，构成本发明的培养基，将外植体接种在本培养基中。
3、培养条件。培养温度21～25，湿度40％，光照强度3500Lx，每天光照12小时。培养周期28天。
4、继代培养。切下起始培养萌发的侧芽，接种到继代培养基中培养，继代培养基的组成6-BA为每升0.2毫克，其他成份与起始培养基相同。
5、生根培养。截取20毫米高的组培苗，栽入生根基中培养，生根培养基组成为在1/4MS基本培养基中按2％和5％的比例加入蔗糖和琼脂，再按每升培养基0.3的比例加入IBA。
本实例中侧芽发生时间7～9天，丛生侧芽发生数2～4个，继代周期25天，繁殖倍数6倍。变异率≤1/1000，生根率≥90％。
二、繁殖美国红栌种苗1、外植体处理。实施例一。
2、起始培养基组成。在MS基本培养基中按每升加入0.5毫克、0.1毫克和0.1毫克的比例加入6-BA、NAA和GA，再加入0.1毫克的ZT(激动素)，蔗糖和琼脂加入量同实施例一，构成本发明的培养基，将外植体接种在本培养基中。
3、培养条件，同实施例一。
4、继代培养。切下起始培养萌发的侧芽，接种到继代培养基中，继代培养基组成同实施例一。
5、生根培养。生根培养基组成1/4MS加入2％蔗糖和5％琼脂，操作过程同实施例一。
权利要求
1.高效诱导丛生侧芽发生的林木植物组织培养方法，其特征在于在基本培养基1/4MS～MS中，以mg/L为单位加入0.02～0.1NAA(萘乙酸)用于抑制单个顶芽和单个侧芽徒长，加入6-BA(苄基嘌呤)0.1～0.2促进丛生侧芽发生和繁殖；加入GA(赤霉素)0.02～0.3促进侧芽生长，将外植体放入上述培养基中培养，在常规培养方法下可得到丛生侧芽。
全文摘要
一种高效诱导丛生侧芽发生的林木植物组织培养方法。在基本培养基MS中，以mg/L为单位加入0.02～0.1NAA用于抑制单个顶芽和单个侧芽徒长，加入6－BA0.1～0.2促进丛生侧芽发生和繁殖；加入GA0.02～0.3促进侧芽生长，将外植体放入上述培养基中培养。本发明侧芽一般能达到2～4个，侧芽快速生长，一般20～25天可达4～5厘米，繁殖率平均高达6倍。
文档编号A01H4/00GK1502225SQ0214460
公开日2004年6月9日 申请日期2002年11月20日 优先权日2002年11月20日
发明者何孟元, 郑易之, 刘云, 郝东时, 李凤霞, 朱东梅, 高天舜, 郭万里 申请人:吉林省东北师大林木生物工程有限责任公司, 吉林省东北师大林木生物工程有限责任