专利名称：培育杨树抗盐性的叠代累加法的制作方法
技术领域：
本发明培育杨树抗盐性的叠代累加法涉及一种育成抗盐、抗逆性强的欧美杨品种的方法，尤其是利用叠代累加法培育欧美杨的方法。
背景技术：
欧美杨类在我国已被成功地利用与开发，在发展西部和贫瘠地区已发挥了巨大作用。但随着国家绿化和森林工业发展的需要，对欧美杨的品种有新的要求，能速生且适应盐碱和贫瘠土地种植。育成抗盐、抗逆性强的欧美杨品种，已是当前推广速生杨的首要任务。
发明内容
本发明的目的在于提供一种利用叠代累加法培育成抗盐、抗逆性强的欧美杨品种的方法。
本发明目的可通过下述技术方案实现利用叠代累加法培育欧美杨抗盐性，通过组培，诱导胚性细胞、愈伤组织脱分化和再分化技术，经抗盐筛选，培育抗盐浓度达0.6％--1.0％的欧美杨耐盐新品种。
培育杨树抗盐性的叠代累加法，配制不同NaCL浓度培养基、诱导欧美杨胚性细胞团，然后用叠代累加法调控培养胚性细胞团和分化芽苗，其中，盐浓度分别为0.1％、0.2％、0.3％、0.4％、0.5％、0.6％、0.7％、0.8％、0.9％、1.0％培养基。
所述培养基配方MS+2，4-D0.3mg/L-1.2mg/L，蔗糖30g/L。
所述的叠代累加法包括第一步，将欧美杨无菌材料切割成0.4-0.5mm培养物作为外植体接种于以上十种培养基调控培养，诱导胚性细胞团发生，在温度23±1℃，14小时/天光照条件下培养；第二步，将0.3％盐浓度材料接种到0.3％、0.4％盐浓度培养基上培养胚性细胞团和分化芽作为A组；将A组材料在0.4％盐浓度下继代培养胚性细胞分化芽苗接种到0.4％、0.5％盐浓度培养基上，将在0.5％盐浓度下继代培养胚性细胞分化芽苗接种到0.5％、0.6％盐浓度培养基上，以此前进，叠代累加盐浓度，最后培育出0.6％盐浓度生长的欧美杨新品种。
本发明的机理通过植物组织培养生物技术，调控欧美杨胚性细胞的发生，运用不同含盐量叠代累加法，筛选培育耐高盐遗传适应性的欧美杨新品种。系欧美杨胚性细胞、无性系、调控培养、高盐叠代累加法。
本发明的优越性在于利用组培技术，通过诱导欧美杨胚性细胞提高抗盐性是最深刻的，引起杨树遗传性变异，培育成欧美杨耐盐新品种，从而改变基因性状，保持抗盐性能。
具体实施例方式
实验材料1、杨树品种欧美杨
2、药品MS培养基、氯化钠(NaCl)3、培养基配方MS+2，4D0.3mg/L——1.2mg/L，蔗糖30g/L通过植物组织培养生物技术，调控欧美杨胚性细胞发生，运用不同含盐量叠代累加法，筛选培育耐高盐遗传适应性的欧美杨新品种。
实验方法1、配制不同浓度NaCL培养基、诱导胚性细胞团，浓度分别为0.1％、0.2％、0.3％、0.4％、0.5％、0.6％、0.7％、0.8％、0.9％、1.0％培养基，消毒灭菌，待用。
2、操作将欧美杨无菌材料切割成0.4-0.5mm培养物接种于以上八种培养基调控培养诱导胚性细胞团发生，在温度23±1℃，14小时/天光照条件下培养观察。
3、经培养观察，在0.1％——0.6％盐浓度上均有不同数量的胚性细胞团产生，而在0.7％、0.8％盐浓度上材料胚性细胞团较小；培养观察第15天，在0.1％——0.6％盐浓度的胚性细胞团上有分化芽，但最终并非所有都成活，而在0.7％、0.8％盐浓度培养基上无分化芽，外植体变黄死亡；4、将0.3％盐浓度材料接种到0.3％、0.4％盐浓度培养基上培养胚性细胞团和分化芽——A组0.4％盐浓度材料接种到0.4％、0.5％盐浓度培养基上培养胚性细胞团和分化芽——B组
0.5％盐浓度材料接种到0.5％、0.6％盐浓度培养基上培养胚性细胞团和分化芽——C组0.6％盐浓度材料接种到0.6％、0.7％盐浓度培养基上培养胚性细胞团和分化芽——D组5、同样方法将A组材料在0.4％盐浓度下继代培养胚性细胞分化芽苗接种到0.4％、0.5％盐浓度培养基上；将在0.5％盐浓度下继代培养胚性细胞分化芽苗接种到0.5％、0.6％盐浓度培养基上，以此前进，叠代累加盐浓度，最后筛选出能在0.6％盐浓度生长的欧美杨新品种；6、将B组、C组、D组用叠代累加法调控培养胚性细胞团和分化芽苗，最后统计得出，在0.6％盐浓度下由胚性细胞团分化芽苗，即培育出耐高盐遗传适应性欧美杨新品种，其耐盐能力达0.6％。
结果将上述所得的欧美杨再生植株，用不同含盐浓度的盐土盆栽和沙培观察其生长情况，结果如下第一、在盐土盆栽条件下盐水浇灌，盐浓度在0.6％——0.7％情况下有80％植株成活，在高盐浓度0.9％情况下有40％植株成活，在高盐浓度1.0％情况下有20％植株成活。第二、在沙培条件下盐水浇灌，盐浓度0.8％——1.0％情况下，80％植株成活。
在盐浓度0.6％情况下，盐土盆栽和沙培实验植株都能正常生长。
权利要求
1.培育杨树抗盐性的叠代累加法，配制不同NaCL浓度培养基、诱导欧美杨类胚性细胞团，然后用叠代累加法调控培养胚性细胞团和分化芽苗，其中，盐浓度分别为0.1％、0.2％、0.3％、0.4％、0.5％、0.6％、0.7％、0.8％、0.9％、1.0％培养基。
2.根据权利要求1所述培育杨树抗盐性的叠代累加法，其特征在于所述培养基配方MS+2，4D0.3mg/L-1.2mg/L，蔗糖30g/L。
3.根据权利要求1或2所述的培育杨树抗盐性的叠代累加法，其特征在于所述的叠代累加法包括第一步，将欧美杨无菌材料切割成0.4-0.5mm培养物作为外植体接种于以上培养基调控培养，诱导胚性细胞团发生，在温度23±1℃，14小时/天光照条件下培养；第二步，将0.3％盐浓度材料接种到0.3％、0.4％盐浓度培养基上培养胚性细胞团和分化芽作为A组；将A组材料在0.4％盐浓度下继代培养胚性细胞分化芽苗接种到0.4％、0.5％盐浓度培养基上，将在0.5％盐浓度下继代培养胚性细胞分化芽苗接种到0.5％、0.6％盐浓度培养基上，以此前进，叠代累加盐浓度，最后培育出0.6％盐浓度生长的欧美杨新品种。
全文摘要
本发明培育杨树抗盐性的叠代累加法涉及一种育成抗盐、抗逆性强的欧美杨品种的方法，尤其是利用叠代累加法培育欧美杨的方法。本发明培育杨树抗盐性的叠代累加法，配制不同NaCL浓度培养基、诱导欧美杨类胚性细胞团，然后用叠代累加法调控培养胚性细胞团和分化芽苗，其中，盐浓度分别为0.1％、0.2％、0.3％、0.4％、0.5％、0.6％、0.7％、0.8％、0.9％、1.0％培养基。本发明利用组培技术，通过诱导欧美杨胚性细胞提高抗盐性是最深刻的，引起杨树遗传性变异，培育成欧美杨耐盐新品种，从而改变基因性状，保持抗盐性能。
文档编号A01G17/00GK1647612SQ20051002388
公开日2005年8月3日 申请日期2005年2月6日 优先权日2005年2月6日
发明者苏敏, 宋学孟, 庞瑞华, 章振华, 王凌健, 董举文, 何燕红, 王涛, 陈权, 苏峰 申请人:上海光兆植物速生技术有限公司