专利名称：：番茄种子的培苗扩繁方法
技术领域：
：本发明涉及番茄的培育方法，尤其涉及番茄幼苗的人工培育方法。技术背景番茄是重要的农作物，营养丰富，并具有保健功能，是世界上最主要的蔬菜之一。在番茄的种植过程中，种子的发芽至幼苗的发育，对整个番茄的生长起关键作用。目前，常规的方法，如植物生理学通讯中櫻桃番茄的组织培养与快速繁殖文献公开的方法，由于只是针对单一品种的番茄的原因，存在着所采用的培养基只适用于某些品种的番茄，而并不是普遍适用于所有的品种的缺陷，因此，不能满足人们的需要。
发明内容本发明需要解决的技术问题是公开一种番茄种子的培苗扩繁方法，以克服现有技术..存在的上述缺陷，满足人们的需要。本发明的方法，包括如下步骤(1)将番茄种子在5357t:的水中浸泡1020min，然后在2030匸的水中浸泡1014h，取出，用无菌水冲洗，然后再用体积浓度为7080%，优选75%的酒精浸泡2040s，然后再用无菌水再冲洗，然后用重量浓度为812%的次氯酸钠水溶液消毒10-13min，用无菌水冲洗后，接种在1/2MS培养基上，在2327'C下恒温培养3~4天，种子萌发，转移到培养架上接受光照，种子萌发后经4~5天培养后，长出子叶并充分展开，获得无菌苗；所说的1/2MS的组分和重量份数为实验室常用配方，文献中有详细的报道，具体如下<table>tableseeoriginaldocumentpage4</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>1/2MS培养基用法每1ML1/2MS培养基中含有以下物质蔗糖30g琼脂8g母液I10ml母液II5ml母液ffl5ml母液IV5ml母液V5ml调整PH值为5.8(2)取无菌苗的子叶、下胚轴作外植体，接种在培养基上，在2327t)条件下，每7-10天换一次培养基，直至芽长到l2cm，每个外植体出5~6个芽；所说的培养基的的组分，以1LMS为基准，包括0.4~0.6mgZA,0.08~0.12mgIAA;所说的MS的组分和重量份数，具体如下母液I(1L)<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>母液II(1L)<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>母液III(1L)<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>MgS04.7H2037g母液IV(1L)<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>MS培养基用法每1MLMS培养基中含有以下物质蔗糖30g琼脂8g母液I20ml母液II10ml母液HI10ml母液IV10ml母液V5ml调整PH值为5.8所说的ZA的化学名称为玉米素，可采用上海稼丰园艺有限公司的产品所说的IAA的化学名称为吲哚乙.酸，可采用上海稼丰园艺有限公司的产品；(3)将步骤(2)获得的芽切下，转入MS"K).lmg/LNAA培养基中，在试管中进行生根处理，经过2周根可以长至5-6cm，苗可长至8cm左右所说的NAA的的化学名称为萘乙酸，可采用上海稼丰苑园艺有限公司的产品。采用本发明上述的方法，首先对一些一代杂交种及其他的性状优良但又不能留种的材料，进行快速繁殖可以降低成本，保持其优良性状，在短期内向市场提供人量种苗具有很高的经济价值。其次,,不断培育番茄新品种以及保存其优良种质是番茄种植业健康发展的根本保证，而番茄高效再生体系的建立是番茄基因工程育种，杂种优势固定和优异种质保存的前提，采用本发明的方法可以筛选出高效再生且成本低的番茄组织培养基，以期能用于番茄遗传转化。第三番茄的组织培养技术已用于遗传转化，建立高效再生体系是番茄遗传转化的必要前提。本发明的方法筛选出的适合不同品种的最佳培养基配方是番茄组织培养的关键。为遗传转化提供了基础。实施例1(1)将天福501品种的番茄种子在53t:的水中浸泡10min，然后在2(TC的水中浸泡10h，取出，用无菌水冲洗，然后再用体积浓度为75%的酒精浸泡203,然后再用无菌水再冲洗，然后用重量浓度为8%的次氯酸钠水溶液消毒10min,用无菌水冲洗后，接种在1/2MS培养基上，在23"C下恒温培养3天，种子萌发，转移到培养架上接受光照，种子萌发后经4天培养后，长出子叶并充分展开，获得无菌苗；所说的1/2MS的组分和重量份数如下<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table><formula>formulaseeoriginaldocumentpage2</formula>VB6(盐酸吡哆素)100mg、H3,处餘坊松吝、20mg甘氨酸400mg1/2MS培养基用法每1ML1/2MS培养基中含有以下物质:蔗糖30g琼脂8g母液I10ml母液n5ml母液m5ml母液IV5ml母液V5ml调整PH值为5.8(2)取无菌苗的子叶、下胚轴作外植体，接种在MS+O.5mg/LZA+0.1mg/LIAA培养基上，在23'C条件下，每7天换一次培养基，直至芽长到lcm，每个外植体出5个芽;所说的MS的组分和重量份数如下母液I(1L).<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>MS培养基用法每1MLMS培养基中含有以下物质:蔗糖30g琼脂8g母液I20ml母液n10ml母液m10ml母液w10ml母液v5ml调整PH值为5.8所说的培养基的的组分，以1LMS为基准，包括0.4mgZA，0.08mglAA;(3)将步骤(2)获得的芽切下，转入MS+0.1mg/LNAA培养基中，在试管中进行生根处理，经过2周根可以长至5^6cm，苗可长至8cm左右。实施例2(1)将黄玫瑰品种的番茄种子在57r的水中浸泡20min，然后在30'C的水中浸泡14h，取出，用无菌水冲洗，然后再用体积浓度为75。/n的酒精浸泡40s，然后再用无菌水再冲洗，然后用重量浓度为12%的次氯酸钠水溶液消毒13min,用无菌水冲洗后，接种在1/2MS培养基上，在271C下恒温培养4天，种子萌发，转移到培养架上接受光照，种子萌发后经5天培养后，长出子叶并充分展开，获得无菌苗；(2)取无菌苗的子叶、下胚轴作外植体，接种在MS+0.5mg/LZA+0.1mg/LIAA培养基上，在27匸条件下，每10天换一次培养基，直至芽长到2cm，每个外植体出6个芽；所说的培养基的的组分，以1LMS为基准，包括0.6mgZA,0.12mglAA;(3)将步骤(2)获得的芽切下，转入MS+0.1mg/LNAA培养基中，在试管中进行生根处理，经过2周根可以长至5-6cm，苗可长至8cm左右。权利要求1.一种番茄种子的培苗扩繁方法，包括如下步骤(1)将番茄种子接种在1/2MS培养基上，在23～27℃下恒温培养3～4天，种子萌发，转移到培养架上接受光照，种子萌发后经4～5天培养后，长出子叶并充分展开，获得幼苗；(2)取幼苗的子叶、下胚轴作外植体，接种在培养基上，在23～27℃条件下，每7-10天换一次培养基，直至芽长到1～2cm，每个外植体出5～6个芽；(3)将步骤(2)获得的芽切下，转入MS+0.1mg/LNAA培养基中，在试管中进行生根处理。2.根据权利要求I所述的方法，其特征在于，所说的培养基的的组分，以1LMS为基准，包括0.4~0.6mgZA，0.08~0.12mgIAA。3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，还包括如下步骤将番茄种子在5357°C的水中浸泡1020min,然后在2030*C的水中浸泡1014h，取出，用无菌水冲洗，然后再用体积浓度为7080W的酒精浸泡2040s，然后再用无声水再冲洗,然后用重量浓度为812%的次氯酸钠水溶液消毒10-13min，用无菌水冲洗后，获得无菌种子，然后接种在1/2MS培养基上。全文摘要本发明公开了一种番茄种子的培苗扩繁方法，将番茄种子接种在1/2MS培养基上，在23～27℃下恒温培养3～4天，种子萌发，转移到培养架上接受光照，种子萌发后经4～5天培养后，长出子叶并充分展开，获得幼苗；(2)取幼苗的子叶、下胚轴作外植体，接种在培养基上，在23～27℃条件下，每7-10天换一次培养基，直至芽长到1～2cm，每个外植体出5～6个芽；(3)将步骤(2)获得的芽切下，转入MS+0.1mg/LNAA培养基中，在试管中进行生根处理。本发明的方法，可以降低成本，保持其优良性状，在短期内向市场提供人量种苗具有很高的经济价值。本发明的培养基配方是番茄组织培养的关键。为遗传转化提供了基础。文档编号A01C1/00GK101278650SQ200710039170公开日2008年10月8日申请日期2007年4月5日优先权日2007年4月5日发明者万延慧,朱为民,朱龙英,王曙霞申请人:上海市农业科学院园艺研究所