专利名称：一种液体复合微生物肥及其制备方法
一种液体复合微生物肥及其制备方法駄领域本发明涉及一种液体复合微生物肥及其制备方法，属于微生物肥料技术领域。 背景駄1891年贝杰林克首次完成了根瘤菌和固氮菌的纯培养，开始了微生物肥料的生产与应用，1895 年商品化的根瘤菌接种剂面市(商品名为Nitrogen)。本世纪30 40年代，美国、澳大利亚和英国 等都有了接种剂生产企业，1930年美国根瘤菌接种剂的销售额达到100万美元。50年代以后世界上 70多个国家包括中国在内，开始研究、生产和使用根瘤菌接种剂，并且面积不断扩大。70年代国际 上开始对固氮菌、解磷细菌和解钾细菌等有益微生物进行了一系列的研究工作，大量的田间试验表 明，固氮菌、解磷细菌和解钾细菌能够增产和培月巴地力，并且有了一定面积的应用。我国是世界上 在农业应用微生物最早的国家，古代人们就有在新辟田种植豆科植物时，施用老田(豆科植物田) 客土的嫩去。现代我国研究应用微生物肥料已有近50年的历史，开始应用的^科植物根瘤菌擬中 剂，据统计1949-1955年间，全国应用花生根瘤菌的面积达1000万亩，1956-1985年累计3425力' 亩。50年代，从苏联引进自生固氮菌、磷细菌和硅酸盐细菌，1958年细菌肥料的应用曾列为《农业 发展纲要》中的一项技术措施。60年代我国开展了 "5406"的广泛研究和应用，取得了一定的效果。 70年代开始一些禾4^开单位进行了VA菌根、固氮菌、磷细菌和硅酸盐细菌的研究。进入90年代，微生物肥料的研究与应用li^了又一个高潮。微生物肥料被定义为含有活微生物的特定制剂，现有的产品大多是单一功能的微生物肥料， 比如固氮菌、解磷菌劍军钾菌，其功能分别为固定空气中的氮素、分解土壤中的难溶磷或分解土壤中的含钾化合物。这些微生物单独使用均能发挥各自作用，部分满足作物^m、磷、钾等营养元素的需求，使用上述微生物肥料还可生产绿色食品，保护环境，是一种环境友好型肥料。但其不足在于单独使用上t类肥料只能解决植物所需营养的一个方面。研究人员也注意到了该问题，在微生物肥料生产中也研究、应用了不同的技术来生产复合微生物肥料，也就是将多个微生物菌种复合在一起。已有的中国专利文件CN1134408A(95104927. 5)， CN1191854 A (98100645. 0) ， CN1587218 A (200410052666.8) ， CN1600751A (200410050683.8) ， CN1654435A (200410065948.1)， CN1911870A (200610068499. 5)都是采用不同的微生物菌种，通过分别培养、发酵后，将产物按比 例组合而成复合微生物肥料，采用现有的工艺生产微生物肥料存在的主要问题是各菌种单独发酵的 设备投资大、生产周期长，从而生产成本高，生产工艺较复杂。 发明内容本发明针对现有技术的不足，掛共一种液体复合微生物肥及其制备方法。 本发明针对目前复合微生物肥料妒中存在的问题，采用混合发酵技术，并且复合了化学肥料， 在复合微生物爿战斗发酵原料、微生物菌种和整体生产工艺上进行了改进。发明,本发明以枯草芽孢杆菌(Soc说usSMMfo)、巨大芽孢杆菌(fea7/us Megaten'ww)、硅酸盐细菌(Soc,7toMo7《g/"0 tf)和泾阳链霉菌(5!fre;7to/^cay力'"g^"gm^ ) 4种微生物混合发酵并且复合了可溶性氮 磷钾肥制得液体复合微生物肥料，该肥料可以用于所有的土壤类型和农作物，在蔬菜、水果上应用 效果最佳，其能够改善土壤结构、提高土壤保水保肥性能，具有较好增产和改善作物品质的效果。 发明详述一种液体复合微生物肥料，其特征在于，由以下原料混合而得，均为重量份10 20份四种微生物的混合发酵液，所述四种微生物的混合发酵液是由枯草芽 包杆菌，巨大芽孢杆菌，硅酸盐细菌、泾阳链霉菌混合发酵而成的；40 90份水；10 20份可溶性氮磷钾肥。其中枯草芽孢杆菌(&ci77"s5^^7^)，中国农业微生物菌种保藏管理中心菌种保藏号为枯 -3;巨大芽孢杆菌(few77"s Jfe辟te/7'鹏)，中国农业微生物菌种保藏管理中心菌种保藏号为 ACCC10011;硅酸盐细菌(&ci"M Myc^s^"o iA ),中国农业微生物菌种保藏管理中心菌种保藏 号为ACCC10013;泾阳链霉菌(5"tr印to/^ces力';7g7朋ge/^ys )，中国农业微生物菌种保藏管理中 心菌种保藏号为ACCC40021;上述菌种均可购自中国农业微生物菌种保藏管理中心。优选的，所述四种微生物的混合发酵液中活菌量分别为枯草芽孢杆菌50 70亿 毫升—'、巨大 芽 包杆菌50 80亿 毫升—'、硅酸盐细菌30 50亿 毫升—\泾阳链霉菌10 20亿 毫升—'，混合 发酵液中四种菌种总的活菌量不低于150亿'毫升—1。所述净水符合生活饮用水标准。所述可溶性氮磷钾肥中的氮肥、磷肥、钾肥的重量比为(1 2) : (0.5 1) : (1 2); 所述可溶性氮磷钾肥中，氮肥选自尿素、硫酸铵之一或组合，磷肥选自磷酸一铵、磷酸二铵 或组合，钾肥选自氯化钾、硫酸钾之一或组合。 一种液体复合微生物肥料的制备方法，步骤如下 1.混合发酵液的制备(1) 将枯草芽 包杆菌、巨大芽孢杆菌、硅酸盐细菌和泾阳链霉菌4种微生物菌种分别进行摇瓶 培养，得枯草芽孢杆菌菌液、巨大芽 包杆菌菌液、硅酸盐细菌菌液和泾阳链霉菌菌液四种菌液，(2) 将步骤(1)的枯草芽孢杆菌菌液、巨大芽孢杆菌菌液各按3%的接种量进入种子罐混合 发酵培养，得发酵菌液I;(3) 将步骤(1)的硅酸盐细菌菌液、泾阳链霉菌菌液各按3X的接种量aA种子罐后混合发 酵培养，得发酵菌液II;(4) 将步骤(2)的发酵菌液I和步骤(3)的发酵菌液11各按10% 20%的接种量进入发酵 罐，同时混合培养，培f^^3(TC，培养織180 200转/分，培养通风l: 1 (v: v/min)，培养 时间48小时，检菌，出罐得到混合发酵液；2. 将水按配比加入到上述的混合发M中，混和均匀，得混合发酔液的7K溶液；3. 将可溶性的氮肥、磷肥、钾肥按重量比为(1 2) : (0.5 1) : (1 2)混合得可溶 性氮磷钾肥，粉碎，过80目筛；4. 将步骤3的可溶性氮磷钾肥与歩骤2的混合发酵液的水溶液按比例均匀混合，全部溶解后 即得液体复合微生物肥料。该产品可包装检测出厂。上述步骤l中(I)的摇瓶培养和(2)种子罐发酵培养的工艺条件可按本领i或现有技术。本发 明优选如下条件(1) 摇瓶培养注入150ml培养基到50(M三角瓶中；用5ml无菌7K将斜面上菌种转入相应 的摇瓶中，在28 3(TC、 200转/分^f牛下培养24h。(2) 种子罐发酵培养温度30。C、培养转速180 200转/分、培养通风l: 1 (v: v/min); 培养时间36小时，35小时检菌。ttit的各类培养基如下，其中的百分比均为重量百分比 枯草芽 包杆菌、巨大芽 包杆菌种子罐发酵培养培养基硫^!安 0.2%葡萄糖 0.286%土豆淀粉 0.714%磷酸氢二钾 0.030%氯化钠 0.020%氯化钾 0.020%硫MI美 0.080%硫酸锰 0.003%硫酸亚铁 0.003%酵母粉 0.300%蒸馏水 98.00%硅酸盐细菌、泾阳链霉菌种子罐发酵培养 培养基豆饼粉0.5%蔗糖0.5%酵母粉0.5%硫酸铵0.01%硫酸镁0.08%磷隨二钾0.1%氯化钠0.01%碳酸转0.1%硫酸亚铁0. 001%蒸馏水98.2% 四种菌(混合)生产罐发酵培养 培养基淀粉 3%豆饼粉1%磷酸氢二钾0.03%硫,0.1%硫酸镁0.05%氯化铁0.001。/0碳,丐0.01% 酵母粉 0.02% 蒸馏7K 95.柳本发明方法制备的发酵液中,活菌駄到150亿 毫升—'以上其中巨大芽孢杆菌50 70亿 毫 升—'、枯草芽孢杆菌50 80亿.毫升—'、硅酸盐细菌30 50亿 毫升—'、径阳链霉菌10~20亿.毫升—'。本发明的液体复合微生物肥料，可以用于所有的土壤类型和农作物，在蔬菜、水果上应用效果 最佳，其能够改善土壤结构、提高土壤保7W呆肥性能，具有较好增产和改善作物品质的效果。本发明的优良皿如下入发明液体复合微生物肥料菌种混合连同发酵，生产设备少，成本低，易于实现； 么本发明将多种微生物的结合在一起，增强了微生物肥料的功效，显著提高肥料的利用率，有 效防治环境污染；&本发明的肥料能够显著提高作物产量，改善农产品品质；4.本发明的肥料具有显著改良土壤的作用，能够提高土壤可持续利用能力。具M施力式下面结合实施例对本发明进一步描述,但不限于此。如无特殊说明，原料中的百分比均为重量百 分比。所述原料为市售产品，豆饼粉过80目筛，可溶性的氮肥、磷肥、钾肥过80目筛。 ^!例1:四种微生物的混合发酵液的制备(1) 枯草魏赠液的歸培养基马铃薯(去皮、煮熟)200克蔗糖(白糖或葡萄糖)20克 蒸馏水 1000毫升pH 6. 0 6. 5劍旨 15 20克注入150ml培养基到500ml三角瓶中；用5ml无菌水将斜面上菌种转入相应的摇瓶中，在28 3(TC、 200转/分^#下培养2处。(2) g^^m液的歸培养基牛肉膏 5.0克蛋白胨 5.0克 氯化钠 5. 0克pH 7. 2 7. 4蒸馏水 1000毫升琼脂 15 18克注入150ml培养基到500ml三角瓶中；用5ml无菌水将斜面上菌种转入相应的摇瓶中，在28 3(TC、 200转/分^f牛下培养24h。(3) 枯草^F菌、欧魏蹄种子罐发酵培养培养基硫MI安 0.2%葡萄糖0. 286%土豆淀粉0. 714%磷酸氢二钾0. 030%氯化钠0. 020%氯化钾0. 020%硫酸镁0. 080%硫酸锰0. 003%硫酸亚铁0. 003%酵母粉0. 300%蒸馏水98. 00%按枯草芽 包杆菌液、巨大芽孢杆菌液各为3%的接种量进入种子罐后混合发酵;温度3(TC、 培养,180 200转/分、培养通风h 1 (v: v/min);培养时间36小时，35小时检菌。10克 0.5克 0.2克 l克0. 005克 0.4克 廳毫升 7. 0 7. 2 15 18克 36h，转速为200转/分)5克0.8克O.l克0.8克 l克 O.l克 l克7. 0 7. 2注入150ml培养基到500ml三角瓶中；用5ml无菌7jC将斜面上菌种转入相应的摇瓶中，在28 30°C、 200转/分^f牛下培养36h。(5)泾阳^ir的^^基8蔗糖 K典 MgS(V 7H20 CaC03 FeCl3 酵母粉 蒸馏水 pH 劍旨摇瓶J^S (28 30°C,蔗糖酵母膏硫麟硫酸镁 K2HP04 氯化钠 碳酸转可溶性淀粉20克跳1.0K異0.5克MgS(V 7H200.5克NaCl0.5克FeS04 '7恥0. 01克蒸馏水誦毫升pH7. 2 7. 4琼脂15 18克注入150ml培养基到500ml三角瓶中；用5ml无菌水将斜面上菌种转入相应的摇瓶中，在25 28"、 200转/分劍牛下培养48h。(6) a^a^菌、泾阳^M^^B^ 培养基豆饼粉0.5%蓆糖0.5% 酵娜0.5% 硫酸铵0.01% 硫酸镁0.08% 磷酸氢二钾0.1% 氯化钠0.01% 碳,丐0.1% 硫酸亚铁0. 001% 蒸馏水98.2%按硅酸盐细菌液、泾阳链霉菌液各为3%的接种量进入种子罐后混合发酵；温度3(TC、培养转 速190转/分、培养通风l: 1 (v: v/min);培养时间36小时，35小时检菌。(7) 四种菌(混合)培养基淀粉 3%豆饼粉1%磷酸氢二钾0.03% 硫酸铵0.1% 硫酸镁0.05% 氯化铁0.001% 碳酸,丐0.01% 酵母粉0.02% 蒸馏水95.8%将步骤(3)和(6)的菌液按各为10% 20%的接种量使4类菌进入发酵罐同时培养，培織 度30。C、培养转速190转/分、培养通风1: 1 (v: v/min)，培养48小时，检菌，出罐得到四种微生物的发酵液。该四种微生物的发酵液中活菌駄到150亿 毫升—'以上，其中巨大芽 包杆菌70亿 毫升—'、枯 草芽孢杆菌40亿 毫升—'、硅酸盐细菌30亿 毫升—'、泾阳链霉菌10亿 毫升-'); 实施例2 :液体复合微生物肥料实施例1制备的四种微生物的发酵液10公斤，净水90公斤，粉碎后过80目筛的可溶性氮磷钾 肥12.28公斤(其中，硫酸铵6.76公斤、尿素1.32公斤、磷酸二铵2.2公斤、硫酸钾2.0公斤)。制备方法将净水加入到四种微生物的发酵液中混合均匀，在将可溶性氮磷钾肥溶解在四种微 生物的发酵液的水溶液中,混合均匀,即可包装检测出厂。该肥料适于大田作物、设施蔬菜和露地蔬菜。实施例3 :同实施例2，所不同的是可溶性氮磷钾肥10.84公斤，可溶性氮磷钾肥的组成为硫酸铵7.64 公斤，磷酸二铵2. 2公斤、硫酸钾2. 0公斤。 实施例4 :同实施例2，所不同的是可溶性氮磷钾肥7.7公斤,可溶性氮磷钾肥的组成为:尿素3. 5公斤， 磷酸二铵2.2公斤、硫酸钾2.0公斤。
权利要求
1、一种液体复合微生物肥料，其特征在于，由以下原料混合而得，均为重量份10～20份四种微生物的混合发酵液，所述四种微生物的混合发酵液是由枯草芽孢杆菌，巨大芽孢杆菌，硅酸盐细菌、泾阳链霉菌混合发酵而成的；40～90份水；10～20份可溶性氮磷钾肥。
2、 如权利要求1所述的一种液体复合微生物肥料，其特征在于，所述四种微生物的混合发酵液 中活菌量分别为枯草芽孢杆菌50 70亿'毫升—'、巨大芽孢杆菌50 80亿.毫升"、硅酸盐细菌 30 50亿 毫升-'、泾阳链霉菌10 20亿 毫升—V混合发酵液中四种菌总的活菌量不低于150亿 毫升-'。
3、 如权利要求1所述的一种液体复合微生物肥料，其特征在于，所述可溶性氮磷钾肥中的氮 肥、磷肥、钾肥的重量比为(1 2) : (0.5 1): (1 2)。
4、 如权利要求1所述的一种液体复合微生物肥料，其特征在于，所述可溶性氮磷钾肥中，氮 肥选自尿素、硫酸铵之一或组合，磷肥选自磷酸一铵、磷酸二铵或组合，钾肥选自氯化钾、硫酸 钾之一或组合。
5、 一种权利要求1的液体复合微生物肥料的希恪方法，步骤如下 (一)混合发酵液的制备(1) 将枯草芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、硅酸盐细菌和泾阳链霉菌4种微生物菌种分别进行摇瓶培养，得枯草芽孢杆菌菌液、巨大芽孢杆菌菌液、硅酸盐细菌菌液和泾阳链霉菌菌液四种菌液，(2) 将步骤(1)的枯草芽孢杆菌菌液、巨大芽孢杆菌菌液各按3%的接种量进入种子罐混合 发酵培养，得发酵菌液I;(3) 将步骤(1)的硅酸盐细菌菌液、泾阳链霉菌菌液各按3X的接种量i4A种子罐后混合发 酵培养，得发酵菌液II;(4) 将步骤(2)的发酵菌液I和步骤(3)的发酵菌液11各按10% 20%的接种 入发酵 罐，同时混合培养，培im^3(TC,培养糊180 200转/分，培养通风l: 1 (v: v/min)，培养 时间48小时，检菌，出罐得到混合发酵液；(二) 将水按配比加入到上述的混合发酔液中，混和均匀，得混合发酵液的水溶液；(三) 将可溶性的氮肥、磷肥、钾肥按重量比为(1 2) : (0.5~1) : (1 2)混合得可溶性 氮磷钾肥，粉碎，过80目筛；(四) 将步骤(三)的可溶性氮磷钾肥与歩骤(二)的混合发酵液的水溶液按比例均匀混合，全部 溶解后即得液体复合微生物肥料。
6、 如权利要求5所述的一种液体复合微生物肥料的制备方法，其特征在于，步骤(一)中的摇 瓶培养和种子罐发酵培养分别采用如下条件(1) 摇瓶培养注入150ml培养基到500ml三角瓶中；用5ml无菌水将斜面上菌种转入相应的 摇瓶中，在28 30。C、 200转/分^j牛下培养24h;(2) 种子罐发酵培养？鹏30。C、培养转速180 200转/分、培养通风l: 1 (v: v/min);培养时间36小时，35小时检菌。
7、如权禾腰求5所述的一种液体复合微生物肥料的制备方法，其特征在于，步骤(一)(2)中 枯草芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌种子罐发酵培养基如下硫勝安0. 2%葡萄糖0. 286%十豆淀粉0. 714%磷隨二钾0.氯化钠0. 020%氯化钾0. 020%硫酸镁0. 080%硫酸锰0. 003%硫酸亚铁0. 003%酵母粉0. 300%蒸馏7K98. 00%。
8、如权利要求5所述的一种液体复合微生物肥料的制备方法，其特征在于，步骤(一)(3)中硅酸盐细菌、泾阳链霉菌种子罐发酵培养基如下豆饼粉 0.5%蔗糖0.5% 酵母粉0.5% 硫勝安0.01% 硫酸镁0.08% 磷酸氢二钾0.1% 氯化钠0.01% 碳,丐0.1% 硫酸亚铁0. OOlo/o 蒸馏水98.2%。
9、如权利要求5所述的一种液体复合微生物月EM的制备方法，其特征在于，步骤(一)(4)中 枯草芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、硅酸盐细菌、径阳链霉菌四种菌(混合)生产罐发,咅养基如下淀粉 3%豆饼粉1%磷隨二钾0.03%硫,安0.1%硫酸镁0.05%氯化铁0.001%碳酸钙0.01%酵母粉0.02% 蒸馏水95.8%。
全文摘要
一种液体复合微生物肥及其制备方法，属于微生物肥料技术领域。本发明以枯草芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、硅酸盐细菌和泾阳链霉菌4种微生物混合发酵并且复合了可溶性氮磷钾肥制得液体复合微生物肥料。该肥料可以用于所有的土壤类型和农作物，在蔬菜、水果上应用效果最佳，其能够改善土壤结构、提高土壤保水保肥性能，具有较好增产和改善作物品质的效果。
文档编号C05F11/00GK101239847SQ20081001473
公开日2008年8月13日 申请日期2008年3月7日 优先权日2008年3月7日
发明者刘兆辉, 宋效宗, 林海涛, 江丽华, 梅 王, 谭德水, 贾翠香, 郑福丽, 高新昊 申请人:山东省农业科学院土壤肥料研究所