专利名称：：能自我繁殖yy型超雄罗非鱼的制种方法
技术领域：
：本发明涉及罗非鱼的育种技术，更具体地说，它涉及一种能自我繁殖YY型超雄罗非鱼的制种方法。
背景技术：
：目前国际上最先进的YY型超雄罗非鱼制种方法是二系配套法，国际上称之为YY/GMT技术(Geneticallymaletilapiatechnology-—遗传雄性罗非鱼技术)。它首先用性别机制为XX早-XY^型罗非鱼的雄鱼XY6，与其反性转化系雌鱼(XY早)交配，繁殖出YY型超雄罗非鱼(YY6),再通过测交等手段寻找YYS，最后以YY^与其性反转化系YY早组成二系，交配后可获得100免的YY^。这一方法中的YY早是YY4的性反转化系，需要使用雌性激素诱导，耗费大量的人力、物力和时间才能获得，故制约了超雄罗非鱼制种技术的推广。
发明内容本发明要解决的技术问题是针对现有技术的上述不足，提供一种科学、简易、快速的能代代自我繁殖YY型超雄罗非鱼的制种方法。本发明人首先育成了一种自然界尚无的、遗传性别为雌性的WY型罗非鱼(WY早)，将其与YY型超雄罗非鱼(YY^)配种，即能自我繁殖出5096YYi和5(mWY早，并可自然繁衍生长。所以本发明人的制种方法，是以WY型罗非鱼为雌鱼与YY型超雄尼罗罗非鱼进行交配繁殖。上述的能自我繁殖YY型超雄罗非鱼的制种方法中，所述的WY型雌性罗非鱼是本发明人用奥利亚雌鱼(WZ早)与尼罗非雄鱼(XYS)杂交、测交、选育所得。上述的能自我繁殖YY型超雄罗非鱼的制种方法中，所述的YY型超雄尼罗罗非鱼是用YY/GMT技术育出的。本发明与现有技术相比，具有下述优点1.本发明是在对奥利亚罗非雌鱼(WZ早)与尼罗罗非雄鱼(XY4)的杂交子代中的WY型罗非鱼，通过实验确认为雌性的科学发现基础上，在全球首创的全新罗非鱼繁育体系。2.本发明的制种方法不仅省略了YY/GMT技术中YY早激素诱导过程，使YY型超雄罗非鱼制种流程更简便实用，成本更低，而且能自然繁衍后代，持续发展群体，开创了一条全新的超雄鱼制种技术途径，对YY超雄罗非鱼的推广应用和发展单性养殖业具有重大意义。3.由于本发明的自我繁殖系的雌雄鱼都是遗传性别，从而彻底免除了YY/GMT技术中以雌性激素诱导YY早存在荷尔蒙之虞。具体实施方式下面结合具体实施例对本发明作进一步地详细说明，但不构成对本发明的任何限制。尼罗罗非鱼的性别决定机制为XX罕-XYg类型，奥利亚罗非鱼性别决定机理为WZ罕-ZZ6类型。当奥利亚雌鱼与尼罗非雄鱼杂交，其子代会出现WY型罗非鱼，那么它是什么性别？长期以来，国内外专家认定是雄鱼，但我们则持怀疑态度，并认为这是一个重要的生物学和生产实践问题。从学术观点说，它涉及W与Y性染色体的相互关系；从生产角度看，如果WY型罗非鱼是雌鱼，则可通过建立WY早-YY^新的繁育体系，大量产生YY型超雄鱼，推动罗非鱼单性养殖业的发展。由此可见，深入研究WY型罗非鱼的性别机理和应用途径，具有重要的学术意义和生产价值。实施例一.材料与方法1.材料采用申请人从台湾引进的尼罗(o.niloticus)和奥利亚罗非鱼(o.aurea)，以及本发明人研制出的尼罗罗非鱼超雄鱼(YY$)作为实验材料；YY型超雄罗非鱼是本发明人用二系配套法，现国际上称之为YY/GMT技术育出的，其性别机制为YYg型。2.方法主要采用杂交和测交法；对WY型罗非鱼的性别机理和性别进行遗传学分析；对WY型罗非实验鱼进行生物学观察。二.实验观察结果与分析(一)实验一1.以10尾奥利亚罗非鱼雌鱼(WZ)与2尾尼罗罗非鱼雄鱼(XY)进行杂交实验，取F1代7000尾鱼苗同池(57ft)词养，在不同发育阶段取样，观察统计结果列入表l表lWZ早XXY《子代性比检测曰期实验鱼数(尾)雄性率(%)性别观察总数雄鱼雌鱼04-12-12301713'56.7全长6-9CM,雌鱼卵巢明显，卵子较大；雄鱼精原细胞小而多05-01-1959273245.8采用目测和镜检结合法区分性别。雌鱼全长12.6CM,雄鱼13.7CM05-03-0613653.8雌鱼卵巢发育至II-III期05-04-2373373650.7全长23-25CM,重340-450G。卵巢多处III期05-06-2455162720279649.3将鱼全部捕出观察。雌鱼卵巢多处III-IV期雄鱼精巢，见精子游动合计56912808288349.9子代鱼形态结构界于双亲之间，有自已的特点2.结果分析(1)将5次观察到雌雄鱼实数相加和归类，统计总数为5691尾，占总投放量的81.3%，其中雄鱼2808尾，雌鱼为2883，计算出的雄性率49.9%，作为子代群体实际性比。(2)遗传学分析表明，WZ型奥利亚与XY型尼罗鱼杂交会出现XZ$、ZY$、WX罕和WY型4种类型罗非鱼，在这里只有假设WY型鱼为雌性，才能解释上述Fl代49.9%雄性率实际结果。XZ测验P〈0.Ol说明，假设群型罗非鱼为雌鱼置信度为99%。(二)实验二1.取ll尾奥利亚罗非鱼雌鱼(WZ)与l尾尼罗罗非鱼超雄鱼(YY)进行杂交，取F1代鱼苗6400尾放在7.5亩鱼池(54#)饲养，并定期取样，观察结果列入表2。表2WZ早XYY^子代性比观察<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>将3次观察实数相加和分类，总数5801尾，占放养总数90.64%,其中雄鱼2957尾，雌鱼2844,统计雌雄性比为49.03%:50.97%，可代表子代群体的雌雄比例。2.结果分析(1)遗传学分析表明，WZ型奥利亚雌鱼与YY型尼罗超雄鱼交配，其F1代会出现WY和ZY二种性别基因型实验鱼，其雌雄性比为l:1，xz测验p〈0.01，表明WY型鱼为雌性的置信度为99%。(2)按照非此即彼的思维逻辑，我们已证明ZY型罗非鱼为超雄鱼，那么WY型实验鱼只能是雌鱼。(三)实验三1.采用尼罗超雄鱼(YY)亲本与F1代雌鱼(WY)进行测交实验，现将2006-04-12，对后代观察结果，列入表3。表3WY早XYYS子代性比<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>2.结果分析(1)将二口鱼池同一批子代实验鱼实数相加和归类，总数为3900尾，其中雄鱼2073尾，雌鱼1827尾，统计的雌雄性比为46.85%:53.15%。由于是全部测定和计数，可作为子代群体的实际性比。(2)遗传学分析说明，当YY同配雄鱼与另方雌鱼交配，如果子代出现雌雄比例为1:l的现象，则表明另方雌鱼为异配型，x2测验P<0.01，预期值与实际值相吻合，这就是说，子代雌性确为异配型(WY)雌鱼。三.WY早-YU新的繁育体系的建立确认WY型罗非鱼为异配性雌鱼，对于生产具有极其重要的价值，因为它与尼罗超雄鱼组装在一起，可形成WY早-YYg新的繁育体系。众所周知，在自然界的罗非鱼大家族里，已存在WZ早-ZZ6和XX早-XY4繁育体系。其繁育的特点是同性配子与异性配子相配，从而使子孙保持l:l的雌雄比例，否则就会自然灭绝，这是大自然选择的结果。从遗传学看问题，要使生物保持l:l的雌雄比例，则必须采取回交或测交机制。只有这样，才能使生物不断的自我繁殖和维持性比平衡。本发明提出的新型繁育体系与大自然的罗非鱼相比较，具有其自身的特点，它是界于XX早-XYS和WZ早-ZZ6之间一种繁育体系。但从机制上看问题，它又类似WZ早-ZZ6，即雌者为异配性，雄者为同配性。如果从体系的功能看问题，它具有自我繁殖和保持雌雄平衡的能力。研究表明，WY罕-YYS繁育体系，会自我不断产生众多YY型超雄鱼，以满足鱼全雄性罗非生产的需求。本发明制种的优点是科学、简易、快速、实用。在这里，我们充分利用WH显性原理的新成果，在WY早+YU群体里，根据性别直选超雄鱼；用不着从XY6+YY6群体里，采用测交法或分子生物学筛选超雄鱼。由此可见，WY早在这个繁育体系里，除了产生自我，实际上还起到不断扩增和甄别YY6的作用，这就大大地节省了选育YY型超雄鱼所需的设施、人力、资金和时间。权利要求1.一种能自我繁殖YY型超雄罗非鱼的制种方法，其特征在于，是以WY型罗非鱼为雌鱼与YY型超雄尼罗罗非鱼进行交配繁殖。2.根据权利要求1所述的能自我繁殖YY型超雄罗非鱼的制种方法，其特征在于，所述的WY型罗非鱼为奥利亚雌鱼与尼罗非雄鱼杂交所得。3.根据权利要求1所述的能自我繁殖YY型超雄罗非鱼的制种方法，其特征在于，所述的YY型超雄尼罗罗非鱼是用YY/GMT技术育出的。全文摘要本发明公开了一种能自我繁殖YY型超雄罗非鱼的制种方法，属于罗非鱼养殖
技术领域：
，其技术方案的要点是以WY型罗非鱼为雌鱼与YY型超雄尼罗罗非鱼进行交配繁殖。本发明具有科学、简易、快速的优点，用于YY型超雄罗非鱼的制种。文档编号A01K61/00GK101433186SQ20081021968公开日2009年5月20日申请日期2008年12月4日优先权日2008年12月4日发明者张海明,杨永铨,陈远生申请人:广州鹭业水产有限公司