专利名称：一种用于小型实验动物灌注固定的器械的制作方法
技术领域：
本实用新型涉及一种实验动物固定器械，特别是涉及一种用于小型实验动 物灌注固定的器械。
背景技术：
灌注固定法在脑缺血/缺氧相关疾病的研究中应用十分广泛，它对神经组织 (脑、脊髓)的快速冲洗、固定作用是任何一种离体固定法都无法替代的。有 文献报道该固定法应用于较大动物的医学实验(猫、兔、狗)中较多见。迄今 为止，对于体重极小的动物使用此种固定法却少有报道，相应的实验装置也未
见涉及。本装置正是利用体重只有10-20克，C57BL/6N基因缺陷型小鼠，采用 灌注固定技术而研制的用于动物医学科学研究的实用型机械。
二十一世纪危害人类健康的常见病、多发病中以心血管病居于榜首，其中 不管是原发或是继发的，均以不同诱因所导致的脑组织、心血管组织最终缺血/ 缺氧为其主要的发病机制。显而易见，脑和心血管缺血/缺氧的研究就显得迫在 眉睫。为此，我们利用C57BL/6N小鼠脑底动脉环(Willis)先天缺如(缺血/ 缺氧发生时，脑血流供应代偿消失)这一生理学特性，将其双侧颈总动脉与迷 走神经夹闭10分钟，造成整个脑组织完全的缺血/缺氧，而后恢复血流，即为 再灌注，待动物存活24小时止，在2个标准大气压的高压氧舱中持续治疗45 分钟，然后将动物快速致死取脑，进行随后的抗缺氧/缺血及高压氧治疗机制方 面的相关研究。
基于C57BL/6N小鼠体重极轻这一生物学特性，可推测其脑组织 加细小、 娇嫩(约几克)。事实也证明了我们推测的正确性。稍有医学基础知识的人可知，脑组织位于颅腔内，其表面还有与之相连的十二对脑神经根出入颅腔，其外周 又被若干块颅骨所包绕，在生理学上讲，这是脑组织的先天屏障作用；但这也 为我们取得完整的全脑组织进行科学研究增加了很大难度。可想而知，稍有操 作不慎，既可前功尽弃，造成取材的失败。还有，动物处死血流供应停止后， 脑组织在短时间内极易造成自身的融解腐败。故在摘取脑组织时操作确保迅速、 快捷，以尽量保持组织结构的新鲜与完整。否则，时间稍久，脑细胞将发生一 系列的变性、坏死，同样影响实验结果的真实、可靠性。
再者，血液中含有大量的生物大分子，其中不乏许多内源性的过氧化物酶 类。而我们探讨的正是超氧化物歧化酶(SOD-1)在脑缺血/缺氧中蛋白表达发 生的变化，如若不将脑组织中的血液冲洗干静，定会发生内源、外源氧化物酶 的相互干扰。
因此，经心灌注固定是在摘取脑组织实验过程中唯一可行的客观选择。本 实用新型的目的是提供一种用于小型实验动物灌注固定的器械。
发明内容
本实用新型的器械包括支架、液体盛放装置、液体输送管道、三通管、液 体选择/切换装置、流速调控装置以及穿剌装置。利用该装置，首先通过液体选 择/切换装置选择用足量的室温生理盐水冲净固定在试验台上的小鼠全身的血 液，然后选择/切换固定液经心灌注后，沿全身血管完成一次体循环和肺循环， 而后回到右心室。因此，固定液流经了动物全身的所有组织，所有的组织均得 到固定。当然脑组织也不例外。经过固定液浸泡的脑，具有了一定硬度。同时 也将其所有的组织形态维持在生活状态。这时，我们开颅取脑势必就显得轻而 易举了。所以，选用经心灌注固定法对维持脑组织的形态、结构乃至全脑的完 好性具有关键意义。
图1是本实用新型的用于小型实验动物灌注固定的器械的示意图。
，具体实施方式
参照附图1，我们将对本实用新型的器械的构成和使用进一步进行说明。 本实用新型的用于小型实验动物灌注固定的器械包括
支架1:该支架是具有稳固底座的铁质"T"型支架，选用具有稳定底座的 铁架，目的保持装置的稳定性，架高可视动物实验台的不同需求可调。支架两 侧是左右等长且与地面平行的侧臂，臂外侧端向下制成"V"型弯勾，以分别悬 挂装有生理盐水和灌注液的液体盛放装置所用，液体盛放装置与动物水平面相 距50厘米。其原因有二第一，根据液体压强计算公式可知，液体压强与液面 的高度呈正相关。经过作者反复摸索，液面与动物水平面相距50厘米的高度所 产生的静液压刚好满足可将冲洗液、灌注液输送到动物全身各级大、中、小 血管，进而达到冲洗、固定的目的；第二，这个压力的恒定也可维持各级血管 的结构完整性，不会引起由于压力大小变化，造成动物血管的破裂，导致实验 的失败。另外，动物开胸将液体导入心脏等操作均需在体视显微镜下进行，一 旦手术完成，要求冲洗、灌注液事先备好，以达到争分夺秒的效果，更重的是， 还可避免由于液体的更换，将空气带入液体内，近一步造成血管的堵塞，同样 可致灌注结果的不理想。
液体盛放装置2:可选用两个玻璃质带有标准刻度，、上端留有开口、下端 逐渐变细呈直径约为1厘米、长约5厘米的玻璃管的吊瓶，其上口保持开放， 与外界相通，以维持一定的静液压。
液体输送管道3和三通管6:液体输送管道可由三根乳胶管组成，两根乳胶 管的一端分别与液体盛放装置，如吊瓶相紧密连通，两乳胶管各长50厘米，乳胶管另一端分别与硬塑料质地的三通管6的两个开口连通，三通管6的第三开 口与一根带有透明悬液壶的乳胶管相连，通过透明的悬液壶可观察液体灌注时 的流速，以便随时调节流速，控制流量。
液体选择/切换装置4和液体选择/切换装置5:液体选择/切换装置位于与 吊瓶相连通的乳胶管上，用于进行液体的选择/切换。
流速调控装置7:流速调控装置位于透明悬液壶的下方，可以随时调节流速、 控制流量。
穿刺装置8:将插入动物心脏的穿刺装置设计为lmm直径软管，其原因有二-首先，动物心脏极小；其次，太硬的装置极易将心脏毁坏。 装置使用过程如下
冲洗液的灌注先将造模成功的小鼠9仰卧位固定于手术台10上，两侧
盛液瓶2装有事先配制的室温的冲洗液及4。C保存的固定液，暴露动物心脏， 于左心尖部将软塑管8端口小心插入至右心耳，先灌冲洗液(生理盐水)，流 速控制以快为最佳。要求10min内完成，在这一过程中，可见右心耳流出液的 颜色由开始的鲜红逐渐变淡粉色为止，总液量为30毫升。整个操作在体视镜 下完成。
冲洗液灌注完成后，关闭同侧的螺悬夹，打开对侧螺悬夹，进行固定液 的灌注，流速控制为前1/2液量流速稍快(30滴/分钟)，后1/2缓慢(20滴/ 分钟)，其流速控制通过悬液壶流速观查决定，要求30min内完成。随后剪 开右心耳，拔出穿刺心脏装置，动物翻转呈腹卧状。快速剪开头部皮肤，撬开 颅骨，剪开硬、软脑膜，迅速摘取全脑，沿正中裂轻轻剖开呈左右相等的两部 分，用生理盐水稍冲洗，将脑组织重新放入固定液中，进行后固定。待条件成 熟，既可进行后续的实验研究
权利要求1、一种用于小型实验动物灌注固定的器械，包括支架，该支架是具有稳固底座的铁质“T”型支架，架高可视动物实验台的不同需求可调；支架两侧是左右等长且与地面平行的侧臂，臂外侧端向下制成“V”型弯勾，以分别悬挂装有生理盐水和灌注液的液体盛放装置所用；液体盛放装置，可选用两个玻璃质带有标准刻度、上端留有开口、下端逐渐变细呈直径为1厘米、长5厘米的玻璃管的吊瓶，其上口保持开放，与外界相通，以维持一定的静液压；液体输送管道，液体输送管道可由三根乳胶管组成，两根乳胶管的一端分别与液体盛放装置相紧密连通，两乳胶管各长50厘米，两根乳胶管另一端分别与硬塑料质地的三通管的上端两个开口连通，三通管的下端开口与一根带有透明悬液壶的乳胶管相连，通过透明的悬液壶可观察液体灌注时的流速，以便随时调节流速，控制流量；液体选择/切换装置，位于与吊瓶相连通的乳胶管上，用于进行液体的选择/切换；流速调控装置，位于透明悬液壶的下方，可以随时调节流速、控制流量；穿刺装置，将插入动物心脏的穿刺装置设计为1mm直径软管。
2、 根据权利要求1所述的用于小型实验动物灌注固定的器械，其中所述液体盛 放装置与动物水平面相距50厘米。
专利摘要本实用新型的器械包括支架、液体盛放装置、液体输送管道、三通管、液体选择/切换装置、流速调控装置以及穿刺装置。利用该装置，首先通过液体选择/切换装置选择用足量的生理盐水冲净固定在试验台上的实验动物全身的血液，然后选择/切换固定液经心灌注后沿全身血管完成一次体循环和肺循环，而后回到右心室。由此，得到固定的脑组织。经过固定液浸泡的脑，具有了一定硬度。同时也将其所有的组织形态维持在生活状态。因此，利用本器械经心灌注固定法对维持脑组织的形态、结构乃至全脑的完好性具有关键意义。
文档编号A61D7/00GK201394094SQ20092015200
公开日2010年2月3日 申请日期2009年4月23日 优先权日2009年4月23日
发明者李宝红, 旭 贺 申请人:首都医科大学