专利名称：一种血液保护剂及其制备方法与应用的制作方法
技术领域：
本发明属于生物技术领域，具体来说涉及一种血液保护剂及其制备方法与应用。
背景技术：
在动物或者人体内采集到的血液称为全血，对全血不加入抗凝剂与血球分离得到的液体称为血清，在全血中加入抗凝剂后与血球分离所得到的液体称为血浆。无论全血、血清、血浆都有一定的保存期限，在常温液体形势下很容易失效，因此需要一种有效可行的延长血液制品保存期限的保护剂是非常需要的，特别是用于各种血清免疫学及生物化学检测试剂盒中制备或配制阳性对照、阴性对照、临界值及各种定量标准品。目前血液或者血浆保存过程中，防止血液凝固的方法，有下列几种
一、用化学药品防止血液凝固用钙结合剂消除钙离子的作用，使血液中的钙转变为可溶性的，但不离子化的螯合物。此方法简便，应用广泛。(I)枸橼酸三钠一般有二种结晶水含量不同的成品一种是2Na3C8H507 · IlH2O,其与血浆成等渗之浓度为3. 8% ;另外一种为Na3C8H5O7 · 2H20,与血浆成等渗之浓度为3. 2%(2. 5^4. 0%)，均为碱性，枸橼酸或其盐与钙作用生成可溶性的螯合物，当制成2. 5%溶液时，PH为7. 5。最低的抗凝浓度为O. 2%，一般在血液中最终浓度应为O. 4^0. 6%，是长久以来国际上最通用的抗凝剂。(2)枸橼酸二钠其中含有大量枸橼酸离子，3. 5%溶液的PH是4. 5，和枸橼酸三钠相比，其优点是简化了配置保存液的处方及其配制手续，避免高压消毒时葡萄糖的焦化现象。(3)三羟戊二酸钠可以替代枸橼酸钠，抗凝力弱，它的7%溶液的PH为4. 3，抗凝力相当于2. (Γ3. 5%的枸橼酸盐溶液，毒性较少，对红细胞基质起加强作用。(4) EDTA-Na2 :钙络合剂。是一种很强的抗凝剂。I. 5克EDTA-Na2及5%葡萄糖溶液在4度保存500ml血液的有效期为28天。二、用生物制剂防止血液凝固如肝素，是一种酸性粘多糖，其作用是阻止凝血酶的生成，从而达到抗凝目的。IOmg (1000单位)可使IOOml血液数天不凝固，主要用于白细胞和血小板的分离和保存，但因其抗凝能力有一定的时间限制和不能长期保存血液等缺点，使其应用受到限制。三、采用物理性方法防止血液凝固应用离子交换剂除去血液中的钙离子，使血液不凝固。此血液不含抗凝物质，无中毒危险，但不能用于血液保存。
发明内容
本发明的目的在于提出一种血液保护剂，该保护剂以水与三羟甲基氨基甲烷缓冲液作为溶剂，其中保护剂包括表面活性剂、防腐剂、胎牛血清，丙三醇、糖类，盐类，将血液与保护剂以一定比例混合均匀后，置于2l°c保存，使得血清、血浆有长达120天以上的检测有效期。
本发明的目的可以通过以下技术方案来实现一种血液保护剂，所述保护剂由表面活性剂、防腐剂、胎牛血清、丙三醇、糖类、氯化钠溶解在O. 605飞O. 5g/L的三羟甲基氨基甲烷缓冲液中形成的溶液，其中表面活性剂、防腐剂、胎牛血清、丙三醇、糖类、氯化钠在所述溶液中的浓度分别为 O. I 20gL、_0. 01 2gL、l(T200ml/L、l(T200ml/L、5 50gL、9gL。作为优选，本发明所述的表面活性剂为聚乙二醇辛基苯基醚或C14-16烯烃磺酸钠，防腐剂为ProClin 300或叠氮钠，糖类为蔗糖或海藻糖或果糖或右旋糖酐中的至少一种。作为优选，本发明所述的血液保护剂是由聚乙二醇辛基苯基醚、ProClin 300、胎牛血清、丙三醇、蔗糖、氯化钠溶解在6. 05g/L的三 羟甲基氨基甲烷缓冲液中形成的溶液，聚乙二醇辛基苯基醚、ProClin300、胎牛血清、丙三醇、蔗糖、氯化钠在所述溶液中的浓度分别为 IgL,O. 02g/L、50ml/L、20ml/L、10g/L、9g/L。作为优选，本发明所述的血液保护剂是由聚乙二醇辛基苯基醚、叠氮钠、胎牛血清、丙三醇、海藻糖、氯化钠溶解在I. 21gL的三羟甲基氨基甲烷缓冲液中形成的溶液，聚乙二醇辛基苯基醚、叠氮钠、胎牛血清、丙三醇、海藻糖在所述溶液中的浓度分别为5gL、O.02gL、20ml/L、50ml/L、15g/L。作为优选，本发明所述的血液保护剂是由聚乙二醇辛基苯基醚、叠氮钠、胎牛血清、丙三醇、右旋糖酐、氯化钠溶解在即2. 42g/L的三羟甲基氨基甲烷缓冲液中形成的溶液，聚乙二醇辛基苯基醚、叠氮钠、胎牛血清、丙三醇、右旋糖酐在所述溶液中的浓度分别为IOgL,O. 02gL、10ml/L、100ml/L、5g/L。本发明所述的制备血液保护剂的方法，具体步骤如下I)按配方称取各组分；2)先加入700ml的双蒸水到容器中，将步骤I)中的各组分按照以下顺序依次加入表面活性剂、三羟甲基氨基甲烷、氯化钠、防腐剂、胎牛血清、糖类、丙三醇，混合均匀后，定容至1L，调整pH至7. (Γ8. 5，得到血液保护剂。本发明所述的血液保护剂在库存血液保存中的应用。本发明所述血液保护剂在库存血液保存中的应用中，将采集的伤寒、登革热、锥虫血液标本与血液保护剂以1:广1:2的比例缓慢充分混合均匀，置于2 8°C保存。本发明的优点在于1.可延长全血、血清、血浆的保存期限长达120天以上；2.应用广泛，可用于各种需要配备阳性对照、阴性对照及各种定量标准品的血清免疫学及生物化学检测试剂盒。具体实施方法以下实施例用于解释本发明，而不用于限制本发明。实例I用3份不同强度的伤寒IgM阳性标本和3份伤寒阴性血液标本进行试验，保护剂组成为三羟甲基氨基甲烷(6. 05g/L)，聚乙二醇辛基苯基醚(lg/L)，胎牛血清(50ml/L)，丙三醇(20ml/L)，防腐剂ProClin300(0. 02g/L)，蔗糖(10g/L)，氯化钠(9g/L)。在常温下进行对照试验，其中一组为血液标本，另一组为血液标本与保护剂的混合液(混合比例为1:1)，置于疒8°C保存不同时间后，用一种伤寒检测试剂进行检测。表I为阳性标本检测结果
权利要求
1.一种血液保护剂，其特征在于，所述保护剂由表面活性剂、防腐剂、胎牛血清、丙三醇、糖类、氯化钠溶解在O. 605 60. 5gL的三羟甲基氨基甲烷缓冲液中形成的溶液，其中表面活性剂、防腐剂、胎牛血清、丙三醇、糖类、氯化钠在所述溶液中的浓度分别为O. f 20gL、O. 01 2gL、10 200ml/L、10 200ml/L、5 50gL、9g/L。
2.根据权利要求I所述的血液保护剂，其特征在于，所述的表面活性剂为聚乙二醇辛基苯基醚或C14-16烯烃磺酸钠，防腐剂为ProClin 300或叠氮钠，糖类为蔗糖或海藻糖或果糖或右旋糖酐中的至少一种。
3.根据权利要求2所述的血液保护剂，其特征在于，所述的血液保护剂是由聚乙二醇辛基苯基醚、ProClin 300、胎牛血清、丙三醇、蔗糖、氯化钠溶解在6. 05g/L的三羟甲基氨基甲烷缓冲液中形成的溶液，其中聚乙二醇辛基苯基醚、ProClin300、胎牛血清、丙三醇、蔗糖、氯化钠在所述溶液中的浓度分别为lgL、0. 02gL、50ml/L、20ml/L、10gL、9g/L。
4.根据权利要求2所述的血液保护剂，其特征在于，所述的血液保护剂是由聚乙二醇辛基苯基醚、叠氮钠、胎牛血清、丙三醇、海藻糖、氯化钠溶解在I. 21g/L的三羟甲基氨基甲烷缓冲液中形成的溶液，其中聚乙二醇辛基苯基醚、叠氮钠、胎牛血清、丙三醇、海藻糖在所述溶液中的浓度分别为 5gL、0. 02g/L、20ml/L、50ml/L、15gL。
5.根据权利要求2所述的血液保护剂，其特征在于，所述的血液保护剂是由聚乙二醇辛基苯基醚、叠氮钠、胎牛血清、丙三醇、右旋糖酐、氯化钠溶解在即2. 42g/L的三羟甲基氨基甲烷缓冲液中形成的溶液，其中聚乙二醇辛基苯基醚、叠氮钠、胎牛血清、丙三醇、右旋糖酐在所述溶液中的浓度分别为10g/L、0. 02g/L、10ml/L、100ml/L、5gL。
6.一种制备权利要求1-5任一项所述血液保护剂的方法，其特征在于，所述制备方法的具体步骤如下 1)按配方称取各组分； 2)先加入700ml的双蒸水到容器中，将步骤I)中的各组分按照以下顺序依次加入表面活性剂、三羟甲基氨基甲烷、氯化钠、防腐剂、胎牛血清、糖类、丙三醇，混合均匀后，定容至1L，调整pH至7. (Γ8. 5，得到血液保护剂。
7.权利要求1-5任一项所述的血液保护剂在库存血液保存中的应用。
8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，在所述应用中，将采集的伤寒、登革热、锥虫血液标本与血液保护剂以1:广1:2的比例缓慢充分混合均匀，置于2 8°C保存。
全文摘要
本发明公开了一种血液保护剂及其制备方法。该血液保护剂由表面活性剂、防腐剂、胎牛血清、丙三醇、糖类、氯化钠溶解在0.605~60.5g/L的三羟甲基氨基甲烷缓冲液中形成的溶液，其中表面活性剂、防腐剂、胎牛血清、丙三醇、糖类、氯化钠在所述溶液中的浓度分别为0.1~20gL、_0.01~2g/L、10~200ml/L、10~200ml/L、5~50g/L、9gL。本发明将血液与保护剂以一定比例混合均匀后，置于2~8℃保存，使得血清、血浆有长达120天以上的检测有效期，可用于各种需要配备阳性对照、阴性对照及各种定量标准品的血清免疫学及生物化学检测试剂盒。
文档编号A01N1/00GK102823579SQ201210306860
公开日2012年12月19日 申请日期2012年8月27日 优先权日2012年8月27日
发明者陆维克, 张蕾, 吴淑江, 陈金树, 叶春生, 王海剑 申请人:杭州博拓生物技术有限公司