一种燕麦再生体系构建方法

文档序号:210299阅读:298来源:国知局
专利名称:一种燕麦再生体系构建方法
一种燕麦再生体系构建方法技术领域
本发明属于燕麦再生体系构建方法。
背景技术
植物再生体系的构建是利用植物细胞全能性,在无菌条件下利用人工培养基对植物组织的培养,是珍稀物种保留、繁殖的重要途径,也是工厂化生产脱毒苗的基础,更是基因功能验证的必要环节。
燕麦现在的再生体系构建方法主要要有愈伤组织培养、根尖、花药培养等。愈伤组织培养的主要外植体为未成熟胚与成熟胚。未成熟胚培养与成熟胚培养出愈率高,但其与花药培养一样存在时空性,必须等植物性细母胞成熟时或幼胚开始分化才可取材。而且禾本科植物根尖培养与花药培养也要诱导产生愈伤组织,经愈伤组织分化后成苗。而来源于不同植物或同一种植物不同部位的愈伤组织,在颜色、结构、生长习性等都可能存在差异, 因此需要根据不同的实验目的控制愈伤组织的状态。这对外植体、实验条件如温度、光照、 PH值、培养基的配制等的要求严格,每种培养体系的构建都需要摸索很长时间,耗费大量的人力、物力。且在愈伤组织培养过程中,因细胞的分裂旺盛极容易产生变易,而造成变易发生的因素很多,如光照、温度、药品、紫外线等,这非常不利于基因功能的验证,也不·利于植物遗传稳定性的保持。发明内容
本发明以优化燕麦再生体系为目的;以保持遗传稳定性为核心,从提高组织培养成苗率出发,解决上述现行培养方式的弊端,提供一种燕麦再生体系的构建方法。
为解决上述技术问题,本发明的技术方案是一种燕麦再生体系构建方法,所述燕麦再生体系构建方法采用叶基段培养,不经过愈伤组织直接分化成苗,包括如下步骤
SI、将成熟燕麦种子灭菌后,用MS基本培养基培养4-7天;
S2、当燕麦叶长至3_5cm时,取叶基段用MSB培养基培养至成苗。
优选的,所述叶基段培养是种子萌发后取其基段培养,直接分化,向下生根,向上长叶。
优选的,所述MSB培养基为MS与B5相结合,加上IAA与水解酪蛋白。
采用了上述技术方案,本发明的有益效果为本发明因采用叶基段培养,不经过愈伤阶段,不需要继代培养,避免了愈伤组织培养过程中可能产生的基因突变;不需要监控愈伤组织的状态,不必摸索继代培养条件,减少了实验环节,节省人力、物力,大幅度的降低生产成本,提高产出效益。经过实验测试,本发明的再生体系方法成苗率达98%以上,与现行愈伤组织培养方法比较,节省时间3至6个月,每升培养基成本降低O. 11到4. 68元。


图I为种子发芽的示意图2为叶基段培养的示意图3为分化成苗的示意图;具体实施方式
下面结合施例对本发明进一步说明。
本发明的实施条件无菌条件,培养基室,温度、光照、湿度可控的培养室,操净工作台。
本发明的实质是叶基段不经过愈伤组织而是直接产生不定芽,萌发成苗。
一种燕麦再生体系构建方法,所述燕麦再生体系构建方法采用叶基段培养,不经过愈伤组织直接分化成苗,包括如下步骤
SI、将成熟燕麦种子灭菌后,用MS基本培养基培养4-7天;
S2、当燕麦叶长至3_5cm时,取叶基段用MSB培养基培养至成苗。
叶基段培养是种子萌发后取其基段培养,直接分化,向下生根,向上长叶。
MSB培养基为MS与B5相结合,加上IAA与水解酪蛋白。
本发明不局限于上述具体的实施方式,本领域的普通技术人员从上述构思出发, 不经过创造性的劳动,所作出的种种变换,均落在本发明的保护范围之内。
权利要求
1.一种燕麦再生体系构建方法,其特征在于,所述燕麦再生体系构建方法米用叶基段培养,不经过愈伤组织直接分化成苗,包括如下步骤 51、将成熟燕麦种子灭菌后,用MS基本培养基培养4-7天; 52、当燕麦叶长至3-5cm时,取叶基段用MSB培养基培养至成苗。
2.如权利要求I所述的一种燕麦再生体系构建方法,其特征在于,所述叶基段培养是种子萌发后取其基段培养,直接分化,向下生根,向上长叶。
3.如权利如权利要求I或2所述的一种燕麦再生体系构建方法,其特征在于,所述MSB培养基为MS与B5相结合,加上IAA与水解酪蛋白。
全文摘要
本发明公开了一种燕麦再生体系构建方法,所述燕麦再生体系构建方法采用叶基段培养,不经过愈伤组织直接分化成苗,包括如下步骤S1、将成熟燕麦种子灭菌后,用MS基本培养基培养4-7天;S2、当燕麦叶长至3-5cm时,取叶基段用MSB培养基培养至成苗。本发明以优化燕麦再生体系为目的;以保持遗传稳定性为核心,从提高组织培养成苗率出发,解决上述现行培养方式的弊端,提供一种燕麦再生体系的构建方法。
文档编号A01H4/00GK102972300SQ20121052905
公开日2013年3月20日 申请日期2012年12月2日 优先权日2012年12月2日
发明者刘景辉, 高彩婷, 宝力高, 赵宝平, 李倩 申请人:内蒙古农业大学
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