壶瓶碎米荠的组织培养与快速繁殖方法
【专利摘要】本发明涉及壶瓶碎米荠培养领域，具体涉及一种壶瓶碎米荠的组织培养与快速繁殖方法，其包括如下步骤：取材及处理、愈伤诱导、不定芽的诱导、生根培养以及移栽。本发明培养方法简便，都使用常用的培养基，成本低，成活率高，是一种值得推广的壶瓶碎米荠的快速培养方法。
【专利说明】壶瓶碎米荠的组织培养与快速繁殖方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及壶瓶碎米荠培养领域，尤其涉及一种壶瓶碎米荠的组织培养与快速繁殖方法。
【背景技术】
[0002]壶瓶碎米荠，是我国特有的十字花科碎米荠属植物新种，当地百姓做野生蔬菜经常采食，单株重达400克，具有超强的富硒能力，但是限于其产量较低，急需一种简易的培养技术。
【发明内容】
[0003]本发明提供一种壶瓶碎米荠的组织培养与快速繁殖方法，其方法简便、成活率高。
[0004]本发明实施例提供一种壶瓶碎米荠的组织培养与快速繁殖方法，其包括如下步骤:
取材及处理:取壶瓶碎米荠的茎、幼叶或叶柄，清水冲洗后消毒处理；
愈伤诱导:将壶瓶碎米荠接种在诱导分化培养基上，在温度20-25摄氏度、光照强度20-27摩尔/平方米/秒、光照10~17小时/天的环境下培养13~15天，壶瓶碎米荠外植体可见有绿色愈伤组织形成；
不定芽的诱导:形成的愈伤组织续生长25~35天，至愈伤组织上形成绿色芽点，继续培养12~17天，大量丛生芽生成；
生根培养:丛生芽长至2-3厘米时，将丛生芽进行切割后接种到生根培养基上，25~30天根系形成，成为再生苗；
移栽:选根系发达的再生苗，炼苗4~8天后洗净培养基，移栽到蛭石、泥炭土和珍珠岩的混合基质中，覆盖塑料薄膜，弱光环境下生长8~12天后移至自然条件下生长。
[0005]对上述技术方案的进一步改进为:所述取材及处理步骤中消毒处理后将壶瓶碎米荠材料剪成0.5厘米Χ0.5厘米小方块。
[0006]优选地，所述消毒处理步骤具体为:在2飞摄氏度低温处理6~15小时后，用50%~90%酒精浸泡2~10秒，用无菌水冲洗数次，用0.05%~0.2%的氯化汞溶液浸泡消毒数分钟，再用无菌水冲洗数次。
[0007]其中，所述诱导分化培养基为:MS+6_BA 2.0毫克/升+NAA 0.1，并添加30克/升蔗糖和7克/升琼脂，pH为5.8，在110-130摄氏度下湿热灭菌10-30分钟。
[0008]其中，所述生根培养基为:1/2MS+NAA 0.3，并添加30克/升蔗糖和7克/升琼脂，pH为5.8，在110~130摄氏度下湿热灭菌10~30分钟。
[0009]所述移栽步骤中，蛭石、泥炭土和珍珠岩的比例为1:1:1。
[0010]所述取材及处理中，清水冲洗时间为广2小时。
[0011]优选地，所述愈伤诱导、不定芽的诱导以及生根培养步骤中，培养环境为温度20~25摄氏度、光照强度20~27摩尔/平方米/秒、光照10~17小时/天。[0012]本实施例壶瓶碎米荠的组织培养与快速繁殖方法，有益效果是:
通过在培养基上经过愈伤诱导、不定芽的诱导以及生根培养后移栽培育，培养方法简便，都使用常用的培养基，成本低，成活率高，是一种值得推广的壶瓶碎米荠的快速培养方法。
【具体实施方式】
[0013]为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明作进一步地详细描述。
[0014]实施例1: 本实施例提供一种壶瓶碎米荠的组织培养与快速繁殖方法，其包括如下步骤:
制作培养基:
诱导分化培养基:用MS+6-BA 2.0毫克/升+NAA 0.1，并添加30克/升蔗糖和7克/升琼脂，调节PH至5.8，在121摄氏度下湿热灭菌20分钟。
[0015]生根培养基:用1/2MS+NAA 0.3，并添加30克/升蔗糖和7克/升琼脂，调节pH至5.8，在121摄氏度下湿热灭菌20分钟。
[0016]取材及处理:取壶瓶碎米荠的茎、幼叶或叶柄，清水冲洗2小时，在4摄氏度低温处理12小时后,用75%酒精浸泡7秒,用无菌水冲洗3次,用0.1%的氯化萊溶液浸泡消毒10分钟，再用无菌水冲洗3次，将壶瓶碎米荠材料剪成0.5厘米X0.5厘米的小方块。
[0017]愈伤诱导:将壶瓶碎米荠接种在诱导分化培养基上，在温度23摄氏度、光照强度24摩尔/平方米/秒、光照14小时/天的环境下培养，4天后培养基出现愈伤组织，呈现淡绿色，14天后，80%以上叶柄外植体可见有绿色愈伤组织形成。
[0018]不定芽的诱导:形成的愈伤组织在相同的培养基及培养环境下继续生长30天，至愈伤组织上形成绿色芽点，继续培养15天，大量丛生芽生成。
[0019]生根培养:丛生芽长至2-3厘米时，将丛生芽进行切割后接种到生根培养基上，相同的培养环境下培养30天后根系形成，生根率为100%，成为再生苗。
[0020]移栽:选根系发达的再生苗，炼苗7天后洗净培养基，移栽到蛭石、泥炭土和珍珠岩比例1:1:1的混合基质中，覆盖塑料薄膜，弱光环境下生长10天后移至自然条件下生长即可。
[0021]经检测，上述移栽的壶瓶碎米荠再生苗成活率达90%以上。
[0022]实施例2:
本实施例提供一种壶瓶碎米荠的组织培养与快速繁殖方法，其包括如下步骤:
制作培养基:
诱导分化培养基:用MS+6-BA 2.0毫克/升+NAA 0.1，并添加30克/升蔗糖和7克/升琼脂，调节PH至5.8，在110摄氏度下湿热灭菌10分钟。
[0023]生根培养基:用1/2MS+NAA 0.3，并添加30克/升蔗糖和7克/升琼脂，调节pH至5.8，在110摄氏度下湿热灭菌10分钟。
[0024]取材及处理:取壶瓶碎米荠的茎、幼叶或叶柄，清水冲洗I小时，在2摄氏度低温处理6小时后,用50%酒精浸泡2秒,用无菌水冲洗3次,用0.05%的氯化萊溶液浸泡消毒10分钟，再用无菌水冲洗3次，将壶瓶碎米荠材料剪成0.5厘米X0.5厘米的小方块。[0025]愈伤诱导:将壶瓶碎米荠接种在诱导分化培养基上，在温度20摄氏度、光照强度20摩尔/平方米/秒、光照10小时/天的环境下培养，3天后培养基出现愈伤组织，呈现淡绿色，13天后，80%以上叶柄外植体可见有绿色愈伤组织形成。
[0026]不定芽的诱导:形成的愈伤组织在相同的培养基及培养环境下继续生长25天，至愈伤组织上形成绿色芽点，继续培养12天，大量丛生芽生成。
[0027]生根培养:丛生芽长至2-3厘米时，将丛生芽进行切割后接种到生根培养基上，相同的培养环境下培养25天后根系形成，生根率为100%，成为再生苗。
[0028]移栽:选根系发达的再生苗，炼苗4天后洗净培养基，移栽到蛭石、泥炭土和珍珠岩比例1:1:1的混合基质中，覆盖塑料薄膜，弱光环境下生长8天后移至自然条件下生长即可。
[0029]实施例3:
本实施例提供一种壶瓶碎米荠的组织培养与快速繁殖方法，其包括如下步骤: 制作培养基: 诱导分化培养基:用MS+6-BA 2.0毫克/升+NAA 0.1，并添加30克/升蔗糖和7克/升琼脂，调节pH至5.8，在130摄氏度下湿热灭菌30分钟。
[0030]生根培养基:用1/2MS+NAA 0.3，并添加30克/升蔗糖和7克/升琼脂，调节pH至5.8，在130摄氏度下湿热灭菌30分钟。
[0031]取材及处理:取壶瓶碎米荠的茎、幼叶或叶柄，清水冲洗2小时，在6摄氏度低温处理15小时后,用90%酒精浸泡10秒,用无菌水冲洗3次,用0.2%的氯化萊溶液浸泡消毒10分钟，再用无菌水冲洗3次，将壶瓶碎米荠材料剪成0.5厘米X0.5厘米的小方块。
[0032]愈伤诱导:将壶瓶碎米荠接种在诱导分化培养基上，在温度25摄氏度、光照强度27摩尔/平方米/秒、光照17小时/天的环境下培养，4天后培养基出现愈伤组织，呈现淡绿色，15天后，80%以上叶柄外植体可见有绿色愈伤组织形成。
[0033]不定芽的诱导:形成的愈伤组织在相同的培养基及培养环境下继续生长35天，至愈伤组织上形成绿色芽点，继续培养17天，大量丛生芽生成。
[0034]生根培养:丛生芽长至2-3厘米时，将丛生芽进行切割后接种到生根培养基上，相同的培养环境下培养30天后根系形成，生根率为100%，成为再生苗。
[0035]移栽:选根系发达的再生苗，炼苗8天后洗净培养基，移栽到蛭石、泥炭土和珍珠岩比例1:1:1的混合基质中，覆盖塑料薄膜，弱光环境下生长12天后移至自然条件下生长即可。
[0036]经检测，上述移栽的壶瓶碎米荠再生苗成活率达90%以上。
[0037]以上是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本【技术领域】的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也视为本发明的保护范围。”替代亦可。
【权利要求】
1.一种壶瓶碎米荠的组织培养与快速繁殖方法，其特征在于，包括依次进行的如下步骤: 取材及处理:取壶瓶碎米荠的茎、幼叶或叶柄，清水冲洗后消毒处理； 愈伤诱导:将壶瓶碎米荠接种在诱导分化培养基上培养13~15天，壶瓶碎米荠外植体可见有绿色愈伤组织形成； 不定芽的诱导:形成的愈伤组织续生长25~35天，至愈伤组织上形成绿色芽点，继续培养12~17天，大量丛生芽生成； 生根培养:丛生芽长至2-3厘米时，将丛生芽进行切割后接种到生根培养基上，25~30天根系形成，成为再生苗； 移栽:选根系发达的再生苗，炼苗41天后洗净培养基，移栽到蛭石、泥炭土和珍珠岩的混合基质中，覆盖塑料薄膜，弱光环境下生长8~12天后移至自然条件下生长。
2.如权利要求1所述壶瓶碎米荠的组织培养与快速繁殖方法，其特征在于， 所述取材及处理步骤中消毒处理后将壶瓶碎米荠材料剪成0.5厘米X0.5厘米小方块。
3.如权利要求1所述壶瓶碎米荠的组织培养与快速繁殖方法，其特征在于: 所述消毒处理步骤具体为:在2飞摄氏度低温处理6~15小时后，用50%~90%酒精浸泡2^10秒，用无菌水冲洗数次，用0.05%~0.2%的氯化汞溶液浸泡消毒数分钟，再用无菌水冲洗数次。
4.如权利要求1所述壶瓶碎米荠的组织培养与快速繁殖方法，其特征在于: 所述诱导分化培养基为:MS+6-BA 2.0毫克/升+NAA 0.1，并添加30克/升蔗糖和7克/升琼脂，pH为5.8，在110-130摄氏度下湿热灭菌10-30分钟。
5.如权利要求1所述壶瓶碎米荠的组织培养与快速繁殖方法，其特征在于: 所述生根培养基为:1/2MS+NAA 0.3，并添加30克/升蔗糖和7克/升琼脂，pH为5.8，在110~130摄氏度下湿热灭菌10~30分钟。
6.如权利要求1所述壶瓶碎米荠的组织培养与快速繁殖方法，其特征在于: 所述移栽步骤中，蛭石、泥炭土和珍珠岩的比例为1:1:1。
7.如权利要求1所述壶瓶碎米荠的组织培养与快速繁殖方法，其特征在于: 所述取材及处理中，清水冲洗时间为广2小时。
8.如权利要求1所述壶瓶碎米荠的组织培养与快速繁殖方法，其特征在于: 所述愈伤诱导、不定芽的诱导以及生根培养步骤中，培养环境为温度20-25摄氏度、光照强度20-27摩尔/平方米/秒、光照10~17小时/天。
【文档编号】A01H4/00GK103651114SQ201210539976
【公开日】2014年3月26日 申请日期:2012年12月14日 优先权日:2012年12月14日
【发明者】白宏锋 申请人:湖北盛硒生物科技有限公司