一种高效生产红芽芋微球茎的方法
【专利摘要】本发明公开了一种高效生产红芽芋微球茎的方法，本发明中红芽芋试管微球茎是指在组织培养条件下，以经过茎尖分生组织培养脱去主要病毒的红芽芋脱毒苗为材料，通过控制培养基成分和培养条件及环境温度，诱导试管苗形成微球茎。该方法繁殖速度快，生产效率高，生产成本低，能周年工厂化生产；生产出来的试管微球茎具有无病毒、体积小、贮藏运输方便特点，是一项具有产业前景，能从根本上解决种芋退化的先进技术。
【专利说明】一种高效生产红芽芋微球茎的方法
【技术领域】
[0001]本发明属于植物组织培养和生物工程【技术领域】。尤其涉及一种高效生产红芽芋微球茎的方法。
【背景技术】
[0002]植物组织培养是生物工程技术中应用最广泛的技术之一，目前组织培养脱毒与快繁技术在马铃薯、甘薯、甘蔗、草莓等主要经济作物上已成功应用，试管微球茎的诱导在马铃薯、半夏等植物上是一项比较成熟的技术，但在红芽芋生产上试管微球茎的生产未见报道。
[0003]红芽芋(CZoca1Sia escalenta是芋艿的优良品种，即球茎的顶芽和侧芽苞叶为红色故名红芽芋，俗称“芋头”。属单子叶，天南星科，多年生宿根性草本植物，叶卵形，叶柄长而肥大，花黄绿色，地下有肉质球茎，食用部分富含淀粉、蛋白质和脂肪，可作蔬菜或主食。红芽芋因其肉质松、香，极易煮熟，风味独特而久负盛名，深受消费者的青睐。《本草衍义》记载芋头具有吞之开胃，通肠闭，产后煮食之破血，饮其汁，止血、渴；益胃、健脾、宽肠、通便；解毒、散结、化痰、消肿止痛；补中益肝肾、调节中气、添精益髓等功效。因此，红芽芋经济价值高，将其作为药食两用植物，具有良好的开发应用前景。红芽芋无性繁殖，传统种芋的生产，田间多代繁殖，病毒积累，植株种性退化严重。脱毒试管微球茎的应用是解决红芽芋种芋退化、提高红芽芋生产效益的有效技术。本发明同步法即是一种简化培养程序，省略了母苗生根壮苗的培养过程，减少试管苗培养周期，提高接种效率，节省人工，能源，是一种降低试管微球茎生产成本的有效途径。试管微球茎的应用取决于两个关键技术，一是试管微球茎的生产效率是否满足规模化生产要求，二是试管微球茎的生产成本不能过高，前者是前提，在此基础上解决田间配套技术问题。
[0004]
【发明内容】
本发明的目的是提供一种高效生产红芽芋微球茎的方法。
[0005]本发明通过以下技术方案实现:
一种高效生产红芽芋微球茎的方法，其特征在于，该方法以组织培养的脱毒红芽芋无病毒苗为材料，高蔗糖浓度、短日照和低温的培养条件是诱导试管薯的基本条件，采用MS培养基，在光照、变温条件诱导、培养下获得试管微球莖。
[0006]所述的培养基是MS培养基，不添加任何生长激素，蔗糖浓度为6-8%，光照强度为1500-2000LX，光周期每天8-10小时，根据红芽芋种芋形成对短日照和低温的敏感的特性，通过光照、变温调节，实现红芽芋的试管微球茎的生产。
[0007]所述的红芽芋试管微球茎的诱导培养采用同步法培养，将增殖培养基中具有3-5片叶的单苗或丛生苗直接接种于微球茎诱导培养基上，促使植株基部形成试管微球茎，而3片叶以下的小苗接种在增殖培养基继续增殖培养，周而复始，周年生产。目的是加快试管微球茎的繁殖，缩短生产周期，提高生产效率，降低生产成本。
[0008]本发明有益效果:本发明中红芽芋试管微球茎是指在组织培养条件下，以经过茎尖分生组织培养脱去主要病毒的红芽芋脱毒苗为材料，通过控制培养基成分和培养条件及环境温度，诱导形成试管微球茎。生产出来的试管微球茎具有无病毒、体积小、贮藏运输方便等优点，同时，通过同步法繁殖可大幅度降低生产成本，提高生产效率，具有工厂化周年生产等显著优点，是一项具有产业前景，从根本上解决种芋退化的先进技术。
【专利附图】
【附图说明】
[0009]图1为茎尖脱毒。
[0010]图2为试管微球莖诱导。
[0011]图3为红芽芋单苗诱导的微球茎。
[0012]图4为红芽芋试管微球茎。
【具体实施方式】
[0013]实施例1:
红芽芋试管微球茎培养基设计:MS培养基，添加蔗糖6% (60g/L)，琼脂粉0.3% (3 g/L)配制成固体培养基，调整pH为5.8，每培养瓶装30ml，在121 °C高温下20min左右灭菌备用；每瓶接种红芽芋脱毒试管苗6-8株(丛)，在光照强度为1500LX，控制光周期每天8-10小时，培养3个月，平均每株(丛)收获1.5粒，每100个培养瓶累计收获试管微球茎900-1200粒。
[0014]实施例2:
红芽芋试管微球茎培养基设计:MS培养基，添加蔗糖8% (80 g/L)，琼脂粉0.3% (3 g/L)配制成固体培养基，调整pH为5.8，每培养瓶装30 ml，在121°C高温下20min左右灭菌备用；每瓶接种红芽芋脱毒试管苗6-8株/丛，在光照强度为2000LX，控制光周期每天8-10小时左右，培养3个月，平均每株(丛)收获2粒，每100个培养瓶累计收获试管微球茎1200-1600 粒。
[0015]实施例3:
红芽芋试管微球茎培养基设计:MS培养基，添加蔗糖8% (80 g/L)，琼脂粉0.3% (3 g/L)配制成固体培养基，每培养瓶装30ml，调整pH为5.8，在121°C高温下20min左右灭菌备用；每瓶接种红芽芋脱毒试管苗6-8株/丛，在光照强度为2000LX的光照下培养30天，控制光周期每天8小时左右，然后转自然光培养，共培养3个月，平均每株/丛收获2.5粒，每100个培养瓶累计收获试管微球茎1500-2000粒。
[0016]实施例4:
红芽芋试管微球茎培养基设计:MS培养基，配置大量元素和微量元素，添加蔗糖8%(80g/L)，琼脂粉0.3% (3 g/L)配制成固体培养基，每培养瓶装30ml，调整pH为5.8，在121。。高温下23min灭菌备用；每瓶接种红芽芋脱毒试管苗6-8株，变温培养(白天25±3°C，夜间在18-20°C)，在光照强度为2000Lx的光照下培养30天，控制光周期每天8小时左右，然后转自然光培养，共培养3个月，平均每株/丛收获3粒，每100个培养瓶累计收获试管微球1800-2400 粒。
[0017]实施例5:红芽芋试管微球茎同步法设计:试管微球茎诱导中，从增殖培养瓶中选取3-5片叶的试管苗单株苗或丛生苗转接到诱导培养基中，共培养3个月可直接诱导成微球茎，少于3片叶的试管苗继续转接到增殖培养基中同步增殖繁殖，以此类推，可以实现分期分批不停的周年生产。总生产量=年生产批 次X每批生产量。
【权利要求】
1.一种高效生产红芽芋微球茎的方法，其特征在于，该方法以组织培养的脱毒红芽芋无病毒苗为材料，高蔗糖浓度、短日照和低温的培养条件是诱导试管薯的基本条件，采用MS培养基,在光照、变温条件诱导、培养下获得试管微球莖。
2.根据权利要求1所述的高效生产红芽芋微球茎的方法，其特征在于，所述的培养基是MS培养基,不含任何生长激素,其鹿糖浓度为6-8%,置于培养瓶中，光照强度为1500-2000LX，控制光周期每天8-10小时，根据红芽芋种芋形成对短日照和低温的敏感的特性，通过光照、温度调节，实现红芽芋的试管微球茎生产。
3.根据权利要求1所述的高效生产红芽芋微球茎的方法的方法，其特征在于，所述的红芽芋试管微球茎的生产采用球茎诱导培养与试管苗增殖同步法培养，即将增殖培养基中具有3-5片叶的单苗或丛生苗直接接种于微球茎诱导培养基上，促使植株基部形成试管微球茎，而3片叶以下的小苗继续增殖培养。
【文档编号】A01H4/00GK103535277SQ201310429988
【公开日】2014年1月29日 申请日期:2013年9月18日 优先权日:2013年9月18日
【发明者】江芹, 廖华俊, 董玲, 陈静娴, 汤婷婷, 宁志怨, 李卫文 申请人:安徽省农业科学院园艺研究所