一种烟草单株2片真叶快速成苗法

一种烟草单株2片真叶快速成苗法
【专利摘要】本发明公开了一种烟草单株2片真叶快速成苗法，通过对培养条件，以及营养基质和头孢噻肟钠的应用，可以快速有效的将1棵8片真叶烟株培育成4棵烟苗。并且在正常的培养条件下，在正常的时间内所获得的烟苗都能正常开花结实，为科学研究提供了快速、便捷、高效、可靠的成苗方法。该方法能使1棵烟株在短时间内获得遗传背景一致的4株烟苗，并在短时间内获得大量遗传背景一致的烟草种子，确保科学研究材料的重复性和可靠性。
【专利说明】一种烟草单株2片真叶快速成苗法
【技术领域】
[0001]本发明属于烟草的无性繁殖【技术领域】，具体涉及一种烟草单株2片真叶快速成苗法。
【背景技术】
[0002]在烟草种质创新的研究过程中，对于培育获得的单棵珍贵烟株或者新发现的烟草珍贵单株，需要培养4个月以上，才能产出烟草种子，在漫长的4个多月中，一旦该单株死亡，就会造成该种质的丢失，或者在种子收获、晾晒过程中不慎混杂，都会造成该种质的丢失。为了确保新培育和新发现的优良单株得到保存，保证后续试验的可重复性和可靠性，将单棵烟株快速繁殖成多株十分必要。同时多株烟株能收获大量的种子，为进一步的研究提供宝贵的遗传背景一致的研究材料。
[0003]为了达到上述目的，先前最好的方法是采用人工组织培养的办法进行无性繁殖，将单株繁殖成多株，但人工组织培养需要价格较高的培养基，操作环节复杂，并且需要周期性很长的培养过程，还需要投资高压灭菌装置、超净工作台、培养箱、激素等设备和化学试剂。另外，在组织培养过程中，首先要通过激素诱导生芽，然后再通过激素诱导生根，最终才能培养成烟苗，这中间需要很多人工营养物质和激素，很难保证所获得的烟苗是与母本烟株遗传背景一致的，没有发生突变，并且耗时很长。因此，建立一种快速、便捷、高效、可靠的烟草单株变多株的成苗方法，在 烟草科学研究中具有重要的意义。

【发明内容】
:
[0004]本发明的目的在于研究一种便捷、高效、可靠的烟草单株变多株的成苗方法，从而直接将I棵烟草植株的带茎2片真叶繁殖成I棵完整的烟株。为实现上述目的，本发明公开了一种烟草单株2片真叶快速成苗法，可以快速的将一株烟草繁殖成4株，从而弥补现有技术的不足。
[0005]本发明的方法，包括如下的步骤:
[0006]I)从8片真叶期的烟株的顶端，每2片真叶带茎切下，共切成4节；
[0007]2)将灭菌的营养基质装入灭菌的花盆中，并向灭菌的营养基质中烧入含有头孢噻月亏钠的水溶液；
[0008]其中营养基质包含有机质、砂和土壤，其质量比优选为1:1:3 ;所使用的有机质由麦秸、鸡粪和钙镁磷肥料组成，其一种具体组成如下:10千克腐烂的麦秸、干鸡粪0.4千克、钙镁磷肥0.02千克；其中水溶液中头孢噻肟钠的浓度为:100-300mg/L ；
[0009]3)将步骤I)制备的带茎烟节按照生长方向插植在步骤2)的花盆内；
[0010]4)将花盆置于框架之下，框架支撑，是为了提供空间。而后用透光塑
[0011]料膜将框架封好，目的是保证湿度。然后置于温室内培养。温室中温度
[0012]为25_28°C，光照为太阳光照自然光。
[0013]5)培养10天后在塑料膜上打洞，再培养5天将框架上的塑料膜去掉50%的面积，目的是让烟苗适应外部环境；
[0014]6)培养16天后将塑料膜全部揭去并浇水，然后将花盆置于温室内背阴处进行培养;
[0015]7)在培养18天时将烟苗置阳光充足的条件下培养，完成烟草单株2片真叶快速成苗。
[0016]营养基质中浇头孢噻肟钠浓度为200mg/L或250mg/L的处理，4节均能100%成活，这样I棵8片真叶烟株培育成了 4棵烟苗。
[0017]本发明公开了一种烟草单株2片真叶快速成苗法，通过对培养条件，以及营养基质和头孢噻肟钠的应用，可以快速有效的将I棵8片真叶烟株培育成4棵烟苗。并且在正常的培养条件下，在正常的时间内所获得的烟苗都能正常开花结实，为科学研究提供了快速、便捷、高效、可靠的成苗方法，能使I棵烟株在短时间内获得遗传背景一直的4株烟苗，并在短时间内获得大量遗传背景一致的种子，确保了试验研究材料的可靠性。
【具体实施方式】
[0018]本发明选择8片真叶期的烟株作为亲本，这样既保证了一次可以繁殖4棵遗传背景一致的烟株，而且，利用8片真叶期烟株处于生长期的特性，从而保证繁殖的成功率。另外，本发明的方法在繁殖过程中使用了含有头孢噻肟钠的水溶液，抑制由于伤口引起的细菌污染，大大增加了成苗的成功率，同时本发明快速、便捷、高效、可靠，不需要特殊的设备条件。
[0019]下面结合实例对本发明的方法进行详细的描述。利用本发明的方法对烤烟、晒烟、香料烟和雪茄烟4大类型的烟草植株进行繁殖，效果都好，具体方法与结果说明如下。
[0020]实施例1
[0021]I)从烟草烤烟品种NC89和K326烟株(NC89和K326品种由中国烟草种质资源库提供)的8片真叶期的烤烟烟株的顶端，每2片真叶带茎切下，共切成4节，进行繁殖；
[0022]2)然后将制备好的灭菌的营养基质装入灭菌的花盆中，其中营养基质包含100g有机质、100g河砂和300g地表土混合后，高压灭菌锅121°C灭菌1.5h制备的。所使用的有机质是将10千克腐烂的麦秸(将麦秸堆放后自然腐烂形成的)、0.4千克干鸡粪和0.02千克钙镁磷肥(P2O5含量18%，CaO含量45%，Si02含量20%，MgO含量12%，杂质与水分5%)混合的。然后向灭菌的营养基质中浇入含有250mg/L头孢噻肟钠的水溶液，浇透为止；
[0023]3)将步骤I)制备的植株按照生长方向插植在花盆内，将花盆置于金属框架之下，金属框架可采用:ZL201220273863.2中所记载的金属框架，而后用小塑料袋(专利号:ZL201320124664.X)将金属框架封好，然后置于温室内培养。温室中温度为25_28°C，光照为太阳光照自然光。
[0024]4)培养10天后在膜上打洞，从而让新培养的植株适应塑料膜外的环境；
[0025]5)再培养15天将金属框上的膜去掉50%的面积；从而将新培养的植株进一步适应塑料膜外的环境；
[0026]6) 16天将膜全部揭去并浇水，将花盆放在温室背阴处进行培养；
[0027]7)在培养18天后置阳光充足的条件下培养，在营养基质中浇头孢噻肟钠(浓度为200mg/L和250mg/L)的处理，4节均能100%成活，这样I株烟就繁殖成4株烟了。在正常烟草培养条件下，正常的培养时间内所获得的烟株都能正常开花结实。
[0028]表1:营养基质中浇不同浓度头孢噻肟钠的烤烟培养成活率(％)
[0029]
【权利要求】
1.一种烟草单株2片真叶快速成苗法，其特征在于，所述的方法包括如下的步骤:1)从8片真叶期的烟株的顶端，每2片真叶带茎切下，共切成4节；2)将灭菌的营养基质装入灭菌的花盆中，并向灭菌的营养基质中浇入含有头孢噻肟钠的水溶液；3)将步骤I)制备的带茎烟节按照生长方向插植在步骤2)的花盆内；4)将花盆置于框架之下，而后用透光塑料膜将框架封好，然后置于温室内培养，温室中温度为25-28°C，光照为自然光照；5)培养10天后在塑料膜上打洞，再培养5天将框架上的塑料膜去掉50%的面积；6)培养16天后将塑料膜全部揭去并浇水，然后将花盆置于温室内背阴处进行培养；7)在培养18天时将烟苗置阳光充足的条件下培养，完成烟草单株2片真叶快速成苗。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述的营养基质包含有机质、砂和土壤，其质量比优选为1:1:3。
3.如权利要求2所述的方法，其特征在于所述的有机质由麦秸、鸡粪和钙镁磷肥料组成，质量比为500:20:1。
4.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述的水溶液中头孢噻肟钠的浓度为:100-300mg/L.
5.如权利要求4所述的方法，其特征在于所述的水溶液中头孢噻肟钠的浓度为200mg/L 或 250mg/L.
【文档编号】A01H4/00GK103798146SQ201410074577
【公开日】2014年5月21日 申请日期:2014年3月2日 优先权日:2014年3月2日
【发明者】时焦, 张保全, 雒振宁, 王海波 申请人:中国农业科学院烟草研究所