一种稳定化乳酸菌产品的制备方法
【专利摘要】本发明公开了一种稳定化乳酸菌产品的制备方法，包括：步骤1)乳酸菌发酵液的制备，步骤2)包被材料的配制，步骤3)原位包被，步骤4)菌液分离，以及步骤5)包被处理。本发明将乳酸菌发酵后进行原位包被，提高乳酸菌的耐压和耐剪切力的能力，降低后处理对菌体的伤害，保持乳酸菌活性，采用先制备核心颗粒再将乳酸菌喷涂到核心颗粒上，制备乳酸菌颗粒，避免制粒过程中高温和压力对菌体活性的影响。采用复合材料对乳酸菌进行包被，可以保证菌体顺利通过动物的胃，在肠道酶的作用下崩解释放，发挥益生作用。
【专利说明】一种稳定化乳酸菌产品的制备方法
【技术领域】
[0001]本发明属于饲料添加剂领域，具体地，涉及一种稳定化乳酸菌产品的制备方法。
【背景技术】
[0002]抗生素作为饲料添加剂长期使用(尤其是滥用)导致的毒性残留、耐药性等问题引起人们广泛的关注，世界各国的科学家努力寻求和开发无毒副作用的新型饲料添加剂。益生菌是最先被提出的新型饲料添加剂。与添加抗生素相比，使用效果相同，有时甚至更好而且无任何毒、副作用、不在体内残留、不引起耐药性，因而很快便成为人们关注的焦点。
[0003]随着绿色养殖的大力发展，微生态制剂在饲料和畜禽养殖业中得到广泛应用，其中，乳酸菌类微生态制剂是饲用微生态制剂中应用最广泛的一种，但是绝大多数乳酸菌采用冷冻干燥的方式生产，稳定性差，一方面储存温度升高和接触空气，其活性会大大降低，另一方面在饲料加工中其无法耐受高温、压力和剪切力，致使活性大大降低甚至死亡，严重影响了乳酸菌活菌制剂的效价。
【发明内容】
[0004]针对现有技术的不足，本发明人进行了广泛深入的研究，最终完成本发明。
[0005]因此，本发明的目的是提供一种稳定化乳酸菌产品的制备方法，该方法解决了饲料用乳酸菌稳定性差的问题。
[0006]根据本发明的目的，提供了一种稳定化乳酸菌产品的制备方法，包括:
[0007]步骤I):乳酸菌发酵液的制备:
[0008]将乳酸菌进行活化、培养，得到乳酸菌发酵液；
[0009]步骤2):包被材料的配制:
[0010]2-1)原位包被材料的配制:配制1-2% (W/V)海藻酸钠水溶液和冰醋酸溶解的0.1-0.2% (W/V)壳聚糖溶液，备用；
[0011]2-2)后包被材料的配制:
[0012]将蓖麻油加0.2-0.5%乳化剂制成悬浊液，1-2%乙基纤维素和2_3%聚丙烯酸树脂II号加95%乙醇制成溶液，将这两个溶液混合均匀，备用；
[0013]步骤3):原位包被:
[0014]将步骤2-1)中制得的海藻酸钠水溶液加入到将步骤I)中制得的乳酸菌发酵液中，搅拌均匀，加入难溶性0.5-1%钙盐颗粒，搅拌均匀，形成悬浮液；按照3-2:1水油比将所述悬浮液加入到液体石蜡油中，搅拌乳化，形成油包水乳浊液；加入冰醋酸降低体系PH值，加入步骤2-1)中制得的壳聚糖溶液，继续反应，静置使微胶囊沉降；
[0015]步骤4):菌液分离:
[0016]对步骤3)中制得的微胶囊进行离心分离，得到浓缩的微囊乳酸菌；
[0017]步骤5):包被处理:[0018]5-1):核心材料的配制:将50-60重量份食用淀粉、20-30重量份微晶纤维素、5-10重量份明胶混合均匀，加水30-40重量份搅拌均匀，得到核心材料；
[0019]5-2):菌液的制备:将步骤4)中制得的浓缩的微囊乳酸菌用0.8%生理盐水进行稀释，得到浓度为101(lCfU/ml以上的微囊乳酸菌菌液；
[0020]5-3):核心制粒:利用挤压制粒，将核心材料制成粒度20-40目的核心颗粒；
[0021]5-4):乳酸菌喷涂和包被:将步骤5-3)的核心颗粒投入包衣机中，利用热空气进行干燥至水分含量为5%以下，将步骤5-2)的菌液利用包衣机的喷头均匀喷涂到核心颗粒上，使乳酸菌被吸附到核心颗粒中，然后将后包被材料均匀喷涂到含有乳酸菌的核心颗粒上，干燥至含水量为5%以下。
[0022]优选地，在所述稳定化乳酸菌产品的制备方法中，步骤I):乳酸菌发酵液的制备进一步包括: [0023]1-1)乳酸菌一级种子液制备
[0024]将保存的乳酸菌菌种划线接种到斜面培养基，37°C培养活化12-24h、将活化好的菌种接种到液体培养基中，150-180r/min，37°C培养10_12h，得到乳酸菌一级种子液。
[0025]1-2)乳酸菌二级种子液制备
[0026]将一级种子液接种到液体培养基中，37°C、70r/min，罐压0.01Mpa,培养8h，得到乳酸菌二级种子液。
[0027]1-3)乳酸菌发酵生产
[0028]将二级种子液按接种到发酵培养基中，37°C、70r/min，罐压0.01Mpa，用氨水调节pH保持在5.8，培养16h，得到乳酸菌发酵液。
[0029]其中，液体培养基配方为
[0030]
【权利要求】
1.一种稳定化乳酸菌产品的制备方法,包括: 步骤I):乳酸菌发酵液的制备: 将乳酸菌进行活化、培养，得到乳酸菌发酵液； 步骤2):包被材料的配制: .2-1)原位包被材料的配制:配制1-2% (W/V)海藻酸钠水溶液和冰醋酸溶解的0.l-ο.2% (W/V)壳聚糖溶液，备用； .2-2)后包被材料的配制: 将蓖麻油加0.2-0.5%乳化剂制成悬浊液，1-2%乙基纤维素和2-3%聚丙烯酸树脂II号加95%乙醇制成溶液，将这两个溶液混合均匀，备用； 步骤3):原位包被: 将步骤2-1)中制得的海藻酸钠水溶液加入到将步骤I)中制得的乳酸菌发酵液中，搅拌均匀，加入难溶性0.5-1%钙盐颗粒，搅拌均匀，形成悬浮液；按照3-2:1水油比将所述悬浮液加入到液体石蜡油中，搅拌乳化，形成油包水乳浊液；加入冰醋酸降低体系pH值，加入步骤2-1)中制得的壳聚糖溶液，继续反应，静置使微胶囊沉降； 步骤4):菌液分离: 对步骤3)中制得的微胶囊进行离心分离，得到浓缩的微囊乳酸菌； 步骤5):包被处理: .5-1):核心材料的配制:将50-60重量份食用淀粉、20-30重量份微晶纤维素、5_10重量份明胶混合均匀，加水30-40重量份搅拌均匀，得到核心材料； .5-2):菌液的制备:将步骤4)中制得的浓缩的微囊乳酸菌用0.8%生理盐水进行稀释，得到浓度为101(lCfu/ml以上的微囊乳酸菌菌液； . 5-3):核心制粒:利用挤压制粒，将核心材料制成粒度20-40目的核心颗粒； .5-4):乳酸菌喷涂和包被:将步骤5-3)的核心颗粒投入包衣机中，利用热空气进行干燥至水分含量为5%以下，将步骤5-2)的菌液利用包衣机的喷头均匀喷涂到核心颗粒上，使乳酸菌被吸附到核心颗粒中，然后将后包被材料均匀喷涂到含有乳酸菌的核心颗粒上，干燥至含水量为5%以下。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤I)中乳酸菌发酵液的制备进一步包括: .1-1)乳酸菌一级种子液制备 将保存的乳酸菌菌种划线接种到斜面培养基，37°c培养活化12-24h、将活化好的菌种接种到液体培养基中，150-180r/min，37°C培养10_12h，得到乳酸菌一级种子液。 .1-2)乳酸菌二级种子液制备 将一级种子液接种到液体培养基中，37°C、70r/min，罐压0.01Mpa，培养8h，得到乳酸菌二级种子液。 .1-3)乳酸菌发酵生产 将二级种子液按接种到发酵培养基中，37°C、70r/min，罐压0.01Mpa，用氨水调节pH保持在5.8，培养16h，得到乳酸菌发酵液。 其中，液体培养基配方为
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于， 所述液体培养基配方为:
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤2)中包被材料的配制过程为: 2-1)原位包被材料的配制:配制1.5% (W/V)海藻酸钠水溶液和冰醋酸溶解的0.1%(W/V)壳聚糖溶液，备用； 2-2)后包被材料的配制:将蓖麻油加0.5%吐温80制成悬浊液，乙基纤维素和聚丙烯酸树脂II号加95 %乙醇制成溶液，将这两个溶液混合均匀，备用，制成的混合溶液中含有蓖麻油1% (W/V)，乙基纤维素1% (W/V)，聚丙烯酸树酯2% (W/V)。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤3)的原位包被的过程为: 将步骤2-1)中制得的海藻酸钠水溶液加入到步骤1-3)中制得的乳酸菌发酵液中，搅拌均匀，加入难溶性0.5%钙盐颗粒，搅拌均匀，形成悬浮液；按照3:1水油比将所述悬浮液加入到含1% Span80液体石腊油中，搅拌乳化,400r/min, 15min,形成油包水乳池液；加入0.002%冰醋酸降低体系pH值，加入步骤2-1)中制得的壳聚糖溶液，继续反应，静置使微胶囊沉降。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤4)中的菌液分离过程为: 对步骤3)中制得的微胶囊乳酸菌进行离心分离，离心机转速5000r/min，得到浓缩的微囊乳酸菌。
7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤5)中的包被处理过程为: 5-1):核心材料的配制:将60重量份食用淀粉、30重量份微晶纤维素、10重量份明胶混合均匀，加水40重量份搅拌均匀，得到核心材料； 5-2):菌液的制备:将步骤4)中制得的浓缩微囊乳酸菌0.8%用生理盐水进行稀释，得到浓度为101(lCfu/ml以上的微囊乳酸菌菌液；5-3):核心制粒:利用挤压制粒，将核心材料制成粒度20-40目的核心颗粒； 5-4):乳酸菌喷涂和包被:将步骤5-3)的核心颗粒投入包衣机中，利用90°C热空气进行干燥至水分含量为5%以下，降低空气温度至70°C，将步骤5-2)的菌液利用包衣机的喷头均匀喷涂到核心颗粒上，喷涂速度150ml/min，使乳酸菌被吸附到核心颗粒中，然后将后包被材料均匀喷涂到含有乳酸菌的核 心颗粒上，喷涂速度100ml/min，70°C干燥至含水量为5%以下。
【文档编号】A23K1/16GK104000025SQ201410258369
【公开日】2014年8月27日 申请日期:2014年6月11日 优先权日:2014年6月11日
【发明者】崔东良, 栾新 申请人:北京昕地美饲料科技有限公司