一种阴香的快速繁殖方法
【专利摘要】本发明涉及一种阴香的快速繁殖方法，包括外植体的消毒、腋芽的诱导、丛生芽的增殖、生根诱导和炼苗移栽。本发明的阴香组培方法操作简便，生长周期短，增殖系数及成活率高，遗传性状稳定，可以为阴香的大规模种植提供基础。
【专利说明】一种阴香的快速繁殖方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及阴香组织培养的快繁方法，属于植物【技术领域】。
【背景技术】
[0002]WW,Cinnamomum樟科,为常绿高大乔木。树皮灰褐至黑褐色,有近似肉桂的气味。幼嫩枝梢的气味近似檀香。产亚洲东南部，中国南部有分布。分布于广东、广西、江西、福建、浙江、湖北和贵州。树皮含挥发油(为桂皮醛、丁香油酚、黄樟醚等)。树皮含挥发油0.4%-0.6%，油中主成分为桂皮醛(77%)、丁香酚和黄樟油脑，可入药，温中，散寒，祛风除湿，解毒消肿。治食少，腹胀，泄泻，脘腹疼痛，风湿，疮肿，跌打扭伤。阴香目前主要的繁殖方法为种子繁殖和扦插繁殖，但种子繁殖败育率较高，组织培养用于阴香的快速繁殖是目前亟待解决的问题。
【发明内容】
[0003]本发明所要解决的技术问题是提供一种阴香的快速繁殖方法，由该方法所制备的阴香组培方法简便，生长周期短，增殖系数及成活率高，遗传性状稳定，可以为阴香的大规模种植提供基础。
[0004]本发明所要解决的技术问题是通过以下方案来实现的:
取阴香带芽的茎段，先在漂白粉中浸泡3min，毛刷去除表面污溃，流水冲洗45min，超净工作台上75%酒精处理30s，氯化汞处理9min，无菌水冲洗5遍，消毒过的阴香带芽茎段接入培养基配方为WPM+NAA0.lmg/L+6-BA0.3mg/l+ 土霉素12mg/l培养基中进行芽诱导，附加蔗糖30g/L，琼脂6g/L，PH5.8，光照20001x，诱导出来的芽放入增殖培养基WPM+2，4-D0.2mg/L+KT0.2mg/L+lg/L 活性炭，附加蔗糖 30g/L，琼脂 6.5g/L，PH5.8，光照 20001x，增殖培养出来的丛生芽放入生根培养基White+NAA0.2mg/L+IBA0.3mg/L+马铃薯汁150g/L，将生根试管苗的玻璃瓶置于培养室自然光下照射7d,覆盖一层纱布,然后小心取出试管苗，洗净根部培养基，百菌清浸根，栽植于稻壳:田园土 =1:1的基质中，用1000倍磷酸二氢钾叶面喷施，每隔10天喷一次，35天后统计成活率。
[0005]采用本发明制备的阴香成活率为94%，周期短，产量大，能耗少，利于大规模种植。
[0006]下面将结合【具体实施方式】对本发明作进一步阐述，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。
[0007]实施例1
取阴香带芽的茎段，先在漂白粉中浸泡3min，毛刷去除表面污溃，流水冲洗45min，超净工作台上75%酒精处理30s，氯化汞处理9min，无菌水冲洗5遍，消毒过的阴香带芽茎段接入培养基配方为WPM+NAA0.lmg/L+6-BA0.3mg/l+ 土霉素12mg/l培养基中进行芽诱导，附加蔗糖30g/L，琼脂6g/L，PH5.8，光照20001x，诱导出来的芽放入增殖培养基WPM+2，4-D0.lmg/L+KT0.lmg/L+lg/L 活性炭，附加蔗糖 30g/L，琼脂 6.5g/L，PH5.8，光照 20001x，增殖培养出来的丛生芽放入生根培养基White+NAA0.lmg/L+IBA0.2mg/L+马铃薯汁150g/L，生根后的阴香试管苗进行炼苗培养，阴香成活率为91%。
[0008]实施例2
取阴香带芽的茎段，先在漂白粉中浸泡3min，毛刷去除表面污溃，流水冲洗45min，超净工作台上75%酒精处理30s，氯化汞处理9min，无菌水冲洗5遍，消毒过的阴香带芽茎段接入培养基配方为WPM+NAA0.lmg/L+6-BA0.3mg/l+ 土霉素12mg/l培养基中进行芽诱导，附加蔗糖30g/L，琼脂6g/L，PH5.8，光照20001x，诱导出来的芽放入增殖培养基WPM+2，4-D0.2mg/L+KT0.3mg/L+lg/L 活性炭，附加蔗糖 30g/L，琼脂 6.5g/L，PH5.8，光照 20001x，增殖培养出来的丛生芽放入生根培养基White+NAA0.2mg/L+IBA0.3mg/L+马铃薯汁150g/L，生根后的阴香试管苗进行炼苗培养，阴香成活率为91%。
[0009]实施例3
取阴香带芽的茎段，先在漂白粉中浸泡3min，毛刷去除表面污溃，流水冲洗45min，超净工作台上75%酒精处理30s，氯化汞处理9min，无菌水冲洗5遍，消毒过的阴香带芽茎段接入培养基配方为WPM+NAA0.lmg/L+6-BA0.3mg/l+ 土霉素12mg/l培养基中进行芽诱导，附加蔗糖30g/L，琼脂6g/L，PH5.8，光照20001x，诱导出来的芽放入增殖培养基WPM+2，4-D0.lmg/L+KT0.2mg/L+lg/L 活性炭，附加蔗糖 30g/L，琼脂 6.5g/L，PH5.8，光照 20001x，增殖培养出来的丛生芽放入生根培养基White+NAA0.lmg/L+IBA0.2mg/L+马铃薯汁150g/L，生根后的阴香试管苗进行炼苗培养，阴香成活率为92%。
[0010]实施例4
取阴香带芽的茎段，先在漂白粉中浸泡3min，毛刷去除表面污溃，流水冲洗45min，超净工作台上75%酒精处理30s，氯化汞处理9min，无菌水冲洗5遍，消毒过的阴香带芽茎段接入培养基配方为WPM+NAA0.lmg/L+6-BA0.3mg/l+土霉素12mg/l培养基中进行芽诱导，附加蔗糖30g/L，琼脂6g/L，PH5.8，光照20001x，诱导出来的芽放入增殖培养基WPM+2，4-D0.2mg/L+KT0.3mg/L+lg/L 活性炭，附加蔗糖 30g/L，琼脂 6.5g/L，PH5.8，光照 20001x，增殖培养出来的丛生芽放入生根培养基White+NAA0.2mg/L+IBA0.2mg/L+马铃薯汁150g/L，生根后的阴香试管苗进行炼苗培养，阴香成活率为93%。
【权利要求】
1.一种阴香的快速繁殖方法，包括外植体的消毒、腋芽的诱导、丛生芽的增殖、生根诱导和炼苗移栽，其主要步骤如下: (1)取阴香带芽的茎段，按照常规的消毒方法对其进行灭菌处理； (2)将步骤(I)消毒过的阴香带芽茎段接入培养基配方为WPM+NAA0.1mg/L+6-BA0.3mg/l+ 土霉素12mg/l培养基中进行芽诱导，附加蔗糖30g/L，琼脂6g/L，PH5.8，光照 20001x ； (3)取步骤(2)诱导出来的芽放入增殖培养基WPM+2，4-D0.1-0.2mg/L+KT0.1-0.3mg/L+lg/L活性炭，附加蔗糖30g/L,琼脂6.5g/L，PH5.8，光照20001x ； (4)取步骤(3)增殖培养出来的丛生芽放入生根培养基White+NAA0.1-0.2mg/L+IBA0.2-0.3mg/L+ 马铃薯汁 150g/L ； (5)取步骤(4)生根后的阴香试管苗进行炼苗培养。
2.按照权利要求1所述的一种阴香的快速繁殖方法，其特征在于:步骤(I)中所述阴香无菌芽的获得为，取阴香带芽的茎段，先在漂白粉中浸泡3min，毛刷去除表面污溃，流水冲洗45min,超净工作台上75%酒精处理30s,氯化萊处理9min,无菌水冲洗5遍。
3.按照权利要求1所述的一种阴香的快速繁殖方法，其特征在于:步骤(2)中所述阴香芽诱导培养基中加入土霉素12mg/l，可以防止培养过程中内生菌的生成。
4.按照权利要求1所述的一种阴香的快速繁殖方法，其特征在于:步骤(3)增殖培养基中附加了 lg/L活性炭，能克服幼苗在增殖培养过程中褐化现象的出现。
5.按照权利要求1所述的一种阴香的快速繁殖方法，其特征在于:步骤(4)中的生根培养基中加入马铃薯汁150g/L，利于阴香的生根诱导。
6.按照权利要求1所述的一种阴香的快速繁殖方法，其特征在于:步骤(4)中的生根培养条件为蔗糖20g/L，琼脂5g/L，PH5.9，光照40001x，湿度70-80%，光照14h。
7.按照权利要求1所述的一种阴香的快速繁殖方法，其特征在于:步骤(5)中阴香的炼苗培养方法为将生根试管苗的玻璃瓶置于培养室自然光下照射7d，覆盖一层纱布，然后小心取出试管苗，洗净根部培养基，百菌清浸根，栽植于稻壳:田园土 =1:1的基质中，用I000倍磷酸二氢钾叶面喷施，每隔10天喷一次，35天后统计成活率。
【文档编号】A01H4/00GK104170734SQ201410445593
【公开日】2014年12月3日 申请日期:2014年9月4日 优先权日:2014年9月4日
【发明者】张金芳, 杨存 申请人:南京标科生物科技有限公司