技术领域
本发明涉及一种LED光源下龙牙百合鳞片繁育种球的方法，属植物无性繁殖技术领域。
背景技术：
龙牙百合(Lilinm brownie var viridulum Baker)是三大著名食用之一，我国名、特、优蔬菜，也是集食药兼用食品，深受国内外市场欢迎。江西万载县主要特产产业之一，栽培历史悠久。种球是龙牙百合主要栽培种苗，目前龙牙百合种球主要通过大田鳞片扦插、组培等技术繁育。大田鳞片扦插繁殖效率低、管理粗放、多发病害等缺点。组培技术要求较高、投入大、多使用化学药剂等缺点。
为生产提供一种LED光源下龙牙百合鳞片繁育种球的方法。有关LED光源主要集中植物工厂化生产茎叶蔬菜、果用蔬菜等方面。公开号CN103947525公开了一种利用LED光源进行生菜室内生产的方法，该专利主要是营养液水培环境下提供混合LED光源栽培生菜；公开号CN105284446公开了一种利用LED植物生长光源促进茄果类蔬菜育苗的方法，该专利主要自制300nm~470nm波长LED光源下茄果类蔬菜育苗。公开号CN105875228公开了一种用LED灯对黄瓜育苗的补光方法，该专利主要采用红蓝光组合对黄瓜幼苗进行补光；公开号CN105210877公开了一种龙牙百合快速繁殖方法，该专利主要调节组培培养基条件提高诱导率 并缩短再生周期；公开号CN105706708公开了一种利用龙牙百合鳞片繁育龙牙百合种球的方法，该专利采用大棚避雨、覆膜、夏季大棚盖遮阳网降温栽培繁育方法。脱毒龙牙百合组培技术江西省科学院生物资源研究所已解决，见江洪如等发表论文《龙牙百合茎尖脱毒快繁及种球培育技术》和王碧琴等发表论文《外源物质对龙牙百合试管苗生物量的影响研究》。
技术实现要素：
本发明的目的是，针对龙牙百合鳞片繁殖种球效率低、鳞片易遭病害、安全性低、不便植物工厂化生产种球等问题，提供一种LED光源下龙牙百合鳞片繁育种球的方法。
实现本发明的技术方案是，一种LED光源下龙牙百合鳞片繁育种球的方法，包括以下步骤：
（1）选择龙牙百合种球并低温处理：
选择以脱毒龙牙百合组培苗为种球大田已种植3年生无腐烂、无伤口、新鲜、商品化龙牙百合种球。种球用纸包裹，再包裹一层塑料膜，放入5℃低温处理至少7天。
（2）鳞片消毒：
洗净鳞片置于50℃培育箱中处理10分钟后, 用无菌水冲洗5次，在70%酒精浸泡15秒，无菌水冲4次；在超净工作台下迅速平放于已高温高压消毒培养皿底面无纺布上，立即盖上培养皿盖。
（3）选择三种不同波长的LED光源进行光照：
选用660nm红光、450nm蓝光、300nm紫外光等三种单一LED光源；光照周期为12h∙d-1，光强80μmol∙m-2∙s-1。所述LED光源灯固定于距离培养皿50公分上部架子上。
（4）培养皿底面衬有无纺布的玻璃透明带盖培养皿高温高压消毒：
培养皿底面衬有无纺布的玻璃透明带盖培养皿在高温高压灭菌锅121℃消毒30分钟。
（5）消毒控温控湿生长环境：
生长环境温度在23℃~28℃，相对湿度70％。每隔7天培养环境用臭氧消毒1次。
（6）在超净工作台下用移液器吸取无菌水定量湿润玻璃透明带盖培养皿底面无纺布
本发明的有益效果是，本发明在LED光源下对龙牙百合进行鳞片繁育种球，该方法繁殖系数高、消毒控制生长环境、可植物工厂化繁育种球。解决了龙牙百合采用常规方法鳞片繁殖种球效率低、鳞片易遭病害、安全性低的问题。
具体实施方式
本实施例一种LED光源下龙牙百合鳞片繁育种球的方法，包括如下步骤：
(1)龙牙百合种球选取和低温处理
收获以脱毒龙牙百合组培苗为种球大田栽培3年生商品化龙牙百合种球，选择无病害、无伤口、鳞片长而肥大、质量达35 g~50 g等龙牙百合鲜种球，将带少量泥土的鲜种球曝晒2天，种球用纸包裹后，再包裹一层塑料膜，低温处理。
(2)鳞片消毒和放置
将低温处理一定时间的龙牙百合鲜种球，轻轻剥下鳞片，洗净鳞片于50℃培育箱中处理10分钟后, 用无菌水冲洗5次，在70%酒精浸泡15秒，无菌水冲4次。在超净工作台下迅速平放置于已高温高压消毒培养皿底面无纺布上。培养皿放置于支架下面为反光镜面上。启动环境控制条件开关，并开启LED光源。
(3)LED光源灯
选用660nm红光、450nm蓝光、300nm紫外光等三种单一LED光源独立照射，每天连续光照12h∙d-1即从06:00~18:00。LED光源灯固定于距离培养皿50公分上部架子上。
(4)培养皿底面衬有无纺布的玻璃透明带盖培养皿高温高压消毒
培养皿底面衬有无纺布的玻璃透明带盖培养皿高温高压灭菌锅121℃消毒30分钟。无纺布大小与培养皿底面直径大小一致。且消毒前放置。
(5)消毒控温控湿生长环境
生长环境温度23℃~28℃，相对湿度70％。每隔7天生长环境用臭氧消毒1次。温度有空调调节，湿度由加湿器控制，并放置干湿温度计，臭氧由臭氧发生器提供。
(6)用移液器吸取无菌水定量湿润带盖培养皿底面无纺布
在超净工作台下每隔5天用移液器吸取定量无菌水润湿底面无纺布。
60天后三种单一LED光源下龙牙百合鳞片繁育种球效果表1：
从结果看，660nm红光LED光源照射种球较大较好，适合较快繁育种球。450nm蓝光LED光源照射繁殖系数较高，繁育较大种球需要更长时间。