本发明涉及淡水白鲨学名苏氏圆腹芒（pangasius.sutchifowler）人工繁殖方法，属水产育种技术领域。
背景技术：
淡水白鲨也称虎鲨、巴丁鱼，属鲶形目，鲶科、芒属，主要分布于东南亚一带，肉质细嫩，味道鲜美，无肌间刺，是淡水中一种名贵热带经济鱼类，卵粘性。
在内陆静水池塘的环境下繁殖孵化，容易出现以下几个问题：1）由于淡水白鲨受精卵自身沉性及黏性原因，将会沉入水底，相互黏在一起，很快将缺氧死亡；2）孵化用水杂质多，或者水浑浊，水中的杂质极容易黏在黏性卵卵膜上，导致受精卵缺氧死亡；3）每组亲鱼的受精卵放置在一起，苗种遗传背景不清楚，无法控制近亲交配，出现近交产生的后代种质退化，今后也无法进行家系选育；4）杂食性，人工繁殖出苗后，如果是亲鱼和鱼苗混在一起，就会出现亲鱼吞吃小苗的现象。
未见有关淡水白鲨人工繁殖方法等详细相关技术方面的报道。
技术实现要素：
针对现有技术的不足，本发明提供淡水白鲨人工繁殖方法；本发明的人工繁殖方法提高了淡水白鲨的孵化率，有效控制近亲交配，避免近交产生的后代种质退化，便于今后进行家系选育，并能避免亲鱼吞吃小鱼。
本发明是通过如下技术方案实现的：淡水白鲨人工繁殖方法，包括如下步骤：
（1）亲鱼选择：挑选出个体健壮，无病害、无伤残、体表无寄生生物、营养状况良好，以4-5龄，规格为3-3.5千克的雌性淡水白鲨作为母本，以4龄，规格为2.5-3.5千克左右的雄性淡水白鲨作为父本；
（2）亲鱼培育：将亲鱼按雌雄1：1的比例，分别放入培育池中培育，培育密度：按鱼体总重量300-350千克/亩放养培育，培育期间雌雄鱼水温控制在28-30℃，保持溶解氧在4mg/l，培育池水深保持1.4-1.6m；白天光照控制在100-200lux；亲本培育期投喂蛋白质含量为35%配合饵料，饵料颗粒度为1-2.5mm，每日上下午各投喂一次，日投喂量为鱼体重的2-3%，保持统一饵料口感；
（3）人工授精雌鱼挑选：腹部膨大、下坠、手感松软有弹性、生殖突前段饱满、使用掏卵器掏卵，取少量卵子用放大镜观察其成熟情况，卵径达0.6mm，卵粒发育在4期末再进行催产；挑选雄鱼：通过腹部挤压收集精巢内的精液，并用显微镜检查精子活力；
（4）人工催产：取步骤（3）挑选出的雄性亲鱼从上腹部轻轻按压挤卵于消毒后干燥的盆内；
取步骤（3）挑选出的雄性亲鱼从上腹部轻轻按压挤精，将精液计入盛有卵粒的装置中，雌雄比例为1：1，挤精过程不能有水渗入；
（5）人工授精：将盛有精液和卵子的装置立即轻轻晃动20-30秒，让精液和卵粒之间流动，精液和卵粒充分混合，完成人工授精，获得受精卵；人工授精过程中不能混入清水，避免卵胚孔遇水封闭，影响受精率；
（6）受精卵孵化：取60-80目的无结网布展平，将受精卵平均分散黏在无结网布上，使受精卵在无结网布的黏结密度为5千-7千枚受精卵/平方米，静置10-15min，受精卵粘附在网布上，再将粘附有受精卵的网布树立平展置于孵化池中，于温度28℃-30℃、溶解氧为5mg/l以上的孵化水中进行孵化50-60小时。
本发明的配合饲料从市场购自海大饲料有限公司，蛋白含量35%。
本发明优选的，所述的培育池面积100-500㎡，培育水深保持在1.4-1.6m，培育时每500㎡配置一台1.5kw的增氧机。
本发明亲鱼培育过程中，保持统一的口感，不要投喂其他饲料，避免因口感不同，亲鱼拒食。
本发明优选的，步骤4）中，亲鱼挤卵前采用鲤脑垂体与促黄体释放激素类似物（lrh-a）混合使用，雌鱼亲鱼的用量为4枚鲤脑垂体和5-6ug/千克黄体释放激素类似物（lrh-a）/千克，雄亲鱼的用量为雌亲鱼的一半；进一步优选的，具体催产方法如下：将步骤3）挑选的亲鱼，按≤1尾/5㎡放养密度移入催产池中进行催产，催产水温为28-30℃，采用胸腔注射催产素，雌鱼分二次注射，第一针剂量为总剂量的30%，隔6-8h后注射第二针，同时对雄鱼注射，持续冲水刺激，效应时间为8-12h。
本发明优选的，步骤4）中，每条雄雌亲鱼挤一次精卵完成后，立刻将亲鱼放回养殖池，溶解氧保持在4mg/l左右。
本发明优选的，步骤4）中，每次挤卵在20min内完成。
本发明优选的，步骤4）中，每条雄性亲鱼挤精次数1次，挤精时间控制在10min内。
本发明的人工催产，每次挤卵必须从上腹部按压挤卵，不可用力过大，否则雌性亲鱼内脏极易受伤死亡，每次挤卵应在20min内完成，将卵挤入消毒干燥的盆中，再挤精液，挤精必须从上腹部位置按压，将精液挤入盛有卵粒的盆中，挤精液切不可用力过大，否则雄性亲鱼极易劳累死亡。
本发明的人工授精，目测是无法发现受精卵是否全部完成人工授精的，人工授精需要有实践经验的熟练技术人员完成。
发明优选的，所述的无结网布为60-80目的涤纶无结网布。
本发明优选的，受精卵在无结网布上的黏结密度为6-7千枚受精卵/每平方米。
本发明优选的，受精卵平均分散黏在无结网布上按如下方法进行，使用狼毫毛笔蘸上受精卵，将黏在毛笔上的受精卵轻轻均匀甩在网布上，蘸受精卵的过程时间控制在2min内。以避免受精卵黏毛笔上。
本发明优选的，孵化水的升温速率小于1.5℃/h，孵化用水盐度小于0.1%，ph值控制在6.82-8.2之间，电解率μs值在400以下，孵化期间受精卵光照度控制在150lux以下。
本发明优选的，不同亲鱼组的黏有受精卵的网布分别放置于不同的有标记的网箱内。
本发明优选的，孵化池面积5-25㎡，水深1-1.2m。
本发明受精卵孵化过程中保持水质硬度、ph、水温稳定，避免换水。
本发明的有益效果如下：
（1）淡水白鲨在静水小池塘养殖的条件下，采用人工孵化方法能使其完成催产、受精、出苗；
（2）本发明的孵化方法能挑选出发育性成熟的可以产卵的雌性亲鱼，能挑选出精液成熟的雄性亲鱼，避免了错误的无效的亲鱼选择；控制黏性卵在网布上的密度，避免黏性卵相互黏在一起，而增加充气沙头，充气增氧可杜绝缺氧造成的受精卵缺氧死亡；孵化盐度、电解率控制是对无鳞鱼黏性受精卵孵化重要的技术指标，控制水温及升温速率，能控制受精卵孵化进度，保证了卵黄囊吸收速度，保证了受精卵出苗的成活率；
（3）本发明的孵化方法将亲鱼和受精卵分开，当受精卵破膜出苗后，杜绝大鱼吃小苗的情况出现，保证了苗种成活率；
（4）本发明的孵化方法将每组亲鱼的受精卵放置在不同标记的网箱内，苗种遗传背景清楚，可有效控制近亲交配，杜绝近交产生的后代种质退化问题，今后可以进行家系选育。
具体实施方式
下面将结合实例对本发明的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本发明，而不应视为限定本发明的范围。
本发明是通过如下技术方案实现的：淡水白鲨人工繁殖方法，包括如下步骤：
（1）亲鱼选择：挑选出个体健壮，无病害、无伤残、体表无寄生生物、营养状况良好，以4-5龄，规格为3.5千克的雌性淡水白鲨作为母本，以4龄，规格为3千克左右的雄性淡水白鲨作为父本；
（2）亲鱼培育：将亲鱼按雌雄1：1的比例，分别放入培育池中培育，培育密度：按鱼体总重量300-350千克/亩放养培育，培育期间雌雄鱼水温控制在28-30℃，保持溶解氧在4mg/l，培育池水深保持1.4-1.6米；白天光照控制在100-200lux；亲本培育期投喂蛋白质含量为35%配合饵料，饵料颗粒度为1-2.5mm，每日上下午各投喂一次，日投喂量为鱼体重的2-3%，保持统一饵料口感；
（3）人工授精雌鱼挑选：腹部膨大、下坠、手感松软有弹性、生殖突前段饱满、使用掏卵器掏卵，取少量卵子用放大镜观察其成熟情况，卵径达0.6mm，卵粒发育在4期末再进行催产；挑选雄鱼：通过腹部挤压收集精巢内的精液，并用显微镜检查精子活力；
（4）人工催产：取步骤（3）挑选出的雄性亲鱼从上腹部轻轻按压挤卵于消毒后干燥的盆内；
取步骤（3）挑选出的雄性亲鱼从上腹部轻轻按压挤精，将精液计入盛有卵粒的装置中，雌雄比例为1：1，挤精过程不能有水渗入；
（5）人工授精：将盛有精液和卵子的装置立即轻轻晃动20-30秒，让精液和卵粒之间流动，精液和卵粒充分混合，完成人工授精，获得受精卵；人工授精过程中不能混入清水，避免卵胚孔遇水封闭，影响受精率；
（6）受精卵孵化：取60-80目的无结网布展平，将受精卵平均分散黏在无结网布上，使受精卵在无结网布的黏结密度为5-7千枚受精卵/㎡，静置10-15min，受精卵粘附在网布上，再将粘附有受精卵的网布树立平展置于孵化池中，于温度28-30℃、溶解氧为5mg/l以上的孵化水中进行孵化55h。
本发明的配合饲料从市场购自海大饲料有限公司，蛋白含量35%。
本发明所述的培育池面积100-500㎡，培育水深保持在1.4-1.6m，培育时每500㎡配置一台1.5kw的增氧机。
本发明亲鱼培育过程中，保持统一的口感，不要投喂其他饲料，避免因口感不同，亲鱼拒食。
步骤4）中，亲鱼挤卵前采用鲤脑垂体与促黄体释放激素类似物（lrh-a）混合使用，雌鱼亲鱼的用量为4枚鲤脑垂体和5-6ug/千克黄体释放激素类似物（lrh-a）/千克，雄亲鱼的用量为雌亲鱼的一半；
具体催产方法如下：将步骤3）挑选的亲鱼，按≤1尾/5㎡放养密度移入催产池中进行催产，催产水温为28-30℃，采用胸腔注射催产素，雌鱼分二次注射，第一针剂量为总剂量的30%，隔6-8h后注射第二针，同时对雄鱼注射，持续冲水刺激，效应时间为8-12h。
步骤4）中，每条雄雌亲鱼挤一次精卵完成后，立刻将亲鱼放回养殖池，溶解氧保持在4mg/l左右。
步骤4）中，每次挤卵在20min内完成。
本发明优选的，步骤4）中，每条雄性亲鱼挤精次数1次，挤精时间控制在10min内。
本发明的人工催产，每次挤卵必须从上腹部按压挤卵，不可用力过大，否则雌性亲鱼内脏极易受伤死亡，每次挤卵应在20min内完成，将卵挤入消毒干燥的盆中，再挤精液，挤精必须从上腹部位置按压，将精液挤入盛有卵粒的盆中，挤精液切不可用力过大，否则雄性亲鱼极易劳累死亡。
本发明的人工授精，目测是无法发现受精卵是否全部完成人工授精的，人工授精需要有实践经验的熟练技术人员完成。
所述的无结网布为60-80目的涤纶无结网布。
受精卵在无结网布上的黏结密度为6-7千枚受精卵/㎡。
受精卵平均分散黏在无结网布上按如下方法进行，使用狼毫毛笔蘸上受精卵，将黏在毛笔上的受精卵轻轻均匀甩在网布上，蘸受精卵的过程时间控制在2min内。以避免受精卵黏毛笔上。
孵化水的升温速率小于1.5℃/小时，孵化用水盐度小于0.1%，ph值控制在6.82-8.2之间，电解率μs值在400以下，孵化期间受精卵光照度控制在150lux以下。
不同亲鱼组的黏有受精卵的网布分别放置于不同的有标记的网箱内。
孵化池面积20㎡，水深1.2m。
本发明受精卵孵化过程中保持水质硬度、ph、水温稳定，避免换水。