本发明整体上涉及游霉素，且更具体地涉及特定形式的游霉素，其在农业应用中用作杀真菌剂时显示出改良的性质。
背景技术：
：：由霉菌引起的田间作物损失可对世界作物产量具有重大影响。霉菌还可能导致作物品质下降，诸如营养物质损失、异味形成和组织破坏，导致加工后的品质下降。霉菌感染可能发生在田间的植物组织，用于播种、收获后和在土壤中的种子中。为了防止农业植物的真菌损害，合成杀真菌剂和天然杀真菌剂在市场上有售。然而，目前使用的杀真菌剂存在几个缺点。由于真菌对某些杀真菌剂产生抗性，许多杀真菌剂随着时间的推移而失去活性。抗性可能在短时间内产生。抗性的产生导致处理次数的增加和施用更高量的杀真菌剂或者两种或更多种杀真菌剂的混合施用。此外，以高浓度施用农用化学品或使用农用化学品的混合物通常导致对作物本身的植物毒性作用。目前市场上的许多杀真菌剂对生态系统、环境污染和关于工人安全的人类健康问题造成有害影响。此外，食用时农产品上的有害杀真菌剂的高残留水平，甚至超过最大残留限量也引起关注。与合成农用化学杀真菌剂相比，许多天然抗微生物剂(诸如酶、细菌培养物或植物提取物)通常缺乏有效性。本领域需要开发有害合成杀真菌剂的替代物，其不仅可以对抗有害微生物，还可以改良作物的发育和产量。技术实现要素：在一些方面，本发明提供了游霉素组合物，其在农业应用用作杀真菌剂时具有改良的性质。在某些方面，本发明还提供了由本文所述的任何游霉素组合物组成的杀真菌剂。在一些实施方案中，游霉素组合物具有小于6m2/g的表面积。在可与前文的限定组合的一些变型中，游霉素组合物是经研磨的(milled)。在一些变型中，当为经研磨的时，游霉素组合物具有小于约6μm，优选小于约2μm的平均粒径。在可与前文的限定组合的其他实施方案中，游霉素组合物包含结构化剂和表面活性剂。在可与前文的限定组合的其他实施方案中，游霉素组合物进一步包含细胞物质。在可与前文的限定的其它实施方案中，游霉素组合物在水中具有提高的溶解度，从而使处理植物病原体的活性成分(游霉素)的生物利用度提高。在其他方面，本发明提供了一种方法，该方法包括使植物或真菌或其一部分与本文所述的任何游霉素组合物接触以处理植物或真菌或它们的一部分。在其他方面，本发明提供了一种方法，该方法包括用本文所述的任何游霉素组合物处理种子；并使这种经处理的种子发芽。在又一其他方面，本发明提供了一种方法，所述方法包括使果实与本文所述的任何游霉素组合物接触。还在其他方面，本发明提供了一种方法，所述方法包括使土壤与本文所述的任何游霉素组合物接触。在一些变型中，所述方法包括使土壤与本文所述的任何游霉素组合物接触；以及在这样的土壤中种植种子。在前述的一些变型中，该方法减少或抑制至少一种植物病原体的生长。附图说明通过参考结合附图的以下描述可以最好地理解本申请，其中相同的部分可用同样的附图标记来表示。图1a和图1b描绘了游霉素组合物a在水中(图1a)和对照游霉素在水中(图1b)的sem图像(20000×)。将游霉素组合物a和对照游霉素颗粒悬浮在水中(250g/l)并研磨至2μm的平均粒径。干燥后，拍摄sem图像。图2描绘了(a)游霉素组合物a和(b)对照游霉素的比例化(scaled)的粉末xrd衍射图。将游霉素组合物a和对照游霉素颗粒悬浮在水中(250g/l)，并在玻珠研磨机(dyno-(glenmillsinc.clifton，nj)中研磨至2μm的平均粒径。充分摇动浆液并置于0.5mm玻璃毛细管中，然后以毛细管模式用cukα辐射进行测量。y轴表示强度(计数)，x轴表示2θ(°)。图3描绘了dsc热分析图，其示出了(a)游霉素组合物a和(b)对照游霉素在水中的剩余质量(热重量)(上图)和显示热流(下图)。具体实施方式以下描述阐述了示例性方法、参数等。然而，应当知晓，这样的描述并非旨在限制本发明的范围，而是用于提供对示例性实施例的描述。在一些方面，本文提供了游霉素组合物。这种游霉素组合物可适用于在农业应用中作为杀真菌剂。因此，还提供了使用游霉素组合物处理植物、真菌、种子、果实和土壤的方法。本发明的游霉素组合物，包含游霉素或其盐，其中，游霉素组合物具有小于6m2/g的表面积，并且其中，游霉素组合物是经研磨的。所述游霉素组合物优选包含生产游霉素的微生物的细胞物质，所述细胞物质包含发酵液的残余物、发酵生物体的残余物，和/或由发酵生物体分泌的化合物。发现，当与包含等量游霉素的纯化的游霉素的组合物相比时，所述组合物作为杀真菌剂更有效。在不存在脂肪酸，或存在少量脂肪酸(＜0.1％w/w脂肪酸)的情况下，根据本发明的游霉素组合物与包含相似或相同量的纯化的游霉素的类似组合物相比，在防止经处理的植物、植物部分和/或土壤上长出真菌中更有效。如本文所用，术语“残余物”包括残留在细胞材料中的化合物，以及在发酵过程和/或提取过程中产生的此类化合物的改性物和衍生物。在某些方面，本发明提供了一种方法，其涉及使植物或真菌或其一部分，与本文所述的任何游霉素组合物接触以处理植物或真菌或其一部分。在某些方面，本发明提供了一种方法，其涉及用本文所述的任何游霉素组合物处理种子以生产经处理的种子；并使经处理的种子发芽。在某些其他方面，本发明提供了一种方法，其涉及使果实与本文所述的任何游霉素组合物接触。这种果实可以是收获前或收获后的果实。还在其他方面，本发明提供了一种方法，其涉及使土壤与本文所述的任何游霉素组合物接触，并在该土壤中种植种子。在下文中将进一步详述游霉素组合物，及其用途和制备方法。游霉素组合物本文所述的游霉素组合物包括游霉素或其盐。游霉素具有以下化学结构：优选的游霉素组合物包含游霉素或其盐，其中，游霉素组合物具有小于6m2/g的表面积，并且其中，游霉素颗粒的平均尺寸例如通过研磨而被减小至小于6μm，优选小于约2μm。用于确定组合物中平均粒度的方法是本领域技术人员已知的。例如，hukkanen和braatz，2003，传感器和致动器(sensorsandactuators)b96：451～459讨论了可用于确定组合物中平均粒度的各种方法，包括前向光散射和超声消光。优选的方法是筛分分析或激光衍射分析，例如使用analysette22-microtecplus激光颗粒筛分器(fritsch，idar-oberstein，germany)。本文所述的游霉素组合物可包含额外的组分。例如，在一些实施方案中，当游霉素组合物通过生产游霉素的细菌的发酵过程来生产时，该游霉素组合物可包括细胞物质和/或由发酵过程产生的或得自于发酵过程的其他化合物。在一些变型中，游霉素组合物包括细胞物质。在某些变型中，游霉素组合物中的所述细胞物质包括生产游霉素的细菌的残余物。在某些变型中，游霉素组合物中的所述细胞物质包括存在于生产细菌的生长培养基中的化合物或化合物的残余物。在某些变型中，游霉素组合物中的所述细胞物质包括由生产游霉素的细菌分泌的化合物。此类化合物的实例可包括细菌细胞被膜的化合物，其可包括细菌的质膜和细胞壁。在一个变型中，游霉素组合物中的所述细胞物质包括这些细胞被膜结构的片段和/或这些细胞壁和细胞膜结构的单个化合物或结构单元。细胞壁的这些组分可包括例如肽聚糖(聚-n-乙酰葡糖胺和n-乙酰胞壁酸)或胞壁质、磷壁酸(例如通过磷酸二酯键连接的磷酸甘油酯或磷酸核糖酯的细菌多糖)、谷氨酸、l-半乳糖、葡萄糖、甘露糖、果糖、半乳糖胺、n-乙酰葡糖胺、胞壁酸、碳水化合物，核糖醇、肽、l-二氨基庚二酸、甘氨酸和丙氨酸。游霉素组合物中的所述细胞物质可以进一步包括生产游霉素的细菌的细胞膜的组分。细胞膜的这些组分可包括磷脂和蛋白质。在一个变型中，游霉素组合物可包括属于磷脂、糖脂和甾醇类的两亲性脂质。在另一个变型中，游霉素组合物可包括磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇和磷脂酰丝氨酸。游霉素组合物中的所述细胞物质可以进一步包括蛋白质(诸如膜蛋白质)和氨基酸。例如，这些膜蛋白可以参与细胞-细胞接触、表面识别、细胞骨架接触、信号传导、酶活性或跨生产游霉素的细菌的膜运输物质。在一个变型中，游霉素组合物包括激素和碳水化合物。在另一个变型中，游霉素组合物包括脑苷脂和神经节苷脂。游霉素组合物中的所述细胞物质可以进一步包括可以存在于细胞提取物中的其他细菌化合物，诸如作为细胞内部一部分的化合物和/或分解产物。实例包括存在于细胞质中的化合物，包括核酸分子(诸如质粒、dna和rna)、核糖体、细胞内膜、酶、营养储存结构(诸如糖原)、脂质结构、蛋白质结构和糖结构。游霉素组合物中的所述细胞物质可包括发酵培养基中存在的其他化合物。这些化合物的实例包括蛋白质氮源(例如，酵母提取物，和/或诸如蛋白质水解产物、蛋白胨、大豆蛋白质和牛肉提取物的非酵母蛋白质)；可代谢的碳源(例如，葡萄糖、糖蜜、乳糖、多糖、玉米浆、玉米淀粉和马铃薯淀粉)；生长因子(如维生素)；无机元素(如钙、钾、钠、镁、硫酸铵)；微量元素(如锌、铜、铁、硼和钴)；和发酵培养基化合物的其他分解产物。游霉素组合物的组分也可以根据用于从发酵培养基中提取游霉素的方法或技术而变化。例如，当使用醇来破坏发酵液中的细胞时，游霉素组合物可以包括游霉素烷基酯，诸如当使用甲醇时，可包括游霉素甲酯。应当理解，本文所述的游霉素组合物的任何组分可以如同每个组合被单独列出一样组合。例如，在一些实施方案中，游霉素组合物包括游霉素、蛋白质和淀粉，或游霉素、游霉素烷基酯、蛋白质和淀粉，或游霉素、氨基酸、核酸分子和淀粉，或游霉素、氨基酸、肽聚糖、核酸分子和淀粉。如本文所用，术语蛋白质是指包含5个或更多个氨基酸残基且至多1000个氨基酸残基的的寡聚-或多聚氨基酸分子。游霉素组合物中各种组分的量也可以变化。在一些变型中，游霉素组合物具有1wt％至90wt％的游霉素。在其他变型中，游霉素组合物的至少50wt％、至少55wt％，或至少60wt％是游霉素或其盐。在其他变型中，游霉素组合物的50wt％至65wt％是游霉素或其盐。在其他变型中，游霉素组合物的1wt％至5wt％是游霉素烷基酯。组合物中存在的游霉素的量可取决于多个因素，包括在发酵过程中生产的游霉素的多少以及组合物被纯化的程度。粗制游霉素组合物中的细胞物质的量可以在1wt％至40wt％之间变化，诸如2wt％至20wt％(w/w)，优选5wt％至10wt％(w/w)。本发明的组合物进一步优选包含至少一种表面活性剂和至少一种结构化剂。所述表面活性剂优选包括至少一种阴离子表面活性剂，或至少一种非离子表面活性剂，或它们的组合。合适的阴离子表面活性剂可包括，例如，十二烷基硫酸钠；磺基琥珀酸酯/盐型表面活性剂；乙氧基化三苯乙烯基苯酚盐，诸如乙氧基化三苯乙烯基苯酚硫酸盐(如2，4，6-三[1-(苯基)乙基]苯基-ω-羟基聚(氧乙烯)硫酸盐)，和乙氧基化三苯乙烯基苯酚磷酸盐(如聚乙二醇2，4，6-三苯乙烯基苯基醚磷酸三乙醇胺盐)；和二辛基磺基琥珀酸钠；萘磺酸盐缩合物；和苯乙烯(甲基)丙烯酸共聚物(例如，其可包括丙烯酰胺丙基甲基磺酸单体)。合适的非离子表面活性剂可包括，例如，聚(氧乙烯)-山梨糖醇-单月桂酸酯、聚甲基丙烯酸甲酯聚乙二醇接枝共聚物、环氧乙烷/环氧丙烷嵌段共聚物；和聚(氧乙烯)x-山梨糖醇-单月桂酸酯。可以使用本文描述的表面活性剂的任何组合。优选的组合包括环氧乙烷/环氧丙烷嵌段共聚物(诸如atlasg5002-l)作为非离子表面活性剂，和苯乙烯(甲基)丙烯酸共聚物(诸如metasperse550s)作为阴离子表面活性剂。本发明进一步提供一种游霉素组合物，其包含游霉素或其盐、结构化剂和表面活性剂，其中，该游霉素组合物进一步包含细胞物质。所述结构化剂优选包括至少一种长链多糖，诸如结冷胶、瓜尔胶、琥珀酰聚糖胶(例如，rhodia)和黄原胶；多糖和糖蛋白的混合物(诸如阿拉伯胶)；天然存在的矿物(诸如绿坡缕石)；以及聚合物，诸如聚酰胺、聚丙烯酸酯、聚氨酯、聚酯和聚乙烯(例如，(dsm，thenetherlands))和来自所述聚合物的共聚物。可以使用本文所述的表面活性剂和结构化剂的任何组合。在一些变型中，表面活性剂和结构化剂可以以10ppm至2×105ppm，或100ppm至104ppm，或500ppm至5000ppm的浓度存在于杀真菌剂中。上述一种或更多种表面活性剂，尤其是二辛基磺基琥珀酸钠和萘磺酸盐缩合物可用作润湿剂或分散剂。因此，在某些变型中，杀真菌剂包括至少一种润湿剂，或至少一种分散剂，或它们的任何组合。合适的分散剂可包括例如，萘磺酸盐缩合物(诸如烷基萘磺酸钠)、甲醛缩合物(d425)。合适的润湿剂可包括磷酸盐/酯形式的磷酸化二苯乙烯基苯酚乙氧基化物或磷酸化三苯乙烯基苯酚乙氧基化物的组和/或木质素磺酸酯/盐的组；或乙氧基化三苯乙烯基苯酚磷酸酯(诸如fl)。根据本发明的游霉素组合物的ph优选为ph＝4至ph＝9，优选为ph＝5至ph＝8，最优选为ph＝5.5至ph＝6.5。表面积在一些变型中，游霉素组合物具有小于6m2/g、小于5m2/g、小于4m2/g、小于3m2/g、小于2m2/g，或小于1m2/g的表面积。在某些变型中，游霉素组合物具有1m2/g至6m2/g、1m2/g至3m2/g，或0.5m2/g至3m2/g的表面积。表面积可通过本领域已知的任何合适的方法或技术测量。例如，对于上述变型，通过bet(在本领域中也称为brunauer、emmett和tellers分析理论)测量表面积。使用bet分析，游霉素组合物的表面积可以通过在固体的游霉素组合物表面上物理吸附氮气(n2)来确定。bet分析的值表示为每克固体材料的m2。溶解度在一些变型中，游霉素组合物在水中的溶解度是结晶游霉素在水中的溶解度的至少1.5倍、至少2倍、至少3倍、至少4倍，或至少5倍。在其他变型中，游霉素组合物在水中的溶解度是结晶游霉素在水中的溶解度的2至4倍。在一个变型中，与结晶游霉素相比，游霉素组合物在水中具有更快的溶解速率。在一个变型中，结晶游霉素具有完好的几何结晶形式。在某些变型中，游霉素组合物在水中的溶解度是纯的游霉素在水中的溶解度的至少1.5倍、至少2倍、至少3倍、至少4倍，或至少5倍。在其他变型中，游霉素组合物在水中的溶解度是纯的游霉素在水中的溶解度的2至4倍。在一个变型中，与纯的游霉素相比，游霉素组合物在水中具有更快的溶解速率。在一个变型中，纯的游霉素具有大于90wt％，或大于95wt％的纯度。在另一个变型中，纯的游霉素是结晶形式。还在另一个变型中，纯的游霉素具有完好的几何结晶形式。图1b提供了纯的游霉素的示例性样品的sem图像。如本文所用，术语“纯的游霉素”是指由＞90％的游霉素，优选≥95％的游霉素组成的经纯化的游霉素。纯的游霉素的特征在于具有少于5％的细胞物质、少于4％的细胞物质、少于3％的细胞物质、少于2％的细胞物质、少于1％的细胞物质，优选地没有细胞物质。其中细胞物质被定义为生产游霉素的细菌的残余物或存在于生产细菌的生长培养基中的化合物或化合物的残余物，和/或由生产游霉素的细菌分泌的化合物。溶解度可通过本领域已知的任何合适的方法或技术测量。例如，对于上述变型，利用吸收色谱法通过高效液相色谱(hplc)系统来测量溶解度。应当理解，本文所述的游霉素组合物的表面积、平均粒度和溶解度的任何变型可以如同每个组合被单独列出一样组合。例如，在一些实施方案中，游霉素组合物具有(i)小于3m2/g的表面积、(ii)小于3μm的平均粒径，和(iii)在水中的溶解度为纯的游霉素在水中的溶解度的至少3倍。生物利用度在一些变型中，游霉素组合物的生物利用度是纯的游霉素(＞90％游霉素，优选≥95％游霉素)的生物利用度的至少1.2倍、至少1.5倍、至少2倍、至少3倍、至少4倍，或至少5倍。生物利用度试验在本领域中是已知的。例如，可以用游霉素溶液浸渍滤纸盘并将其置于包含酵母汇合层的琼脂平板上。将平板在第一温度下孵育第一段时间，例如在4℃下孵育16小时，以使游霉素从颗粒中溶解并将溶解的游霉素扩散到琼脂平板中。随后，将板在第二温度下孵育第二时间段，例如在30℃下孵育24小时，以使酵母生长。围绕滤纸盘的被评分为没有酵母生长的表面区域可被称为抑制区域，作为游霉素的生物利用度的量度。合适的试验是kirby-bauer试验，如baueretal.，1959.arch.int.med.104：208-216；baueretal.1966.amer.j.clin.pathol.45：493-496；和us6228408b中所述。如本文所定义的游霉素组合物由发酵生物体生产，并且是仅部分纯化的。由此生产的游霉素包含发酵生物体或发酵液的残余物和/或由发酵生物体分泌的化合物，这可导致生产不规则晶格，其中晶体与所述残余物和/或化合物混合。这种不规则的晶格可以得到观察到的改进的生物利用度和效力。应当理解，本文所述的游霉素组合物的表面积、平均粒度、溶解度和生物利用度的任何变型可以如同每个组合被单独列出一样组合。例如，在一些实施方案中，游霉素组合物具有(i)小于3m2/g的表面积、ii)小于3μm的平均粒度，和(iii)为纯的游霉素的生物利用度的至少2倍的生物利用度。粒径在某些变型中，游霉素组合物中的颗粒的质量中位直径(也称为d50)小于6μm、小于3μm，或小于2μm，或约2μm。当游霉素组合物的平均粒径大于6μm时，游霉素组合物的平均粒优选减小至小于6μm，优选小于2μm的平均粒径。可以将游霉素组合物碾碎，例如研磨，以获得这样的粒径。研磨可以产生更均匀、更均质的粒径。本文所述的游霉素组合物还可以通过粒径分布来表征，其可以使用平均粒径和描述颗粒尺寸的90％的粒径限制来表示。在一些变型中，游霉素组合物具有：(i)2μm至8μm的平均粒径；和(ii)90％的颗粒具有为0.5μm至20μm的粒径。在一个变型中，游霉素组合物具有：(i)5μm至10μm，或7μm至8μm的平均粒径；和90％的颗粒具有为1μm和20μm的粒径。在另一个变型中，游霉素组合物具有：(i)1μm至2μm，或1.7μm至1.9μm的平均粒径；90％的颗粒具有0.5μm至7.5μm的粒径。还在一个变型中，游霉素组合物具有：(i)1μm至3μm，或约2μm的平均粒径；并且90％的颗粒具有0.5μm和5.5μm的粒径。优选游霉素组合物中的游霉素具有1μm至2μm的平均粒径，从而90％的颗粒具有0.5μm至7μm的粒径(d90)，并且表面积小于6m2/g。进一步优选的游霉素组合物中的游霉素具有为3μm至4μm的平均粒径，从而90％的颗粒具有0.5μm至10μm的粒径(d90)，表面积小于6m2/g，其包含生物利用度是纯的游霉素的生物利用度的至少1.5倍的游霉素。其他特征在一些变型中，游霉素组合物是固体。该固体材料可以通过本领域已知的任何合适的方法或技术来表征。在一些变型中，将游霉素组合物配制成悬浮液浓缩物、水分散性颗粒、可湿性粉剂、悬浮乳剂、可乳化浓缩物、分散液浓缩物、水混型粉剂(waterslurriablepowder)、流动性种子处理组合物。例如，参考图1a，游霉素组合物可以通过扫描电子显微镜(sem)表征。参考图2，游霉素组合物还可以通过x射线衍射(xrd)分析来表征。游霉素组合物还可以通过差示扫描量热法(dsc)分析来表征，以研究游霉素组合物的热转变。游霉素组合物的用途本文所述的游霉素组合物可以配制用作农业应用中的杀真菌剂。在一些实施方案中，游霉素组合物被配制成用于喷洒到植物、真菌、种子或果实，或者它们的任何部分上的杀真菌剂。植物和真菌可指例如用于食物、衣服、牲畜、饲料、生物燃料、药物或其他用途的栽培植物和真菌。这种栽培植物和真菌可称为作物。在一些方面，本发明提供了用于减少或抑制至少一种植物病原体生长的方法。例如，在一些变型中，植物病原体是真菌植物病原体。在某些变型中，植物病原体属于青霉属(penicillium)、镰刀菌属(fusarium)、微座孢属(microdochium)、丝核菌属(rhizoctonia)，壳针孢属(septoria)、孢盘菌属(botryotinia)、链格孢属(alternaria)，赤霉属(gibberella)，球腔菌属(mycosphaerella)，或稻瘟菌属(magnaporthe)，或其任何组合。在一个变型中，植物病原体是意大利青霉(penicilliumitalicum)、藤仓赤霉(gibberellafujikuroi)、稻瘟病菌(magnaporthegrisea)、斐济球腔菌(mycosphaerellafijiensis)、尖孢镰刀菌(fusariumoxysporum)、禾谷镰刀菌(fusariumgraminearum)、香蕉炭疽病菌(colletotrichummusae)、半裸镰刀菌(fusariumpallidoroseum)或层生镰刀菌(fusariumproliferatum)。本文所述的游霉素组合物可用于处理植物病原体的组合。例如，在一些实施方案中，游霉素组合物减少或抑制镰刀菌(fusariumspp.)和微座孢(microdochiumspp.)的生长。在一个变型中，本发明提供了通过使果实与本文所述的游霉素组合物接触来减少或抑制果实(例如，柑橘类水果和香蕉)上霉菌生长的方法。在另一个变型中，本发明提供了一种通过将本文所述的游霉素组合物施用于土壤来保护土壤免受霉菌侵害的方法。在某些方面，本发明提供了通过使本文所述的游霉素组合物与植物、真菌、种子或果实，或它们的任何部分接触来处理植物真菌病害和霉菌的方法。在一个变型中，植物病害是土传病害或种传病害。在另一个变型中，本发明提供了通过使本文所述的游霉素组合物与植物、真菌、种子或果实，或它们的任何部分接触来处理香蕉黑条叶斑病或黄叶病的方法。在一些变型中，霉菌可能生长在田间作物上(例如，收获前)，或者可能生长在收获的农产品上(例如，收获后)。在一个变型中，本发明提供了通过使本文所述的游霉素组合物与植物、真菌或果实，或它们的任何部分接触来处理收获后病害的方法。可用本文所述的游霉素组合物对抗的植物病害和霉菌的实例包括：土传病害。土壤相关霉菌病害的一个实例是由香蕉属尖孢镰刀菌(fusariumoxysporumf.sp.cubense)引起的枯萎病或黄叶病(panamadisease)。其他土传植物致病真菌例如是其他镰刀菌属种(fusariumspecies)(诸如番茄属尖孢镰刀菌fusariumoxysporumf.sp.lycopersici和草莓属尖孢镰刀菌fusariumoxysporumf.sp.fragariae)、立枯丝核菌rhizoctoniasolani、盘核菌属种sclerotiniaspecies、腐霉属种pythiumspecies和拟盘多毛孢pestalotiopsisclavispora。此外，不同作物上的主要土传病原体为：对于谷类，例如包括禾顶囊壳gaeumanomycesgraminis、小麦基腐病菌pseudocercosporellaherptrichoides、小麦根腐病菌bipolarissorokiniana和禾谷多粘霉polymyxagraminis；对于玉米，例如包括单孢镰刀菌fusariummoniloforme、禾生炭疽病菌colletotrichumgraminicola、玉米赤霉gibberellazeae和壳球孢菌macrophominaphaseolina；对于水稻，例如包括小球菌核菌sclerotiumoryzae、稻长蠕孢helminthosporiumoryzae、新月弯孢霉curvularialunata、稻平脐蠕孢bipolarisoryzae和绵霉属种achlyaspecies；对于棉花，例如包括尖孢镰刀菌fusariumoxysporum、基生根串珠霉thielaviopsisbasicola、如树苗茎腐病macrophominaphaeseolina和棉苗炭疽病菌glomerrellagossypii；对于大豆，例如包括大豆猝死综合症病菌fusariumvirguliforme、大豆疫霉phytophthorasojae、齐整小核菌sclerotiumrolfsii、如树苗茎腐病macrophominaphaeseolina和大豆茎褐腐病菌phialophoragregata；对于马铃薯，例如包括立枯丝核菌rhizoctoniasolani、茎点霉属种phomaspecies、茄长蠕孢helminthosporiumsolani、马铃薯炭疽病菌helminthosporiumsolani、接骨木镰刀菌fusariumsambucinum、马铃薯粉痂菌spongosporasubterranean和红腐疫霉phytophthoraerythroseptoca。可能发生在蘑菇生长基质中的有害霉菌的实例是，例如，木霉属种trichodermaspecies(例如哈茨木霉菌t.harzianum、丛梗菌t.aggresivum和绿色木霉菌t.viride)、轮枝孢属种verticilliumspecies(例如真菌轮枝孢v.fungicolavar.fungicola和红花轮枝孢v.fungicolavar.aleaophilum)、曲霉属种aspergillusspecies、青霉属种penicilliumspecies、指孢霉属种dactylumspecies(例如树状指孢霉d.dendroides)和疣孢霉属种mycogonespecies(例如有害疣孢霉m.pernicosa)。种传病害和在球茎和块茎上的病害。诸如郁金香和百合等花球茎上的霉菌病的实例是镰刀菌属种fusariumspecies(诸如尖孢镰刀菌fusariumoxysporum)、葡萄孢属种botrytisspecies、腐霉属种pythiumspecies、丝核菌属种rhizoctoniaspecies和壳多孢属种stagnosporaspecies。种薯的霉菌病的实例是镰刀菌属种fusariumspecies(例如茄病镰刀菌fusariumsolani)、立枯丝核菌(rhizoctoniasolani)、茎点霉属种(phomaspecies)、茄长蠕孢(helminthosporiumsolani)、马铃薯炭疽病菌(colletotichumcoccodes)和青霉属种(penicilliumspecies)。种子上发生的诸如种子腐烂的关键病害是由例如曲霉属种(aspergillusspecies)(例如土曲霉a.terreus)、青霉属种(penicilliumspecies)和拟茎点霉属种(phomopsisspecies)引起的；种子上的猝倒病是由例如腐霉属种(pythiumspecies)、镰刀菌属种(fusariumspecies)和丝核菌属种(rhizoctoniaspecies)引起的；出现后病害(post-emergedisease)可能由例如长蠕孢属种(helminthosporiumspecies)、黑粉菌属种(ustilagospecies)和腥黑粉菌属种(tilletiaspecies)引起。谷物上的主要种传真菌包括例如镰刀菌属种(fusariumspecies)、链格孢属种(alternariaspecies)、小麦根腐病菌(cochliobilussativus)、颖枯壳多孢(stagnosporanodorum)、裸黑粉菌(ustilagonuda)和麦角菌(clavicepspurpurea)。大豆上的种传真菌可包括例如，拟茎点霉属种(phomosisspecies)、腐皮壳属种(diaporthespecies)、大豆霜霉(peronosporamanshurica)、大豆紫斑病菌(cercosporakikuchii)、链格孢属种(alternariaspecies)和镰刀菌属种(fusariumspecies)。水稻上的种传真菌病原体包括例如镰刀菌属种(fusariumspecies)、链格孢属种(alternariapadwickii)、新月弯孢霉(curvularialunata)、稻平脐蠕孢(bipolarisoryzae)、长蠕孢属种(helminthosporiumspecies)和稻瘟病菌(pyriculariaoryzae)。玉米上的种传病原体包括例如镰刀菌属种(fusariumspecies)、青霉属种(penicilliumspecies)、曲霉属种(aspergillusspecies)、平脐蠕孢属种(bipolarisspecies)、链格孢属种(alternariaspecies)和根霉属种(rhizopusspecies)。对棉花种子，例如曲霉属种(aspergillusspecies)、根串珠霉属种(thielaviopsisspecies)和镰刀菌属种(fusariumspecies)可能会发育。田间作物(收获前)上的霉菌。香蕉植物的叶霉病的实例是由香蕉生球腔菌(mycosphaerellamusicola)引起的香蕉叶斑病(sigatokaleafspot)和黄色香蕉叶斑病(yellowsigatoka)，或由斐济球腔菌(mycosphaerellafijensis)引起的黑色香蕉叶斑病(blacksigatoka)。马铃薯植物病害的一个实例是由诸如茄链格孢菌(alternariasolani)和互隔交链交链孢菌(alternariaalternate)等链格孢属种引起的早疫病。对番茄植物也适用的马铃薯植物病害的另一个实例是由致病疫霉(phytophthorainfestans)引起的晚疫病。链格孢属种(alternariaspecies)也能破坏田间作物(诸如蔬菜、棉花、烟草和谷物)，或者可能对番茄、洋葱和胡萝卜造成黑斑病。尖孢镰刀菌是许多作物(诸如玉米和大豆)的致病霉菌的一个实例。白粉病是在许多作物上由不同的真菌物种引起的病害的一个实例。实例包括白粉菌属种(例如葡萄上的葡萄白粉菌e.necator、甜菜上的甜菜白粉菌e.betae、卷心菜上的十字花科白粉菌e.cruciferarum、谷物上的小麦白粉菌e.graminisspecies)；例如番茄上的番茄霜霉病菌(oidiumlycopersicum)；例如玫瑰、苹果和草莓上的叉丝单囊壳属种(podosphaeraspecies)；小麦和大麦上的小麦白粉菌(blumeriagraminis)；黄瓜和香瓜上的棕丝单囊壳(sphaerothecafusca)；和辣椒、胡椒和茄子上的鞑靼内丝白粉菌(leveillulataurica)。唐尼霉病(downeymildew)是可由许多不同的真菌物种引起的另一种植物病害。实例包括例如葡萄树上的葡萄霜霉(plasmoparaviticola)，例如啤酒花上的草假霜霉(pseudoperonosporahumuli)，例如卷心菜上的寄生霜霉(peronosporaparasitica)，例如洋葱上的葱霜霉(peronosporadestructor)，例如罗勒上的罗勒霜霉(peronosporabelbahrii)，例如黄瓜、甜瓜或哈密瓜上的瓜霜霉(pseudoperonosporacubensis)，例如甜菜上的甜菜霜霉(pseudoperonosporafarinosaf.sp.betae)、例如莴苣上的莴苣霜霉(bremialactucae)。(4)收获的农产品(收获后)上的霉菌。可以在收获的水果(诸如苹果、梨、柑橘类水果、核果和浆果)上生长的霉菌是，例如葡萄和无核小水果上的葡萄孢(botrytiscinerea)，洋葱、豆类和水果上的葱腐葡萄孢(botrytisaclada)，果生盘长孢(gloeosporiumfructigenum)，苹果牛眼果腐病菌(gloeosporiumperennans)，恶疫霉(phytophthoracactorum)，丁香疫霉(phytophthorasyringae)，青霉属种(例如，在梨果类和坚果上扩展青霉p.expansum、在柑橘类水果上的指状青霉p.digitatum和意大利青霉p.italicum、在谷物上的纯绿青霉p.verrucosum和真菌毒素展青霉素p.viridicatum)，在玉米上的单孢镰刀菌(fusariummoniloforme)，草莓上的匍茎根霉菌(rhizopusstolinifer)。黄曲霉(aspergillusflavus)具有生产霉菌毒素黄曲霉毒素的能力，包括在花生、开心果、巴西坚果和玉米中。烟曲霉(aspergillusfumigatus)可能在各种贮藏的水果、作物、谷物、可可豆和坚果中发生。土曲霉(aspergilluspullulans)可能在贮藏的谷物、草莓、柑橘类水果和樱桃上发生。可以在菠萝上发现的真菌病原体的实例包括奇异根串珠霉(thielaviopsisparadoxa)、绳状青霉(penicilliumfunicolosum)、尖孢镰刀菌(fusariumoxysporum)、匍茎根霉菌(rhizophusstolonifer)和黑曲霉(aspergillusniger)。在香蕉上，收获后的病害实例是可以由许多真菌菌种引起的冠腐病：在香蕉上常见的真菌病原体的实例是香蕉炭疽病菌(colletotrichummusae)、奇异根串珠霉(thieliaviopsisparadoxa)、粉红镰刀菌(fusariumroseum)、可可黄萎病菌(verticilliumtheobromae)、可可毛色二孢菌(lasiodiplodiatheobomae)和香蕉叶斑小窦氏霉(deightoniellatorulosa)。在一些变型中，处理是获得有益或期望结果的方法。在一个变型中，处理病害可引起每个区域生长的植物数量的增加。在另一个变型中，处理病害可引起植物或作物产量的增加。在其他方面，本发明提供了通过使本文所述的游霉素组合物与植物或种子或其任何部分接触来增加每个区域生长的植物或作物的方法。在一些变型中，与未处理的植物或种子或其任何部分相比，每个区域生长的植物增加。在其他变型中，与本领域中使用的商业杀真菌剂相比，每个区域生长的植物增加。还在其他方面，本发明提供了通过使本文所述的游霉素组合物与植物或种子或其任何部分接触来增加植物或作物产量的方法。在一些变型中，与未处理的植物或种子或其任何部分相比，植物或作物产量增加。在其他变型中，与本领域中使用的商业杀真菌剂相比，植物或作物产量增加。在一个变型中，商业杀真菌剂可包括含有咯菌腈的杀真菌剂(例如syngenta)；或者，在另一个变型中，包括含有丙硫菌唑的杀真菌剂(例如，bayercropscience)。植物、真菌及它们的一部分在一些实施方案中，游霉素组合物与植物或其一部分接触。合适的植物包括例如甜菜植物、洋葱植物、番茄植物、马铃薯植物、小麦植物、大豆植物、葡萄树、柑橘植物、香蕉植物或玉米植物。在某些实施方案中，游霉素组合物与植物的一部分接触。在一个变型中，植物部分是叶、茎、种子、球茎(包括例如花球茎)、种薯、根、块茎(包括例如块根)、果实、蔬果(vegetable)、根茎和插条。在其他实施方案中，游霉素组合物与真菌或其一部分接触。合适的真菌可包括例如蘑菇。在一些变型中，游霉素组合物与种子接触。因此，在一个变型中，游霉素组合物被配制用于种子处理。合适的种子可包括例如谷物(例如玉米、小麦、大麦、大米、高粱、燕麦、黑麦)的种子；坚果(例如花生、咖啡、可可、杏仁、开心果)的种子；豆科植物(例如大豆、黄豆)的种子；蔬菜(例如莴苣、卷心菜、西兰花、菠菜、西红柿、辣椒、黄瓜、洋葱)的种子；果实植物(例如葡萄、柑橘类水果、苹果、梨、核果)的种子；观赏植物(例如玫瑰、菊花、天竺葵、矮牵牛、秋海棠)的种子；纤维植物(例如棉花)的种子；油料植物(例如油菜籽、向日葵、可可、落花生)的种子；花(例如玫瑰、百合、兰花)的种子。球根或块茎植物的实例是花球茎(例如郁金香、百合、风信子、番红花、水仙)、种薯和洋葱。块根的一个实例是大丽花。在一个变型中，种子是小麦种子或大豆种子。种子可包括用于生长新植物的种子，以及作为饲料或食物贮藏的种子。在一些变型中，游霉素组合物与果实或其一部分接触。在一个变型中，随着果实在植物上生长，游霉素组合物与果实或其一部分接触。在另一个变型中，游霉素组合物与收获后的果实或其一部分接触。合适的果实包括例如柑橘类水果(例如橙子、柠檬、酸橙)、香蕉、苹果或菠萝。在其他变型中，游霉素组合物可以与田间作物接触。例如，可以喷洒作物。进一步地，可以在农业过程中的不同时间，例如在收获之前或之后喷洒作物。例如，可以在霉菌感染发生之前预防性地喷洒作物；霉菌感染发生后喷洒作物；开花前、开花期间或开花后喷洒作物；在果实、坚果和谷物发育之前、期间或之后喷洒作物。在感染风险高的情况下(例如在热带作物的雨季期间或在恶劣天气条件下)，可以更有规律地施用游霉素组合物。当感染风险较低时，喷洒间隔可能会更长。收获的作物(诸如水果、蔬菜、花和坚果)可以使用本领域已知的任何合适的方法处理，并且如本文所述，包括例如在收获后的任何时间来进行浸泡或喷洒。作物的实例包括谷物(例如玉米、小麦、大麦、大米、高粱、燕麦和黑麦)；热带水果(例如香蕉、菠萝、木瓜、猕猴桃和芒果)；柑橘类水果(如橙子、柠檬、酸橙、柑橘和葡萄柚)；梨果(例如苹果和梨)；核果(如桃子、樱桃、杏仁、李子和杏子)；浆果(例如草莓、覆盆子、黑莓和黑醋果)；蔬菜(如生菜、卷心菜、番茄、青瓜、辣椒、胡椒、洋葱、胡萝卜、土豆)；豆科植物(例如黄豆、豌豆、大豆)；油料植物(例如油菜籽、向日葵、可可、花生、椰子)；葫芦科(例如黄瓜、茄子、甜瓜、南瓜)；纤维植物(如棉花)；观赏植物；树木和花卉(如郁金香、百合、玫瑰、兰花、菊花、矮牵牛、秋海棠、紫罗兰、大丽花、倒挂金钟、非洲菊、水仙、番红花、针叶树)；和其他作物(诸如咖啡、茶、橡胶、葡萄、坚果、开心果、烟草、针叶树、甘蔗、甜菜、饲料甜菜和啤酒花)。接触方式可使用本领域已知的任何合适方法使游霉素组合物与植物、真菌、种子和果实或它们的任何部分接触。游霉素组合物可以通过以下方式来施用：例如可选地使用载体(诸如蜡或油)对田间或温室中的植物进行喷洒；浸渍种子、球茎或种薯；例如通过土壤添加到植物部分(诸如种子或根系)；通过种子包衣或拌种添加到诸如种子、种薯或球茎等植物部分；添加到要种植或发芽种子和/或植物或蘑菇发育的土壤或生长基质中；添加到例如温室或田间的水中或浇水系统中；通过例如浸渍或喷洒处理收获的植物部分(诸如球茎、种子、谷物、大豆、花、果实)、蔬菜或植物。在一些变型中，游霉素组合物可以配制用于进行浸泡、浸渍、灌溉、注入土壤、淋洒(drenching)、蒸发、喷洒、静电喷洒、喷雾、熏蒸、刷涂、喷涂(painting)和混合。例如，当用于保护田间或温室中的作物时，游霉素组合物可以通过喷洒或喷雾作为水性或油性悬浮液或溶液来施用。当在收获后施用时，可以通过浸泡、喷雾或喷洒来施用游霉素组合物。游霉素组合物还可以通过灌溉系统或通过使用载体(诸如包衣、敷料或蜡)施用。在一个变型中，可以喷洒游霉素组合物。在这种变型中，游霉素组合物可以配制成杀真菌喷雾。例如，喷枪可用于喷洒游霉素组合物。在某些变型中，通过在田间对植物进行喷洒来施用游霉素组合物。在另一个变型中，可以用游霉素组合物处理种子。可以使用本领域已知的任何合适的方法或技术来处理种子。例如，在某些变型中，游霉素组合物用于制备拌种剂或种子包衣剂。在又一变型中，游霉素组合物用于制备包衣乳液，例如用于田间的果实或植物。在又一变型中，游霉素组合物用于制备施用于果实上的蜡。在又一变型中，可以将种子和/或果实浸泡于游霉素组合物中。可以使用本领域已知的任何合适的方法或技术浸泡种子和/或果实种子。在另一变型中，使游霉素组合物与土壤接触。可以使用本领域已知的任何合适的方法或技术来使游霉素组合物与土壤接触。在一个变型中，可以采用喷洒或混合。在另一个变型中，游霉素组合物可以使用灌溉系统来施用，或通过掺入施用于土壤的肥料或营养颗粒来施用。游霉素组合物可以减少病原真菌的发生。制剂当将游霉素组合物配制成杀真菌剂时，游霉素组合物可包括其它化合物或试剂。在一些实施方案中，杀真菌剂包括助剂(co-formulants)，如表面活性剂、粘附剂、消泡剂、增稠剂和稳定剂、杀生物剂和成膜剂(诸如丙二醇和甘油)。可以使用本文描述的表面活性剂的任何组合。在一些变型中，表面活性剂可以以10ppm至2×105ppm，或100ppm至104ppm，或500ppm至5000ppm的浓度存在于杀真菌剂中。在其他变型中，杀真菌剂还包括至少一种粘着剂。合适的粘附剂可包括乳胶类产品，例如(hollandfytob.v.，thenetherlands)和(lovelandindustriesltd)；松油烯/萜烯类产品，例如nu-(hygrotechsaad)和spray-(mandops)；和水合镁铝硅酸盐，诸如绿坡缕石)(例如，basf)。可以使用本文描述的粘附剂的任何组合。在某些变型中，粘附剂可以以10ppm至105ppm，或100ppm至104ppm，或500ppm至5000ppm的浓度存在于杀真菌剂中。在某些实施方案中，杀真菌剂进一步包括水。在一些变型中，杀真菌剂是水性的。在其他变型中，杀真菌剂是非水性的。在一个变型中，杀真菌剂是浓缩原液，必须用合适的稀释剂(诸如水或油)稀释。在另一个变型中，杀真菌剂是水性或非水性的即用型组合物。在其他实施方案中，游霉素组合物可以被配制成干燥组合物(诸如颗粒、粉末或片剂)。这种干燥组合物可以是浓缩的干燥组合物，其可以制备用于农产品浸泡、或喷洒或浸渍的组合物。在某些实施方案中，游霉素组合物可被配制成悬浮浓缩物、水分散性颗粒、可湿性粉剂、悬浮乳剂、可乳化浓缩物、分散浓缩物、干粉种子处理组合物、水混型粉剂(waterslurriablepowder)、流动性种子处理组合物或水分散性颗粒种子处理组合物。游霉素组合物可以配制成不经稀释或稀释后使用。在一个变型中，游霉素组合物被配制成在使用前需要用水稀释的固体颗粒在液体中的悬浮液。在另一个变型中，游霉素组合物被配制成在使用前需要用水稀释的固体颗粒在液体中的分散体。在另一个变型中，游霉素组合物被配制成颗粒形式，其可分散在水中形成分散体(诸如悬浮液或溶液)。在另一变型中，游霉素组合物配制成用来在使用前与水或其它液体混合的粉末。在又一变型中，游霉素组合物被配制成在使用前将其制成水浆液的粉末。剂量在一些变型中，游霉素组合物的剂量是指施用于以下项的游霉素组合物的体积：(i)喷洒施用中的田地表面积，(ii)一定质量的种子(例如，100kg种子，在本领域中也称为“q”)，(iii)土壤处理中的土地表面积，或(iv)限定质量的食品或收获后作物。在其他变型中，游霉素组合物的剂量是指用于浸泡食品或收获后作物的溶液中的制剂或活性成分的浓度。剂量的选择可取决于多种因素，包括例如制剂；接触方式；植物、真菌、种子或果实的类型；和植物病原体或病害的类型。生产游霉素组合物的方法本发明还提供了生产本文所述游霉素组合物的方法。游霉素组合物可以通过使生产游霉素的细菌的发酵来生产。在一些方面中，本发明提供了通过以下方式生产游霉素组合物的方法：提供含有游霉素的发酵液；过滤发酵液以得到滤饼，其中，该滤饼含有游霉素；使滤饼与有机溶剂接触，以溶解滤饼中存在的至少一部分游霉素，并生产游霉素溶液；和从游霉素溶液中沉淀出游霉素组合物。可以使用生产游霉素的细菌通过合适的发酵方法来生产发酵液。这些细菌可包括例如，纳塔尔链霉菌(streptomycesnatalensis)和褐黄孢链霉菌(streptomycesgilvosporeus)。可以应用用于发酵特定生产菌株的任何合适的培养基。例如，发酵培养基含有足够的料源和营养物(诸如可代谢的碳源和氮源)、生长因子、无机成分和微量元素。用于发酵的培养基可以在水中制备并且可以包括一种或多种以下化合物的组合：氮源，诸如酵母提取物和/或非酵母蛋白质(诸如蛋白质水解产物、蛋白胨、大豆蛋白质、牛肉提取物)；可代谢的碳源，诸如葡萄糖、糖蜜、乳糖、多糖、玉米浆、玉米淀粉和马铃薯淀粉；生长因子，诸如维生素；无机成分，诸如钙、钾、钠、镁、硫酸铵；和/或微量元素，诸如锌、铜、铁、硼和钴。发酵培养基可进一步包括消泡剂(诸如硅氧烷消泡剂)，以控制发酵过程中的起泡。可以使用本领域已知的任何合适的技术或方法在任何合适的发酵容器中进行发酵。例如，可以使发酵培养基达到合适的温度，例如28℃～35℃，用生产菌株接种，并孵育足够长的时间段。发酵时间可取决于多种因素，包括发酵培养基的组成、孵育温度、氧气供应、搅拌设备、接种物的品质和发酵的发展。例如，发酵时间可以是60小时至170小时。在发酵期间，供应氧气和/或空气以在发酵的主要部分期间使发酵培养基中的溶解氧保持在合适水平，以足够的速率供应料源(诸如碳源)并且可以控制ph。可以使用不同方法从发酵液中回收游霉素组合物。例如，在一些变型中，对发酵液(包括发酵培养基和生产生物的细胞)进行处理，以消除生产生物的至少一部分或全部活细胞。消除生产生物的细胞也可以在一个或更多个处理步骤之后进行(诸如通过诸如蒸发、过滤和离心等任何合适的方法浓缩发酵液所需的处理步骤)。为了改善蒸发或过滤，可以加热发酵液。例如，在一个变型中，将发酵液加热至50℃至70℃的温度。游霉素组合物可以通过使用一种或更多种有机溶剂单独来制备或与调节ph组合以溶解或沉淀游霉素部分来制备。此外，可以增加一个或多个过滤、洗脱和/或提取步骤。合适的有机溶剂的实例包括乙醇、甲醇、丁醇、丙醇、异丙醇或有机溶剂的任何组合。此外，可以加入诸如cacl2和nacl的盐以改善回收过程，而丙酮和诸如硫酸铵的盐可用于盐析发酵液。可以使用本领域已知的任何方法实现生物质的分解。这种用于裂解生产细胞的方法的其他实例包括例如：使用在足够的温度下进行足够时间的热处理步骤；通过加入化合物将ph增加或降低至产生发酵液的碱性或酸性孵育的值的ph处理；使用抗微生物剂；使用诸如细胞壁降解酶的表面活性物质或者化学表面活性剂来破坏生产生物的细胞膜；使用破碎技术(诸如均质化、超声波处理、静电处理、磁场、高剪切混合)等；可以施用有机溶剂和一种或多种上述方法的任何组合来生产游霉素。生物质的分解可导致生产菌株的所有细胞的裂解和破坏。此外，分解可能导致细胞结构(尤其是菌丝)的破碎和细胞成分的溶解。本领域已知各种方法和技术来检查生产生物的细胞的分解，例如，通过显微镜检查、测量生物质的粘度，或确定在琼脂平板上的合适生长培养基上的菌落的产生。在一些变型中，本发明提供了通过以下生产游霉素组合物的方法：提供含有游霉素的发酵液；过滤发酵液以得到滤饼，其中，该滤饼含有游霉素；用有机溶剂处理滤饼；使经处理的滤饼中的至少一部分游霉素溶解以生产游霉素溶液；可选地对游霉素溶液进行提取、过滤和/或洗脱；使游霉素溶液中的至少一部分游霉素沉淀出来以得到游霉素组合物；和可选地对游霉素组合物进行分离和/或干燥。在某些变型中，用于处理滤饼的有机溶剂包括醇。在一个变型中，醇是甲醇、乙醇、异丙醇或丙醇。在某些变型中，经处理的滤饼中的至少一部分游霉素的溶解包括增加经处理的滤饼的ph。在一个变型中，将ph增加至约ph10。可以使用任何合适的碱来增加ph。例如，合适的碱是氢氧化钠(naoh)。当使用碱时，从游霉素溶液中沉淀出至少一部分游霉素包括加入酸以获得约6-7的ph。这样的酸可包括例如盐酸(hcl)。在其他变型中，经处理的滤饼中的至少一部分游霉素的溶解包括降低经处理的滤饼的ph。在一个变型中，将ph降低至约ph3。可以使用任何合适的酸来降低ph。例如，合适的酸是盐酸(hcl)。当使用酸时，从游霉素溶液中沉淀出至少一部分游霉素包括加入碱以获得约6-7的ph。这种碱可包括例如氢氧化钠(naoh)。在其他方面，本发明提供了通过以下生产游霉素组合物的方法：提供游霉素；在至少10的ph下，溶解游霉素以生产游霉素溶液；向游霉素溶液中加入糖类、蛋白质、淀粉或表面活性剂，或它们的任意组合；从游霉素溶液中沉淀出至少一部分游霉素以得到游霉素组合物；和可选地对游霉素组合物进行分离和/或干燥。在其他方面，本发明提供了通过以下生产游霉素组合物的方法：提供游霉素；在小于3的ph下，溶解游霉素溶解以生产游霉素溶液；向游霉素溶液中加入糖类、蛋白质、淀粉或表面活性剂，或它们的任意组合；从游霉素溶液中沉淀出至少一部分游霉素以得到游霉素组合物；和可选地对游霉素组合物进行分离和/或干燥。还又一方面，本发明提供了通过以下生产游霉素组合物的方法：提供游霉素；将游霉素溶解在有机溶剂中；向游霉素溶液中加入糖类、蛋白质、淀粉或表面活性剂，或它们的任意组合；和通过冷冻干燥或喷洒干燥固化游霉素溶液。在一些变型中，有机溶剂包括醇或醚，或它们的任何组合。例如，有机溶剂可包括甲醇、乙醇、二甲基亚砜(dmso)、叔丁醇和石油醚。也可以使用有机溶剂的组合。在任何前述方法的变型中，该方法进一步包括在配制剂(formulatingagent)存在下，研磨游霉素组合物以生产配制的游霉素组合物。这些配制剂可包括，例如，表面活性剂、消泡剂、增稠剂、稳定剂或甘油，或它们的任何组合。出于清楚和简明描述的目的，本文将特征描述为其相同或单独方面及优选实施方案的一部分，然而，应理解，本发明的范围可包括具有全部或一些所述特征的组合的实施方案。现在将通过以下实施例说明本发明，这些实施例是以说明而非限制的方式提供的，并且应理解这些方法中的许多变化。实施例以下实施例仅是说明性的，并不意味着以任何方式限制本发明的任何方面。实施例1游霉素组合物的制备和配制该实施例描述了由来自纳塔尔链霉菌(streptomycesnatalensis)的发酵液中的约60％游霉素和40％其他化合物组成的游霉素组合物的制备和配制。使用纳塔尔链霉菌(streptomycesnatalensis)进行发酵。发酵终止后，回收游霉素组合物。具体地，过滤发酵液；滤饼用甲醇处理，并在约9-10的ph下用20％naoh提取。在经过两次另外的过滤和洗脱步骤后，通过加入15％hcl将ph调节至约ph6.5。通过加入20％葡萄糖将最终游霉素含量设定为60％。将所得产物干燥，然后研磨。具体地，使用珠磨机研磨每升水中250g的干燥产物，以获得更均匀的颗粒，其平均尺寸为约2μm。如本文实施例中所用，“游霉素组合物a”是指包含下表1a中所示组分的被研磨至d50(质量中值直径)为2μm的游霉素组合物。表1a化合物含量(％)游霉素58.5-61.5％游霉素甲酯1.5-4％含水量＜8％脂肪酸6-10％蛋白质9.60％葡萄糖20％淀粉1.20％如本文实施例中所用，“对照游霉素”是指被研磨至d50(质量中值直径)为2μm的纯度为95％或更高的商业上可获得的游霉素。使用下表1b中提供的成分配制游霉素组合物a和对照游霉素。根据以下配方的游霉素组合物a将被称为“制剂1”。根据以下配方的对照游霉素将被称为“对照游霉素制剂”。表1b成分g/lw/w％游霉素组合物a1009.09atlasg5002-l201.82metasperse550s80.73甘油25222.9rhodorsil426r60.55rhodopol23(水中为2％)777水63757.9总计1100100根据以下方案配制游霉素组合物a以生产制剂1。首先将甘油加入水中，并且在搅拌下，加入表面活性剂atlastmg5002-l(crodacropcare，cowickhall，dn149aa，uk)和metaspersetm550s(crodacropcare，cowickhall，dn149aa，uk)。搅拌30分钟后，加入4.8g消泡剂426r(rhodiainc.，cranbury，nj)。分批加入游霉素组合物a和对照游霉素，并将悬浮液再搅拌30分钟。将悬浮液研磨至约1.7μm的平均粒径。收集悬浮液并加入剩余的1/5份的426r。搅拌30分钟后，加入粘度调节剂23(rhodiainc.，cranbury，nj)。再搅拌3小时后，得到制剂。加入50ppm的防腐剂、杀菌剂。还使用上述方案配制对照游霉素以生产对照游霉素制剂。实施例2游霉素组合物a的物理和化学表征确定游霉素组合物a的各种物理和化学性质，并与对照游霉素的物理和化学性质进行比较。通过粉末x射线衍射(pxrd)、扫描电子显微镜(sem)、brunauer-emmett-teller理论(bet)和差示扫描量热法(dsc)分析这两个样品。还确定了游霉素组合物a和对照游霉素的溶解度。粉末x射线衍射使用pxrd来评价游霉素组合物a(表20中的游霉素i)和对照游霉素(表20中批号为140206的游霉素)中的结晶物质的相对量。通过摇动该材料的浆液，并将其取出到0.5mm玻璃毛细管中来制备样品。在使用细焦密封管源的cukα辐射的衍射仪上以毛细管模式进行pxrd分析。然后获得毛细管模式的每个样品的衍射图。从在水中的游霉素组合物a(150克游霉素)和在水中的对照游霉素(250克游霉素)收集的pxrd数据显示在图2中。扫描电子显微镜(sem)还获得了游霉素组合物a和对照游霉素样品的sem图像，分别如图1a和图1b所示。饱和度研究对游霉素组合物a和对照游霉素均以25％(w/w％)水悬浮液的形式进行饱和度研究。通过在环境温度(22℃)下搅拌软化水和5％聚山梨醇酯80(表面活性剂)来制备溶出介质。为了制备用于溶解度分析的样品，使用塑料移液管将3滴(0.25ml)彻底摇动的制剂加入10ml溶出介质中。在20秒、60秒和300秒后，从样品中取出1ml等分试样并用0.45μmghp过滤器过滤。然后，将0.05ml流动相加入到0.25ml过滤的游霉素等分试样中。然后将等分试样单独注射到高效液相色谱(hplc)柱上，并计算得到的峰面积。峰面积和比率总结在下表2中。表2.对照游霉素和游霉素组合物a溶解的hplc峰面积(mau)和比率。时间(s)对照游霉素游霉素组合物a比率(游霉素组合物a∶对照游霉素)20396680752.060407785282.1300400592662.3使用反相柱(柱尺寸：4.6×250mm，5μm)来进行hplc，其中，流动相为乙腈∶磷酸盐缓冲液ph5.8(比率28∶72；磷酸盐缓冲液＝0.7g/lna2hpo4*2h2o+6.39g/lnah2po4*2h2o)，流速为1.0ml/min，以及注射体积为5μl。柱温设定为25℃，在波长304nm处检测游霉素。鉴于观察到游霉素组合物a所具有的表面积(m2/g)低于对照游霉素的表面积的事实，出乎意料地观察到游霉素组合物a的更高溶解度，如下面进一步详细讨论的(参见bet分析)。为了进一步证明游霉素组合物a引起游霉素溶解度增加，确定游霉素组合物a和对照游霉素中的游霉素的液相浓度。为了确定每种悬浮液中游霉素在液相中的绝对浓度(μg/ml)，充分摇动悬浮液并将其转移到单独的2.0ml离心管中。然后以14500rpm的速率离心浆液45分钟。然后收集上清液并用乙腈∶水(3∶7)溶液稀释10倍。然后通过将样品单独注射到hplc上并将uv-vis吸收与标准游霉素原液的吸收比较而确定液体层中游霉素的浓度。该实验的结果总结在下表3中，并与上述溶解度研究一致。出乎意料地观察到游霉素组合物a中溶解的游霉素的量是对照游霉素的2～3倍。表3样品游霉素(μg/ml)对照游霉素68游霉素组合物a202bet分析使用brunauer-emmett和tellers(bet)分析理论来确定游霉素组合物a和对照游霉素的表面积(表示为m2/g)。在bet分析之前，将每个样品研磨至2μm的粒径。组合物a和对照游霉素的几个试验的分析结果显示在下表4中。表4样品bet分析(m2/g)游霉素组合物a，包含批次号#140428的游霉素1.6游霉素组合物a，包含批次号#151201的游霉素3游霉素组合物a，包含批次号#150820的游霉素3.6对照游霉素，包含游霉素f9.4对照游霉素，包含批次号#140206的游霉素7.7较大的bet值通常表明存在更多的孔隙并因此表面积更大。从表4的数据可以看出，出乎意料地观察到每单位质量的游霉素组合物a具有的表面积低于每单位质量的对照游霉素所具有的表面积。具体地，观察到游霉素组合物a具有的平均bet表面积为2.7m2/g，而观察到对照游霉素具有的平均bet表面积为8.5m2/g。差示扫描量热法进行差示扫描量热法(dsc)以研究游霉素组合物a和对照游霉素的热转变。在氮气气氛下，在25℃至400℃的温度范围内以10℃/min的加热速率进行分析。参见图3。观察到游霉素组合物a发生分解的温度低于比对照游霉素发生分解的温度。实施例3对小麦幼苗发育的影响该实施例证明了游霉素组合物a(表20中的游霉素i)对温室中天然感染的小麦种子的发芽以及幼苗的发育和健康的影响。小麦种子被真菌混合物(18％镰刀菌fusariumspp.和64％微座孢microdochiumspp.)天然侵染。将制剂1与对照游霉素制剂(表20中的游酶素f)、商业对照(咯菌腈作为活性成分的种子处理杀真菌剂，syngenta)和未经处理的对照进行比较。以0.5g、1g和2g游霉素组合物a/kg种子和0.5g、1g和2g对照游霉素/kg种子的剂量使用制剂1和对照游霉素制剂。商业对照以0.2ml/kg种子的剂量率使用。处理种子并将其播种在托盘中，并由随机分区系统放入温室中。在第15天，测量健康和不健康植物的百分比。结果总结在下表5中。表5处理％健康幼苗％不健康幼苗未经处理428celest净0.2ml/kg种子3834对照游霉素制剂(2g对照游霉素/kg种子)7422制剂1(2g游霉素组合物a/kg种子)7418对照游霉素制剂(1g对照游霉素/kg种子)5834制剂1(1g游霉素组合物a/kg种子)6624对照游霉素制剂(0.5g对照游霉素/kg种子)4240制剂1(0.5g游霉素组合物a/kg种子)4034与对照游霉素制剂相比，出乎意料地观察到用制剂1处理的种子产生相似数量的健康植物和不健康植物。这些结果令人惊讶，因为制剂1含有约60％游霉素，而对照游霉素制剂含有约95％游霉素。还观察到，对于2g/kg剂量和1g/kg剂量，制剂1的性能优于商业对照，分别观察到1.9倍和1.7倍的健康幼苗。在相同剂量下，对于2g/kg剂量和1g/kg剂量，制剂1也优于未经处理的对照，分别观察到18.5倍和14.5倍的健康幼苗。实施例4对小麦幼苗发育的影响该实施例证明了游霉素组合物a(表20中的游霉素i)对温室中天然感染的小麦种子的发芽以及幼苗的发育和健康的影响。小麦种子被真菌混合物(60％镰刀菌fusariumspp.和23％微座孢microdochiumspp.)天然侵染。将制剂1与两种商业对照和未经处理的对照进行比较。两种商业对照是：(如上文实施例3中所述)，和(丙硫菌唑作为活性成分的种子处理杀真菌剂，bayercropscience)。以0.5g和1g游霉素组合物a/kg种子的剂量使用制剂1。以0.2ml/kg种子的剂量率使用并且以0.1ml/kg种子的剂量率使用用种子处理剂处理小麦种子(每种处理4×50粒种子)。将种子播种在托盘中，并由随机分区系统放入温室中。在第15天，测量健康和不健康植物的百分比。结果总结在下表6中。表6处理剂％健康幼苗％不健康幼苗未经处理的478celest净0.2ml/kg种子7420redigo0.1ml/kg种子2668制剂1(1g游霉素组合物a/kg种子)7220制剂1(0.5g游霉素组合物a/kg种子)7818用制剂1和celest处理产生相当数量的健康植物。进一步地，用制剂1处理产生的健康幼苗是标记浓度的2.8倍。与未经处理的对照相比，用制剂1处理的种子产生18倍的健康幼苗。实施例5对小麦幼苗发育的影响该实施例证明了游霉素组合物a(表20中的游霉素i)对温室中天然感染的小麦种子的发芽以及幼苗的发育和健康的影响。小麦种子被真菌混合物(18％镰刀菌fusariumspp.和64％微座孢microdochiumspp.)天然侵染。将制剂1与商业对照(如上文实施例3中所述)进行比较。以0.4g、0.2g和0.1g游霉素组合物a/kg种子的剂量使用制剂1。以0.2ml/kg种子的剂量率使用处理种子并将其播种在托盘中，并由随机分区系统放入温室中。在第15天，测量健康和不健康植物的百分比。结果列于下表7中。表7处理剂％健康幼苗％不健康幼苗未经处理的1280celest净0.2ml/kg种子7816制剂1(0.4g游霉素组合物a/kg种子)8016制剂1(0.2g游霉素组合物a/kg种子)6432制剂1(0.1g游霉素组合物a/kg种子)4650与商业对照相比，用0.4g游霉素组合物a/kg种子的制剂1处理的种子发育成相似数量的健康植物和不健康植物。实施例6对小麦幼苗发育的影响该实施例证明了游霉素组合物a(表20中的游霉素i)对田间天然感染的小麦种子的发芽以及幼苗的发育和健康的效果。小麦种子被真菌混合物(60％镰刀菌fusariumspp.和23％微座孢microdochiumspp.)天然侵染。将制剂1与两种商业对照进行比较：和(如上文实施例3和实施例4中所述)。以1g和0.5g游霉素组合物a/kg种子的剂量使用制剂1。以0.2ml/kg种子的剂量率使用且以0.1ml/kg种子的剂量率使用处理种子并将其播种至田间，其中每种处理在20平方米的土地中重复4次。2.5个月后，计算每种处理的每平方米的植物。在季节结束时，收获小麦并确定每种处理的产量。结果列于表8中。表8处理植物/m2产量(q/ha)未经处理的10878.7celest净0.2ml/kg种子17886.6redigo0.1ml/kg种子22085.5制剂1(1g游霉素组合物a/kg种子)21488.1制剂1(0.5g游霉素组合物a/kg种子)20688.7观察到，在所有测试剂量下，制剂1具有与相当的效果。还观察到，制剂1优于并且用制剂1处理产生植物的数量是未经处理的对照的两倍。在所有测试剂量下，用制剂1、redigo或celeste处理获得的小麦产量(q/ha)相当，但用制剂1处理产生的产量是未经处理的对照的1.1倍。实施例7对玉米幼苗发育的影响该实施例证明了游霉素组合物a(表20中的游霉素i)对玉米幼苗发育的影响。将制剂1和对照游霉素制剂(表20中的游霉素f)施用于玉米种子(每种处理150粒种子)。剂量列于下表9中。在该研究中还包括一组未经处理的对照种子。处理之后，使用寒冷测试方案孵育种子，该方案模拟种植季节可能发生的不利的寒冷和潮湿天气条件。该测试的结果用于预测一批种子在田间类似条件下的性能。为了完成该测试，种子首先用饱和田间土壤和纸巾包装成卷，然后将这些卷放在塑料袋中。转动种子使得最接近胚胎的仁的一侧落在土壤上。田间土壤的来源是之前种植玉米的土地，已知土壤中含有大量未鉴定的霉菌种类。在寒冷条件下孵育一段时间后(在8℃下在黑暗中孵育7天，然后在25℃下在光照下孵育7天)，记录正常幼苗数、异常幼苗数和死亡种子数。结果总结在下表9中。在实验过程中，没有观察到由游霉素处理产生的植物毒性。表9处理健康植株％异常植株％死亡种子％未经处理0298对照游霉素制剂(0.25g对照游霉素/kg种子)11485制剂1(0.25g游霉素组合物a/kg种子)141373对照游霉素制剂(0.5g对照游霉素/kg种子)12781制剂1(0.5g游霉素组合物a/kg种子)201268与对照游霉素制剂相比，当施用制剂1时观察到的健康幼苗的数量出乎意料地更大。具体地，在0.25g/kg种子和0.5g/kg种子的游霉素组合物a的剂量下分别产生数量为比相同剂量的对照游霉素的1.3倍和1.7倍的健康植株。实施例8对蘑菇发育的影响该实施例证明了游霉素组合物a(表20中的游霉素i)对蘑菇的发育和产量的影响。获得了用食用菌种双孢蘑菇(agaricusbisporus)的蘑菇菌种接种的污染的iii期堆料。用堆料填充盒子并在21℃的温度下在黑暗中孵育4天以使菌丝体生长到盒子的表面。孵育期后，在堆料表面可见白色蘑菇菌丝体。然后用3厘米的外罩(casting)覆盖堆料。然后，将30ml制剂1或对照游霉素制剂(表20中的游霉素f)喷洒到外罩上，使最终浓度为0.4g/m2。将每种实验处理组合物重复8次，并将未处理的对照重复5次。处理后，将盒子在黑暗中在18℃的温度下进一步孵育。在测试期间，通过每隔几天将足够和等量的水(～10ml)喷洒到每个盒子的外罩装上来防止外罩表面的脱水。为了刺激蘑菇形成，在培养的第14天和第21天向每个盒子中添加额外的100ml水。在30天的时间内，每天收获蘑菇，通过测量蘑菇的重量来确定总产量。孵育30天后每种处理的蘑菇的总产量和产量增加总结在表10中。未处理的对照物对照设定为0％。表10处理平均产量(克)产量增加(％)对照141(n＝5)0对照游霉素制剂186(n＝8)+32％制剂1194(n＝8)+38％与对照游霉素制剂相比，出乎意料地观察到制剂1使产量增加6％。实施例9对柑橘类果实发育的影响该实施例证明了游霉素组合物a(表20中的游霉素i)对柑橘类果实，橙子发育的影响。与商业对照和未处理的对照相比，制剂1和对照游霉素制剂(表20中的游霉素f)用于确定对瓦伦西亚橙(valenciaoranges)的真菌病害的效力。商业对照是m(具有45％甲基硫菌灵作为活性成分的杀真菌剂，fruitgardllc)。使用众所周知的方法制备橙色腐败霉菌指状青霉(penicilliumdigitatum)的孢子悬浮液。然后用浓度为10000孢子/ml的孢子悬浮液通过液浸法接种橙子，并使用导向喷淋器对橙子进行处理。对于每次处理，使用333个橙子分成2盒(166和167个橙子)。处理剂浓度为1000ppm，得到约1mg处理剂/dm2的橙皮。商业对照以0.3克活性成分/单位的剂量使用。处理后，将橙子储存在室温下。15天后，测定发霉橙子的数量并计算发霉橙子的百分比。结果总结在下表11中。表11*ai＝活性成分即使在具有挑战性的生长条件下，比未经处理的对照相比，经制剂1处理的橙子产生的发霉果实(44个橙子)仍然较少。观察到的关于制剂1的结果与对照游霉素制剂获得的结果相似，其中，对照游霉素制剂在研究结束时发现了54个发霉果实。这些结果是出乎意料的，因为比对照游霉素制剂相比，制剂1含有更低百分比的活性成分，但它们的效果是相当的。该研究的结果还证实，用制剂1处理产生的发霉橙子(54个发霉橙子)与商业对照(50个发霉橙子)的数量相似。该实验的结果证明，与未经处理的对照相比，制剂1和对照游霉素制剂均表现较优的性能，且具有相似的效果，尽管与对照游霉素制剂相比，制剂1具有低得多的实际游霉素含量(60％相比95％)。两种处理剂在500ppm和1000ppm的剂量下与商业产品的效果类似。实施例10对大豆抗禾谷镰刀菌fusariumgraminearum的效果该实施例证明了游霉素组合物a(表20中的游霉素i)对接种禾谷镰刀菌的大豆的影响。该试验在温室内进行。试验期间的天气条件比平时更凉爽，但在实验期间温室温度设定为85°f。该研究以13种处理，6次重复试验来进行。每个托盘使用总共104个接种单元，并且每个托盘代表每种处理的一次重复。每种处理剂的重复被隔开避免紧挨在一起，从而便于评估。托盘每天接受水两次直至发芽，然后水减少到每天一次。在播种之前，在种植前一天用1份接种物对10份土壤的剂量用禾谷镰刀菌(fusariumgraminearum)接种土壤混合物。然后用土壤填充托盘并在第1周手动播种(每个单元一粒种子)并在第2周种子发芽。在该研究中使用了13种不同的处理，包括商业对照4fs(种子处理杀真菌剂，syngenta)、未经处理的对照、对照游霉素制剂(表20中的游霉素f)和包含游霉素组合物a(表20中的游霉素i)的制剂1。每种处理在几种浓度下进行测试。在该研究中进行了两次评估以评估游霉素组合物a的有效性；标准计数和活力。在种植后9、12、16、22、29和35天对每份进行评估。在评估当天，对每个托盘上的每个幼苗进行计数，并以0～10打分目测评估整个托盘的活力。结果列于下表12中。表12处理＊平均活力植物数量的最后计数植物损失(％)maxim4fs1.25gai/100kg8.4896cmaxim4fs2.5gai/100kg6.67912cmaxim4fs5gai/100kg7.57917bcmaxim4fs10gai/100kg7.46532abc游霉素组合物a2.5gai/100kg7.97719bc游霉素组合物a5gai/100kg8.57323bc游霉素组合物a10gai/100kg8.17224bc游霉素组合物a20gai/100kg7.84750ab对照游霉素2.5gai/100kg7,94752ab对照游霉素5gai/100kg7.84552ab对照游霉素10gai/100kg7.53662a对照游霉素20gai/100kg7.74552ab未经处理的对照7.43563aai＝活性成分*如实施例1中所示配制游霉素a和对照游霉素当与未经处理的对照相比时，测试的所有制剂对禾谷镰刀菌(fusariumgraminearum)产生了一定程度的控制。该实施例的结果进一步证明在不同处理之间植物损失的显著不同。未经处理的对照托盘和用对照游霉素制剂处理的托盘具有最高的植物损失数(高达65％)并且显示低平均活力，而制剂1和商业对照显示最低的植物损失数和高平均活力。当与商业对照相比，游霉素组合物a在其最低剂量(分别为1.25gai/100kg和2.5gai/100kg)下显示出类似的病害控制。游霉素组合物a出乎意料地优于对照游霉素。实施例11防止冠腐病霉菌(crownrotmold)的香蕉收获后处理冠腐病是香蕉的收获后病害，其可能由不同的霉菌种类引起，包括例如香蕉炭疽病菌(colletotrichummusae)、半裸镰刀菌(fusariumpallidoroseum)和层生镰刀菌(fusariumproliferatum)。该实施例证明了游霉素组合物a(表20中的游霉素i)对香蕉上的冠腐病霉菌的影响。使用18.14kg处于成熟阶段1的盒装出口香蕉。香蕉在包装工厂中没有接受任何的杀真菌剂处理。用冠腐病病原体(10^5个分生孢子/ml)的混合物接种所有香蕉，并在接种后2小时施用处理剂。处理剂以前一天稀释的含水和alumbrenh4al(so4)2.12h2o(2％)混合物的形式施用。然后用喷枪施用该处理剂，并且每种处理在一盒香蕉上进行。评估的处理剂列表列于下表13中。还包括未接种的处理剂以确定农场的自然接种压力。在施用处理剂后，将香蕉储存在14℃的冷藏室中14天。经过这段时间后，将温度升至17℃，以在成熟前预先冷却香蕉。在温度稳定后，引入浓度为100～150ppm的乙烯24小时。诱导5天后(乙烯处理)，香蕉已经达到成熟阶段5-6并对香蕉进行评价。表13处理剂和剂量(ppm)＊活性成分制剂1(250ppm)游霉素组合物a制剂1(500ppm)游霉素组合物a对照游霉素制剂(250ppm)(表20中的游霉素f)对照游霉素对照游霉素制剂(500ppm)(表20中的游霉素f)对照游霉素制剂1(500ppm)+mertect22sl(500ppm)游霉素组合物a+噻苯咪唑对照游霉素制剂(500ppm)+mertect22sl(500ppm)对照游霉素+噻苯咪唑制剂1(500ppm)+magnate75sg(750ppm)游霉素组合物a+抑霉唑对照游霉素制剂(500ppm)+magnate75sg(750ppm)对照游霉素+抑霉唑magnate75sg(750ppm)+mertect22sl(500ppm)抑霉唑+噻苯咪唑bankit250sc(250ppm)+mertect22sl(500ppm)嘧菌酯+噻苯咪唑未经处理但经接种的果实----未经处理且未经接种的果实----＊如实施例1中所示配制游霉素a和对照游霉素。评估每串的病害发生率和严重程度。如果观察到任何病损，无论大小如何，都认为该串已被感染。然后根据观察到的冠腐病的严重程度将香蕉分成不同的组：(1)具有完全健康冠的香蕉串，(2)具有受影响的面积小于25％的冠腐病损的香蕉串，(3)具有受影响的面积为25-50％的冠腐病损的香蕉串，以及(4)具有受影响的面积超过50％的冠腐病损的香蕉串。表14总结了对香蕉的病害发生率和严重程度的评估结果。表14tbz＝噻苯咪唑izl＝抑霉唑azt＝嘧菌酯使用infostat统计分析进行病害发生率参数的多重比较检验(图氏检验，tukeytest)。第2列中的字母指的是图氏检验；相同系列的字母跟随的各个条目彼此之间没有统计学差异(p＝0.05)。病害发生率(％)的结果和冠腐病症状的统计分析总结在上表14中。对于每个测试的剂量，制剂1和对照游霉素制剂具有相当的效果。这些结果是出乎意料的，因为与对照游霉素制剂相比，制剂1含有更低百分比的活性成分。尽管与对照游霉素制剂相比，制剂1具有低得多的实际游霉素含量(60％相比95％)，但它们的效果相当。另外，当制剂1与其他杀真菌剂组合时，制剂1的表现出乎意料地优于对照游霉素制剂的表现。在所有测试的处理剂中，与izl(750ppm)组合使用的制剂1(500ppm)(表14，条目7)出乎意料地观察到具有最高的效力。实施例12对香蕉抗斐济球腔菌(mycosphaerellafijiensis)的影响该实施例证明了游霉素组合物a(表20中的游霉素i)用于控制斐济球腔菌的效力。一个实验单元有9株香蕉植株，以植株之间间隔3m种植在土地中。该试验采用完全随机设计，每种处理重复三次。在经处理的植物之间的边界行种植马尼拉蕉麻(musatextilis)，一种耐受黑色香蕉叶斑病的香蕉植物。使用马达鼓风机施加所有处理剂以使总处理剂体积为23l/公顷。使用油(5l/公顷)和1％imbirex乳化剂来使测试的处理剂以油-水乳剂来施用。测试的杀真菌剂处理剂以及它们各自的活性成分和稀释度(或浓度)列于下表15中。在第一次施用后13周进行实验测试处理剂的最后一次施用。在整个研究过程中共进行了16次连续施用。表15*使用的制剂如实施例1中所示。**对照游霉素制剂作为包含油的悬乳剂提供对于每种处理剂，每周评估以下变量：每株植物的总叶数、具有条纹的最低龄叶片(即，被感染的最低龄叶片(yli))、有斑点的最低龄叶片(yls)和病害严重程度。香蕉叶中症状的首次出现与感染的严重程度相关：出现症状的叶片数量越少，感染程度越高。一旦第一次施用的叶片到达位置#4时即对病害进行评估，并且此后每7天进行一次评估，直到最后一次施用处理剂后一周。应当指出，位置4是叶片4。使用由gauhl修正的斯托弗(stover)标度(下表16)评估响应于黑色香蕉叶斑病的处理剂，并且评估结果显示在下表17中。表16.gauhl修正的斯托弗标度，用于确定病害等级等级说明0没有病害症状1条痕至最多10处斑点211处斑点至叶子区域的5％36～15％416～33％534～50％6超过50％表17处理＊平均yli平均yls叶片平均数平均严重程度1、对照游霉素制剂+代森锌1.0l/公顷4.75.46.60.712、制剂1+代森锌1.0l/公顷4.75.46.90.743、对照游霉素制剂+代森锌0.5l/公顷4.45.06.50.864、制剂1+代森锌0.5l/公顷4.65.37.30.855、对照游霉素制剂*4.14.77.21.406、代森锌0.5l/公顷4.65.37.40.957、代森锌1.0l/公顷4.95.77.00.638、代森锌2.0l/公顷4.85.67.10.609、矿物油4.24.97.31.3510、未经处理的植物3.34.37.42.17*对照游霉素制剂作为包含油的悬乳剂提供除油处理剂(表17，条目5和8)外，所有处理剂的严重程度均低于1，而未经处理的植株的严重程度高于2。所有经处理的植株均具有4至5的平均yli，而未处理的植物的平均yli为3.3。两个结论都表明所有处理剂都具有杀真菌作用。这些结果是出乎意料的，因为制剂1含有比对照游霉素制剂更低的活性成分百分比，但它们的效力是相当的。制剂1对真菌的效力与具有活性成分代森锰锌的商品的效果相同。实施例13制剂1作为土壤施用剂对镰刀菌(fusarium)的作用该实施例证明了配制的游霉素组合物a(制剂1；表20中的游霉素i)作为土壤施用剂对香蕉植株上的镰刀菌(fusariumspp.)的作用。使用制剂1和对照游霉素制剂(表20中的游霉素f)来确定对温室试验中香蕉幼苗上的真菌病害的作用。按照众所周知的方法使用混凝土搅拌机来使镰刀菌(fusariumspp.)侵染土壤。将被侵染的土壤与下表19中提到的各种处理剂充分混合。对于一些处理，将制剂1和对照制剂涂覆在沙粒上，并在混凝土搅拌机中将这些沙粒与盆栽土壤混合。用被侵染且经处理的土壤填充种植有两个月大的香蕉植株的盆。对于每种处理剂，重复三次。种植后6周，将植物连根拔起，切成两半，并根据下表18中的等级对切边上的内部侵染症状进行打分。表18等级说明00％变色2＜5％离散的坏死点35～30％坏死431～50％坏死550～90％坏死690～100％坏死表19处理剂和剂量平均等级显著性检验制剂1(100ppm)4cd制剂1(1000ppm)0.7ab对照游霉素制剂(100ppm)3.7cd对照游霉素制剂(1000ppm)0a涂覆在沙上的游霉素组合物a(100ppm)4cd涂覆在沙上的游霉素组合物a(1000ppm)0a涂覆在沙上的对照游霉素(100ppm)3bc涂覆在沙上的对照游霉素(1000ppm)0.7ab未处理的镰刀菌侵染5d未处理的无镰刀菌侵染0a表19显示了每种处理剂的三次重复的基于表18的平均等级。使用方差分析(anova)，随后进行费氏(fisher′s)保护下的最小显著差异检验来计算显著性。在1000ppm下，涂覆在沙上的制剂1和游霉素组合物a对镰刀菌(fusariumspp.)具有与对照游霉素制剂相似的效果，并且所有这三种都与未经镰刀菌侵染的未经处理的植株相似。由于涂覆在沙上的制剂1和游霉素组合物a含有60％游霉素(较低量的活性成分)，而对照游霉素含有95％游霉素活性成分，这些结果是令人惊讶的。实施例14不同批次的粗制游霉素和经纯化的游霉素的分析该实施例表明粗制游霉素制剂和经纯化的游霉素制剂之间的差异。获得并分析了几批如上所述制备的粗制游霉素和商业批次的经纯化的游霉素(95％)。表20表示这些批次的一些特征。表20不同批次游霉素中的游霉素、脂肪酸(fa)、蛋白质和淀粉的浓度。1d0.5表示颗粒的平均粒径实施例15粗制游霉素与纯化的游霉素相比的效果该实施例证明了粗制游霉素的改进的生物利用度和杀真菌作用。使用无菌棉签，将酿酒酵母(saccharomycescerevisiae)(至少105cfu/ml)分布在包含有30ml马铃薯葡萄糖琼脂(pda；carlroth；ph约为6)的直径为145mm培养皿中。将直径为6mm的滤纸盘(whatman，antibioticassaypaper，aa级)装入来自不同来源的3mm游霉素的10μl溶液中。在应用过滤器后，将皮氏培养皿在4℃的冰箱中孵育16小时，以使游霉素扩散到琼脂中。16小时后，从琼脂中取出滤盘，将皮氏培养皿倒置在30℃的烘箱中。抑制区的大小表明从滤盘释放的游霉素对抗酵母的效果。在烘箱中孵育24小时后，使用数字卡尺确定抑制区域的大小。数据以平方毫米表示，并且是六次重复的平均值。如上文所述，确定3mm游霉素对皮氏培养皿中酵母生长的影响。数字代表以平方毫米表示的抑制区域。表21.游霉素的生物利用度处理剂抑制区域(mm2)游霉素h405游霉素i30620161027348游霉素f183相比纯化的游霉素f，游霉素h、游霉素i和样品号20161027包含细胞物质并且显示出更大的抑制区域。实施例16粗制游霉素与纯化的游霉素相比的效果该实施例证明了粗制游霉素的改进的杀真菌效果。与上文实施例15中所述的方法相同。除非另有说明，否则如上文所述，确定3mm游霉素对皮氏培养皿中酵母生长的效果。下面表22和23中描述的是几次独立实验的结果，所有实验全部重复六次。数字代表以平方毫米表示的抑制区域的平均表面。表22.游霉素的生物利用度处理剂抑制区域(mm2)游霉素h299161110279160915259游霉素a286140206167与纯化的游霉素e相比，游霉素h和游霉素a包含细胞物质并显示出更大的抑制区域。表23显示了用实施例15中所述的方法获得的结果，不同之处在于将40μl游霉素溶液加入到滤纸盘中。表23.游霉素的生物利用度处理剂抑制区域(mm2)游霉素a819游霉素e585与纯化的游霉素e相比，游霉素a包含细胞物质并显示出更大的抑制区域。表24.游霉素的生物利用度处理剂抑制区域(mm2)160915407游霉素a367游霉素e242与纯化的游霉素e相比，游霉素a和批次160915包含细胞物质并显示出更大的抑制区域。表25.游霉素的生物利用度处理剂抑制区域(mm2)游霉素g355游霉素d295游霉素f142与纯化的游霉素f相比，游霉素g和游霉素d包含细胞物质并显示出更大的抑制区域。这三种批次的游霉素均来自同一供应商。应注意，包含少于0.05％(w/w)脂肪酸的游霉素d的结果与包含0.3％(w/w)脂肪酸的游霉素g的结果相似。表26.游霉素的生物利用度处理剂抑制区域(mm2)游霉素a311160915296游霉素e188表27.游霉素的生物利用度处理剂抑制区域(mm2)160915313游霉素a338游霉素e179与纯化的游霉素e相比，游霉素a和游霉素b以及批次160915包含细胞物质并显示出更大的抑制区域。这些批次的游霉素是从同一供应商处获得的。表28.游霉素的生物利用度处理剂抑制区域(mm2)游霉素a182游霉素e110游霉素h246与纯化的游霉素e相比，游霉素a和游霉素h包含细胞物质并显示出更大的抑制区域。这些批次的游霉素是从同一供应商处获得的。表29.游霉素的生物利用度处理剂抑制区域(mm2)游霉素d149游霉素f100游霉素g207与纯化的游霉素f相比，游霉素g和游霉素d包含细胞物质并显示出更大的抑制区域。这三种批次的游霉素均来自同一供应商。应注意，包含少于0.05％(w/w)脂肪酸的游霉素d的结果与包含0.3％(w/w)脂肪酸的游霉素g的结果相似。实施例17包含细胞物质的游霉素与纯化的游霉素相比的效果该实施例证明了粗制游霉素组合物的增强的杀真菌效果。使用无菌棉签将酿酒酵母(saccharomycescerevisiae)(至少105cfu/ml)分布在含有10mlpda琼脂(carlroth，ph约6)的直径为90mm的皮氏培养皿上。将直径为6mm的滤纸盘(whatman)装入50μl含有浓度为3mm游霉素的溶液。抑制区域的大小是从样品盘释放的游霉素的结果。在烘箱中孵育24小时后，使用数字卡尺测量抑制区域的大小。测量后，取出滤盘并放置在与前次相似的新的皮氏培养皿上(90mm，含有10mlpda琼脂和通过棉签分布酿酒酵母(saccharomycescerevisiae)(至少105cfu/ml))。更换过滤器24小时后，再次测量抑制区域。数据以平方毫米表示并且是四次重复的平均值。表30.游霉素的生物利用度与纯化的游霉素e相比，游霉素a包含细胞物质并显示出更大的抑制区域。实施例18包含细胞物质的游霉素对苹果上的葡萄孢(botrytis)的抗真菌效果该实施例证明了包含细胞物质的游霉素组合物对抗苹果上的葡萄孢(botrytis)的抗真菌效果。测试的水果：有机产品/skal认证的苹果(cvelstar)。skal是荷兰的一个半政府组织，负责控制荷兰的有机生产。在第3天检查苹果的伤口。在100ppm的游霉素浓度下，对具有不同蛋白质和淀粉含量的游霉素进行测试。将制剂研磨至如表31所示的粒径。表31批次#d0.5(μm)d0.9(μm)游霉素a1404282.59.8游霉素b1512014.616.1游霉素d20160716-327.318.8游霉素e140423817.9游霉素f201501065.116.4游霉素c1508205.413.5使用的病原体：含有2*106个孢子/ml的灰葡萄孢(botrytiscinerea)孢子悬浮液。应用：用软木钻孔机破坏苹果的果皮，毫米，深入果实约0.5cm，每个苹果有2个伤口。通过移液管将40微升新鲜制备的灰葡萄孢(b.cinerea)孢子悬浮液施加到每个伤口上。随后，使孢子悬浮液风干4小时。然后，通过移液管将50微升如上表所示的处理剂施用于每个伤口。将所有果实保持在室温(20℃)下。孵育3天后检查苹果的伤口。通过测量苹果与未处理对照相比的腐烂表面积(平方毫米)来计算效力(参见表31和表32)。重复：对于所有的处理剂的苹果实验，均在各自具有两个伤口的六个独立苹果上进行，每种处理剂产生12个伤口。结果这些实验的结果示出了在表32中。表32处理剂效力(％)游霉素a88.1游霉素b68.6游霉素c63.7游霉素e54未经处理的对照0未感染真菌的对照100与均包含细胞物质的游霉素a、b和c相比，经纯化的游霉素e显示出对苹果的较低效力。这些批次的游霉素是从同一供应商处获得的。表33处理剂效力(％)游霉素d68游霉素f60.2未经处理的对照0未感染真菌的对照100与包含细胞物质的游霉素d相比，经纯化的游霉素f显示出对苹果的较低效力。这些批次的游霉素是从同一供应商处获得的。实施例19粗制游霉素组合物对苹果上的葡萄孢(botrytis)的抗真菌作用该实施例证明了粗制游霉素组合物对苹果上的葡萄孢(botrytis)的抗真菌作用。如实施例18中所述进行该实验。使用游霉素a和游霉素e，并在不同时间点记录数据，如表34所示。表34从这些数据可以清楚地看出，包含细胞物质的游霉素a具有比纯化的游霉素e更高的效力。实施例20包含细胞物质的游霉素对苹果上的葡萄孢(botrytis)的抗真菌效果如实施例19中所述进行该实验。使用不同浓度的游霉素a和游霉素e，并在不同时间点记录数据，如表35所示。表35包含细胞物质的游霉素a具有比纯化的游霉素e更高的效力。实施例21对豆类的立枯丝核菌(rhizoctoniasolani)的作用该实施例证明了具有蛋白质和淀粉的游霉素对接种了立枯丝核菌(rhizoctoniasolani.)的豆类的作用。试验在温室内进行。在播种前一周，用＞10e6菌落形成单位的立枯丝核菌(rhizoctoniasolani)人工接种土壤。通过将孢子形成的菌丝体混合在土壤中来进行接种。在1个皮氏培养皿中，以每升土壤混合50ml水接种土壤。在播种前一周，土壤保持湿润和温暖以提供真菌生长的最佳条件。每个箱子(crate)播种100粒种子，每个箱子代表每种处理的一次重复。每种处理都有五次重复。每种处理剂的浓度为每100千克种子2.5克游霉素，相当于约10毫升下述制剂。在每个评估日期，计数每块土地中健康植株或已感染丝核菌(rhizoctonia)的患病植株的数量。在播种后3、6、13和21天进行评估。通过以下等式计算效力：制剂包括250克/升(g/l)游霉素f、游霉素i和游霉素c；25g/latlasg5002-l；10g/lmetasperse550s；200ppmacticide(杀菌剂)mbs；252g/l甘油；6g/lrhodorsil426r；77g/l2％rhodopol23水溶液；和480g/l水。因为游霉素g是80％游霉素，游霉素的量减少到185g/l，并加入545g/l的水。效力＝((处理后的存活植株×100)/未处理的接种的存活植物)-100。结果列于下表36：表36与均包含细胞物质的制剂游霉素g、i和c相比，制剂游霉素f是经纯化的并且显示出对豆类的较低效力。值得注意的是，与制剂游霉素f中95％的游霉素浓度相比，制剂游霉素g的游霉素浓度为80％，制剂i和制剂c的游霉素浓度为60％。浓度的差异未得到补偿，游霉素g、i和c具有比纯化的制剂游霉素f具有更高的效力。实施例22.在含有和不含结构化剂时，具有表面活性剂吐温20和emulsogensf8的制剂中游霉素的稳定性如表37所示制备游霉素的预混物。将游霉素预混物的成分在dvno-(glenmillsinc.clifton，nj)上研磨，直至获得2μm至3μm的粒径。表37游霉素预混物g/l游霉素95％263延胡索酸二钠ph7缓冲液100卡松(kathon)40ppm水637总量1000对于粗制游霉素批次，制备了类似的预混物。向该游霉素预混物中加入表38中示出的其他成分。混合所得制剂直至得到均匀溶液。分析以下参数以评估稳定性：粘度(表示为mpa.s)，粒径(μm)，(游霉素晶体的)沉淀相的分离(形成液体顶层或底层)。如果在54℃孵育2周后参数保持恒定(未增加等)，则认为制剂稳定。用表面活性剂聚乙二醇脱水山梨糖醇单月桂酸酯(tweensigma)和二(2-乙基己基)磺基琥珀酸钠(emulsogensf8；clariant)制备含有和不含结构化剂黄原胶(rhodopol23，rhodia)的第一制剂。表381.表示加入2％rhodopol的水溶液，2.-：不稳定；+：稳定的悬浮浓缩物制剂。测试了与表面活性剂结合使用的5种不同类型的结构化剂的效果。对一些类型的结构化剂测试了超过1种化合物。总共进行了9次测试。rhodorsil426r(聚[氧(二甲基亚甲硅烷基)]；bluestarsilicones，lyon，france)是消泡剂。表39.含有结构化剂rhodopol23时，具有表面活性剂吐温20和metasperse550s(croda)的制剂中游霉素的稳定性。100g/lnata100g/lnata游霉素预混物40％250250tween202525壳聚糖2020hcl36％1010木质素磺酸钙100100metasperse550s7.57.5甘油252252rhodorsil426r55rhodopol23(2％)058水352.5294.5总量10221022稳定性-+结论：如果存在结构化剂(rhodopol23)，则表面活性剂吐温20和metasperse550s的组合可用于制备稳定的粗制游霉素制剂。表40.含有和不含结构化剂rhodopol23时，具有表面活性剂atlasg5002-l和metasperse550s的制剂中游霉素的稳定性。150g/lnata150g/lnata游霉素预混物60％250250atlasg5002-l2525metasperse550s1010异草定(isocil)50ppm50ppm甘油252252rhodorsil426r66rhodopol23(2％，在水中)550水502557总量11001100使用异草定(5-溴-3-异丙基-6-甲基尿嘧啶；lonza，breda，荷兰)作为防腐剂。通过将甘油、异草定、atlasg5002-l和metasperse550s添加到水中来产生具有atlasg5002-l和metasperse550s的制剂。接下来，添加80％量的消泡剂rhodorsil426r。此后，温和地加入游霉素并混合30分钟。将制剂在dispermat上研磨30分钟至平均粒径为1.5μm。此后，添加rhodorsil426r的剩余部分。最后，缓慢加入rhodopol23。结果：获得的具有rhodopol23的制剂是稳定的。没有观察到持久性泡沫和沉淀物。不含rhodopol23的制剂不稳定。表41*14厘米上3毫米顶层(2.1％)**14厘米上2毫米顶层(1.4％)***14厘米上2毫米顶层(1.4％)结论：表面活性剂atlasg5002-l、metasperse550s和结构化剂rhodopol23的组合确实得到了稳定的制剂。而不含rhodopol23的制剂是不稳定。表42.含有和不含结构化剂rhodopol23时，具有不同量表面活性剂atlasg5002-l和metasperse550s的制剂中的游霉素的稳定性。60g/lnata游霉素粗制物60％100atlasg5002-l20metasperse550s8杀菌剂50ppm甘油252rhodorsil426r6rhodopol23(2％，在水中)77水637总量1100使用杀菌剂(2-甲基异噻唑-3(2h)-酮；thor，canterbury，england)作为防腐剂。表43结论：表面活性剂atlasg5002-l+metasperse550s与结构化剂rhodopol23的组合得到了稳定的制剂，而不含rhodopol23的制剂是不稳定的。用不同供应商提供的不同批次的游霉素重复该实验。表44结果：未观察到持久性泡沫。结论：表面活性剂atlasg5002-l+metasperse550s与结构化剂rhodopol23的组合+来自不同来源的游霉素得到了稳定的制剂，而不含rhodopol23的制剂是不稳定的。实施例23.具有atlasg5002-l和metasperse550s和不同结构化剂的制剂中游霉素的稳定性通过向水中加入甘油、atlasg5002-l和metasperse550s，产生如表45中所示的具有atlasg5002-l和metasperse550s的制剂。然后，加入5g/l的消泡剂rhodorsil426r。此后，温和地加入游霉素并混合30分钟。将制剂在dispermat上研磨30分钟至平均粒径为2μm。此后，加入剩余的1g/lrhodorsil426r，然后加入200ppm的杀菌剂mbs。接着，加入表46和表47中所示的结构化剂，将所得悬浮浓缩物搅拌3小时并放置过夜。静置12小时后，将制剂在54℃下不受干扰地储存2周。使用布氏dv-e粘度计以12rpm和60rpm根据cipac方法mt192确定粘度。表45.制剂组成cf800-154g/l粗制游霉素(游霉素h)250atlasg5002-l25metasperse550s10杀菌剂mbs(200ppm)甘油252rhodorsil426r6结构化剂见下水557总量1100表46、结构化剂的列表结构化剂名称供应商黄原胶rhodopol23rhodia糖蛋白和多糖的天然混合物阿拉伯树胶carlroth绿坡缕石硅镁土30basf绿坡缕石硅镁土50basf基于非离子聚氨酯的试剂borchi凝胶0626omgborchersgmbh聚酯嵌段共聚物rheostrux100pwcroda琥珀酰聚糖胶rheozanrhodia表47、结构化剂的使用量在加速稳定性储存测试后确定配制的混合物的粘度。结果显示在表48中。表48.制剂的粘度测试制剂η12rpm(mpa.s)η60rpm(mpa.s)rhodopol23(2％sol.)1290504阿拉伯树胶800278硅镁土3010077硅镁土50137103borchi凝胶062615901090rheostrux100pw700370rheozan1400268就胶体稳定性而言，在测试的试剂之间没有观察到大的差异。在所有情况下，顶层非常小。就平均粒径而言，在测试的试剂之间没有观察到大的差异。如表49所示，在54℃下储存2周后，所有情况下的平均粒径约为2微米。表49.粒径结构化剂d0.5(μm)d0.9(μm)rhodopol23(2％溶液)2.19.0阿拉伯树胶2.18.5硅镁土302.312.9硅镁土502.29.5borchi凝胶06262.08.1rheostrux100pw2.08.0rheozan2.08.5结论：来自不同来源的游霉素+表面活性剂atlasg5002-l+metasperse550s与不同结构化剂的组合产生稳定的制剂。当前第1页12当前第1页12