一种棉露尾甲人工饲料的制备及用其饲养的方法与流程

本发明属于昆虫饲养技术领域，具体涉及一种棉露尾甲人工饲料的制备及用其饲养的方法。

背景技术：

棉露尾甲(haptoncusluteolus)是鞘翅目露尾甲科的一种重要昆虫，广泛分布于热带和亚热带地区。国内外相关报道其主要为仓储害虫、棉花害虫和果树害虫，同时也有其在意大利蜜蜂和无刺峰巢穴取食的报道。蜜蜂和甲虫类是重要的传粉昆虫，nadel和penang(1994)报道，包括干果露尾甲(carpophilusmutilatus)、棉露尾甲在内的露尾甲科昆虫是番荔枝属水果的重要传粉昆虫。在我国，棉露尾甲曾被报道为仓储害虫和棉花害虫。李先金(1981)通过在棉田的观察发现，有棉露尾甲出现的棉花结铃率明显提高，初步提出了棉露尾甲对棉花的传粉作用。罗峰等(2002，2004)对棉露尾甲的深入研究发现，其成虫在取食棉花花粉的同时，成虫足上携带花粉的特殊构造有助于其在植物上传粉，因此该虫在棉花上是一种重要的中性昆虫。同时罗峰等(2002，2004)发现棉露尾甲在丝瓜、南瓜等植物上均有分布，其传粉价值并不一定局限于棉花。

近年来转基因作物在全球范围内的大量种植，是否会对一些有益昆虫及其它非靶标害虫产生负面影响引起人们的持续关注。作为我国推广面积最大的转基因植物，尽管已报道转cry1ab/cry1ac融合基因抗虫棉花对棉露尾甲无负面影响。但根据转基因植物的个案评价原则，转其它bt杀虫蛋白基因和rnai抗虫棉花的潜在应用，需要进行其对棉露尾甲等在内的昆虫进行安全性评价。因此，在室内大批量、稳定地饲养棉露尾甲种群有助于进行转基因棉花的安全性评价。同时，稳定及成本低廉的饲养技术有助于深入研究棉露尾甲在设施农业中的传粉价值

在露尾甲科昆虫的人工饲养技术中，目前已经有大量的成功报道。peng和williams(1990)曾报道一种人工饲料可饲养5属11种露尾甲昆虫；曹东风和轩静渊(1997)利用玉米快餐粉复配人工饲料成功的实现了黄斑露尾甲的人工饲养。在棉露尾甲方面，前人曾进行了利用天然寄主丝瓜花和棉花饲养的初步研究(罗峰.设施农业传粉昆虫--棉露尾甲的基础研究【硕士学位论文】.湖北:华中农业大学,2004；陈利珍；雷朝亮；马伟华；牛长缨；罗峰.用于评价转基因棉花安全性的一种访花昆虫棉露尾甲的人工饲养方法[p]。cn101911925a公开了适用于转基因棉花安全性评价的访花昆虫棉露尾甲的人工饲养方法，用多菌灵胶悬剂在浸泡棉种过夜，将棉种于塑料大棚中培养使其开花，采集花朵，去除瓣取雄蕊、雌蕊、花药和花粉作为棉露尾甲成虫饲养的食料，棉露尾甲成虫在室内置于带盖的透明塑料瓶中，食料饲养，隔天更换，收集棉露尾甲成虫产过卵的花；培养皿底部覆一层含水棉田土，将棉露尾甲成虫产过卵的花置于其上，直至其卵的孵化和化蛹，取出棉露尾甲的蛹，将棉露尾甲的蛹转移到含水的培养皿中培养，获得棉露尾甲成虫。

无论棉花或是丝瓜花的取得都有一定的限制。同时，在饲养过程中，棉花或丝瓜花的保存、处理及更换均较为麻烦，不利于长期的饲养。

故需开发出一种完全不依赖天然寄主的简易人工饲料配方及配套的饲养方法，以实现棉露尾甲的周年室内大量饲养，便于进行相关研究

技术实现要素：

本发明的目的是针对上述现状，旨在提供一种饲料配制方便，原料极易取得，能实现棉露尾甲的大规模、连续继代饲养，方便人工饲养的棉露尾甲人工饲料的制备及用其饲养的方法。

本发明目的实现方式为，一种棉露尾甲人工饲料的制备方法，取蜂蜜100g-120g，加水70g-120g，充分搅拌混匀；混匀后加干酵母粉180g-220g，充分搅拌混匀至膏料；用封口膜封口，膏料在室温下发酵24小时，随后搅拌混匀放入4℃冰箱储存，得棉露尾甲室内饲养人工饲料。

用所制备的棉露尾甲人工饲料饲养的方法，具体步骤如下：

1)棉露尾甲成虫饲养及卵的收集：

将棉露尾甲成虫置于成虫饲养盒中，盒盖扎有多个小孔，盒盖与盒子之间放一块防逃逸透明纱网，取带底层纸片的parafilm封口膜，四边折叠，中间涂上所需量的棉露尾甲饲养人工饲料，供棉露尾甲成虫食用；饲养盒中放入用水浸湿的棉花球；

待棉露尾甲成虫产卵后，取出并更换新的带饲料parafilm封口膜；取出在parafilm封口膜折叠缝中的卵，以供下一步饲养；

所述棉露尾甲饲养人工饲料是步骤1)中4℃冰箱储存的饲料；

2)幼虫饲养及化蛹：

在培养皿底部铺一层润湿的脱脂棉，上覆一层滤纸，再在培养皿中间放一滤纸，滤纸上面放足够的棉露尾甲饲养人工饲料；挑取在parafilm封口膜折叠缝中的卵于饲料旁边，以供棉露尾甲幼虫孵化后取食；培养皿盖上扎有透气小孔，盖好培养皿，用parafilm封口膜封口；待棉露尾甲幼虫长至3龄后，将有棉露尾甲幼虫的滤纸直接转入铺有湿度为15％土壤的塑料培养皿中，以供老熟棉露尾甲幼虫钻入土中化蛹；

所述棉露尾甲饲养人工饲料是步骤1)中4℃冰箱储存的饲料；

塑料培养皿盖上同样扎有透气小孔，盖好的塑料培养皿用parafilm封口膜封口，待成虫羽化破土后用吸虫器吸入成虫饲养盒中，如步骤1)法饲养。

本发明具有以下突出的优点：

1、本发明所述的人工饲料由蜂蜜、干酵母粉和水配成，配制方便，相比于以前的丝瓜花和棉花等天然饲养材料，原料极易取得，解决了棉露尾甲饲料的周年供应问题；

2、产卵便于观察，易于采集，可显著提高棉露尾甲成虫的产卵量；

3、棉露尾甲人工饲料及配套饲养方法是根据棉露尾甲的取食等生物学习性基础上研制而成，可实现棉露尾甲的大规模、连续的继代饲养。

采用本发明可实现棉露尾甲的大量繁殖，为棉露尾甲的室内研究创造了基础。

附图说明

图1两种饲料喂养下棉露尾甲成虫前期的存活情况比较。

图2两种饲料喂养下棉露尾甲成虫单日产卵量比较。

图3本发明所用成虫饲养盒结构示意图。

具体实施方式

根据发明人的观察，在自然界中，棉露尾甲成虫在新开放的棉花花朵中取食花蜜和花粉，然后产卵于花瓣上。幼虫孵化后，棉花花朵已基本枯萎，棉露尾甲幼虫取食腐败的花瓣、花蜜和花粉等。枯萎花朵落在土上时，棉露尾甲老熟幼虫爬出花朵钻入土中化蛹。花蜜是棉露尾甲生长发育的能源物质，而花粉和花瓣则提供棉露尾甲生长所需的蛋白质源。因此，本申请人考虑利用市售纯蜂蜜代替花蜜提供能量，市售干酵母粉代替花粉、花瓣提供蛋白质，而酵母粉发酵后的蜂蜜更切合棉露尾甲幼虫取食腐败花朵的习性。经反复试验，获得了本发明的棉露尾甲饲养的人工饲料。

本发明的一种棉露尾甲人工饲料的制备方法，按质量百分比取蜂蜜25％～30％，加水15％～30％，充分搅拌混匀；混匀后加质量百分比为45％～55％的干酵母粉，充分搅拌混匀至膏料；用封口膜封口，膏料在室温下发酵24小时，随后搅拌混匀放入4℃冰箱储存，得棉露尾甲人工饲料。

用所制备的棉露尾甲人工饲料饲养的方法，具体步骤如下：

1)棉露尾甲成虫饲养及卵的收集：

参照图3，将棉露尾甲成虫置于1±0.4l正方形成虫饲养盒3中，盒盖1扎有多个小孔以通透空气，盒盖与盒子之间放一块100目的透明纱网2，以防棉露尾甲逃逸。每盒放置50头左右。剪取8cm×5cm的parafilm封口膜4，勿去掉底层纸片。根据棉露尾甲趋折缝产卵的习性，将parafilm封口膜四边折叠0.5cm，以供棉露尾甲成虫在折叠缝内产卵。

封口膜中间涂上所需量的，在4℃冰箱内储存的露尾甲饲养人工饲料6，供棉露尾甲成虫食用。饲养盒中放入用水浸湿的棉花球5以保持湿度。

待棉露尾甲成虫产卵后，取出并更换新的带饲料parafilm封口膜。用毛笔或尖头镊子在parafilm封口膜的折叠缝中取出棉露尾甲卵，以供下一步饲养。

2)幼虫饲养及化蛹：

在直径9cm的培养皿底部铺一层0.5cm厚润湿的脱脂棉，上覆一层滤纸。再在培养皿中间放一5cm×5cm滤纸，滤纸上面放足够的棉露尾甲人工饲料。挑取在parafilm封口膜折叠缝中的卵于饲料旁边，以供棉露尾甲幼虫孵化后取食；培养皿盖上扎有5-10个透气小孔，盖好培养皿，用parafilm封口膜封口，防止棉露尾甲幼虫逃逸。待棉露尾甲幼虫长至3龄后，将有棉露尾甲幼虫的滤纸直接转入铺有0.5cm厚，且湿度为15％土壤的塑料培养皿中，以供老熟幼虫钻入土中化蛹。

塑料培养皿盖上同样扎有10个透气小孔，盖好的培养皿用parafilm封口膜封口，防止棉露尾甲老熟幼虫逃逸。待棉露尾甲成虫羽化破土后用吸虫器吸入成虫饲养盒中。

下面举出本发明棉露尾甲人工饲料的具体实施例。

实施例1、取市售的洋槐蜂蜜100g放入500ml烧杯中，加100g水，充分搅拌混匀；混匀后加200g干酵母粉，充分搅拌混匀至膏料；用封口膜封口，膏料在室温下发酵24小时，让酵母充分发酵，随后搅拌混匀放入4℃冰箱储存，得棉露尾甲饲养人工饲料。

实施例2、取市售的洋槐蜂蜜120g放入500ml烧杯中，加80g水，充分搅拌混匀；混匀后加200g干酵母粉，充分搅拌混匀至膏料；用封口膜封口，膏料在室温下发酵24小时，让酵母充分发酵，随后搅拌混匀放入4℃冰箱储存，得棉露尾甲饲养人工饲料。

实施例3、取市售的洋槐蜂蜜120g放入500ml烧杯中，加100g水，充分搅拌混匀；混匀后加180g干酵母粉，充分搅拌混匀至膏料；用封口膜封口，膏料在室温下发酵24小时，让酵母充分发酵，随后搅拌混匀放入4℃冰箱储存，得棉露尾甲饲养人工饲料。

实施例4、取市售的洋槐蜂蜜110g放入500ml烧杯中，加70g水，充分搅拌混匀；混匀后加220g干酵母粉，充分搅拌混匀至膏料；用封口膜封口，膏料在室温下发酵24小时，让酵母充分发酵，随后搅拌混匀放入4℃冰箱储存，得棉露尾甲饲养人工饲料。

实施例5、取市售的洋槐蜂蜜100g放入500ml烧杯中，加80g水，充分搅拌混匀；混匀后加220g干酵母粉，充分搅拌混匀至膏料；用封口膜封口，膏料在室温下发酵24小时，让酵母充分发酵，随后搅拌混匀放入4℃冰箱储存，得棉露尾甲饲养人工饲料。

本申请人将本发明制备的棉露尾甲人工饲料与天然饲料丝瓜花饲养下棉露尾甲的生长发育指标作了研究。

饲养方法如下：

棉露尾甲成虫交配产卵在将棉露尾甲成虫置于1±0.4l正方形成虫饲养盒3中进行，盒盖1扎有多个小孔以通透空气，盒盖与盒子之间放一块100目的透明纱网2，每盒放置50头左右。8cm×5cm的parafilm封口膜4四边折叠0.5cm，封口膜中间放饲料。每盒放置15对棉露尾甲成虫。待棉露尾甲成虫产卵后，在parafilm封口膜的折叠缝中取出卵以备用。

在直径9cm的培养皿底部铺一层0.5cm厚润湿的脱脂棉，上覆一层滤纸，再在培养皿中间放一5cm×5cm滤纸放置于培养皿中间，滤纸上面放足够的饲料；挑取在parafilm封口膜折叠缝中的卵于饲料旁边，以供幼虫孵化后取食；培养皿盖上扎有10个透气小孔，盖好培养皿，用parafilm封口膜封口，防止棉露尾甲幼虫逃逸。待棉露尾甲幼虫长至3龄后，将有棉露尾甲幼虫的滤纸直接转入铺有0.5cm厚且湿度为15％土壤的塑料培养皿中，以供老熟幼虫钻入土中化蛹。

塑料培养皿盖上同样扎有10个透气小孔，盖好的塑料培养皿用parafilm封口膜封口，待棉露尾甲成虫羽化破土后用吸虫器吸入成虫饲养盒中。

两种饲料饲养下棉露尾甲的生长发育指标观察：取120头刚孵化的棉露尾甲幼虫，装入放有不同饲料的5cm塑料培养皿中，3龄后转入放土的5cm培养皿中，10头一组。每0.5天观察记录幼虫发育程度和存活率，成虫饲养盒同上。棉露尾甲幼虫期人工饲料每皿每天放入50mg，丝瓜花每皿每天放入1瓣。棉露尾甲成虫羽化后记录1日龄棉露尾甲雌雄成虫体重、体长等数据。随后每个处理配单对10组，配对后的棉露尾甲单对放入直径5cm的培养皿中，培养皿盖上扎有5-10个小孔以透气，其内置一块充分润湿的脱脂棉保湿，中间放置四周折边的parafilm封口膜人工饲料每皿每天放入10mg，丝瓜花每皿每天放入1瓣。每天更换饲料和parafilm封口膜，连续观察20天，观察记录单雌棉露尾甲每日产卵量和孵化率。单对棉露尾甲中雌虫死亡时停止观察，棉露尾甲雄虫死亡的补同日龄的备用棉露尾甲雄虫一只。采用one-wayanova分析两种饲料饲养的棉露尾甲生长发育指标间差异。两种饲料饲养下棉露尾甲的生命指标采用t测验方法分析，所有统计分析利用spss17.0统计软件进行。

试验结果见图1，从两种饲料处理下棉露尾甲的存活曲线看，棉露尾甲在两种饲料饲养下均可以稳定的存活。

而从初孵幼虫饲养开始，在第9天，人工饲料喂养的棉露尾甲存活率急剧下降，显著低于丝瓜花处理(p<0.05)，原因为人工饲料处理下棉露尾甲发育历期缩短，到第9天时已基本羽化。到第10天两种处理下的棉露尾甲均完成成虫羽化，人工饲料饲养下存活率为78.40±1.33(％)，丝瓜花饲养下存活率为83.56±3.32(％)，两者无显著差异。

通过分析两种处理下棉露尾甲不同发育阶段历期，发现人工饲料处理下，棉露尾甲幼虫期显著缩短，而蛹期相比于丝瓜花处理的相对延长。整体上，人工饲料处理下，棉露尾甲成虫前期相比于丝瓜花处理较为缩短，但差异不显著(表1)。

表1两种饲料喂养下棉露尾甲成虫前期不同阶段历期比较

表中数据为平均数±标准误，数据后标有不同字母表示经t测验，两种处理存在显著差异

(p＝0.05)。

两种饲料喂养下棉露尾甲成虫生物学特性及20天内繁殖力比较结果见表2。

表2两种饲料喂养下棉露尾甲成虫生物学特性及20天内繁殖力比较

表中数据为平均数±标准误，数据后标有不同字母表示经t测验，两种处理存在显著差异

(p＝0.05)。

如表2所示，除棉露尾甲雌虫的体重外，两种饲料喂养下1日龄棉露尾甲性比、体重和体长均无显著差异。通过统计棉露尾甲单雌20天内产卵量发现，人工饲料处理下的棉露尾甲累积产卵量显著高于丝瓜花处理个体(p<0.05)，在卵孵化率上，两者无显著差异。通过比较20天内棉露尾甲单雌逐日产卵量，发现人工饲料处理个体多数天内棉露尾甲单雌产卵量高于丝瓜花处理个体(见图2)。

综合以上结果可以发现，本发明中的棉露尾甲人工饲料饲养与天然饲料丝瓜花喂养相比，棉露尾甲生长发育历期和死亡率两者无显著差异，但棉露尾甲人工饲料饲养下，棉露尾甲的单雌产卵量显著高于天然饲料饲养。因此，棉露尾甲人工饲料饲养在节省时间和成本的同时，又可以获得更多的棉露尾甲个体，优势明显。