本发明属于农作物育种领域，具体地说，涉及一种利用激素处理提高花生栽野远缘杂交成功率的方法。
背景技术：
花生是重要油料作物及优质蛋白质的来源，但是栽培种花生遗传基础比较狭窄，限制花生育种进程，利用野生种扩宽其遗传基础是重要手段。花生属近缘野生种具有许多对病虫害高度抗性甚至免疫、高含油量、高蛋白质的材料，但是由于种间差异和生殖隔离产生种胚败育，使得常规杂交很难获得成功，使之成为利用花生近缘野生种质优异基因源的主要障碍。目前，花生远缘杂交主要是常规方法，杂交成针率和成果率较低，不利于花生近缘野生种的利用。因此，急需开发一种可提高花生远缘杂交成功率的杂交方法，促进花生近缘野生种的利用。技术实现要素：为了解决现有技术中存在的问题，针对上述不足，本发明旨在于提供一种利用激素处理提高花生栽培种和野生种远缘杂交成功率的方法，适用于花生远缘杂交育种研究。为了实现本发明目的，本发明的技术方案如下：本发明提供一种利用激素处理提高花生栽野远缘杂交成功率的方法，所述方法的核心内容在于：以栽培种为母本，以近缘野生种为父本，进行杂交；并在杂交后先后使用赤霉素、生长素和细胞分裂素进行处理，以提高花生远缘杂交成功率。本发明通过选择四大类型花生栽培种与近缘野生种杂交，统计成针率和成果率，发现密枝亚种(龙生型和普通型)与近缘野生种杂交成针率和成果率明显高于疏枝亚种(多粒型和珍珠豆型)，表明密枝亚种可以作为桥梁转移野生花生优良基因到疏枝亚种；采用正反交组配方式，明确栽培种花生作母本和作父本对杂交成针率和成果率的影响，研究发现栽培种花生作母本杂交的成针率和成果率明显高于栽培中花生作父本杂交的成针率和成果率，表明栽培种花生作母本杂交成功率更高。因此，所述栽培种优选为密枝亚种(龙生型和普通型)，代表品种有“红安直立”、“贺县青豆”、“飞龙乡”、“平南石腰豆”。所述近缘野生种包括：a.stenosperma,a.batizocoi,a.villosa,a.corentina。进一步地，在授粉后，立刻使用赤霉素处理花柱基部子房处；在果针伸长，但还未入土以前(相当于赤霉素处理后18-22天)，利用生长素处理果针；在子房开始膨大时(相当于生长素处理后12-18天)，利用细胞分裂素处理果针。更进一步地，在本发明所述的方法中，赤霉素的使用浓度为44～120ppm，优选为100ppm；生长素的使用浓度为50～100ppm优选为100ppm；细胞分裂素的使用浓度为20～80ppm，优选为50ppm。在本发明所述方法中，杂交方式与杂交手段可采用本领域常规使用的杂交方式与杂交手段。作为一种示例性说明，所述杂交手段具体为：在栽培种与近缘野生种的初花期，每天下午4点-7点用镊子轻轻拨开母本的花蕾，去除雄蕊，同时去除该节位的其他花蕾，保证杂交果的唯一性，并在节位用线绳标记；第二天早晨收集父本花粉，并用镊子将花粉涂在母体植株去除雄蕊的柱头上。本领域技术人员应当知晓，为了使栽培种和近缘野生种的花期重合，需根据栽培种与近缘野生种的花期时间不同，选择合适的时间进行栽培种与近缘野生种的播种。本发明涉及到的原料或试剂均为普通市售产品，涉及到的操作如无特殊说明均为本领域常规操作。在符合本领域常识的基础上，上述各优选条件，可以相互组合，得到具体实施方式。本发明的有益效果在于：本发明利用花生属亲缘关系与栽培花生正反交，获得杂交的基本信息，再利用不同浓度、不同种类的激素处理花基部和果针，促进果针和荚果的发育，达到提高花生远缘杂交成果率的目的，在花生远缘杂交实践中具有重要利用价值。具体实施方式下面结合实施例对本发明做进一步的解释说明。需要理解的是以下实施例的给出仅是为了起到说明的目的，并不是用于对本发明的范围进行限制。本领域的技术人员在不背离本发明的宗旨和精神的情况下，可以对本发明进行各种修改和替换。下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。实施例1本方法具体步骤如下：播种期选择：根据栽培种与近缘野生种的花期时间不同，选择合适时间播种。人工杂交技术：在栽培花生与近缘野生种的初花期，每天下午4点-7点用镊子轻轻拨开母本的花蕾，去除雄蕊，同时去除该节位的其他花蕾，保证杂交果的唯一性，并在节位用线绳标记；第二天早晨收集父本花粉，并用镊子将花粉涂在母体植株去除雄蕊的柱头上。3)花生类型与近缘野生种亲和性研究：选择四大类型花生与近缘野生种杂交(表1)，统计成针率和成果率，密枝亚种(龙生型和普通型)与近缘野生种杂交成针率和成果率明显高于疏枝亚种(多粒型和珍珠豆型)，表明密枝亚种可以作为桥梁转移野生花生优良基因到疏枝亚种；采用正反交组配方式，明确栽培花生作母本和作父本对杂交成针率和成果率的影响(表2)，栽培花生作母本杂交的成针率和成果率明显高于栽培花生作父本，表明栽培花生作母本杂交更容易成功。表1花生栽培种不同类型与野生种杂交亲合性统计表表2父母本组配方式对栽野杂交亲和性的影响组合成针率％成果率％组合成针率％成果率％贺粤1号×correntina9.13.0correntina×贺粤1号4.20伏花生×correntina10.33.3correntina×伏花生3.80西农6号×villosa11.23.1villosa×西农6号2.50广柳×villosa12.53.5villosa×广柳1.00汕油14×villosa13.43.7villosa×汕油1400广柳×stenosperma15.23.9stenosperma×广柳1.50飞龙乡×stenosperma29.710.3stenosperma×飞龙乡4.80粤油116×stenosperma14.53.8stenosperma×粤油11600红安直立×stenosperma28.59.2stenosperma×红安直立4.50台山珍珠×stenosperma13.63.8stenosperma×台山珍珠2.304)花生花柱基部子房处理技术：配置44、50、88、100、120ppm不同浓度的赤霉素(ga)，在授粉后，立即用蘸有赤霉素的湿棉球处理花柱基部子房处(表3)。5)花生果针处理技术：配置50、100、150ppm的生长素(iaa)，在果针伸长，但还未入土以前(赤霉素处理20天后)，在已显露的果针上用蘸有生长素的棉球均匀处理；配置20、50、80ppm浓度的细胞分裂素(kn)，在子房开始膨大时(生长素处理15天后)，在果针上用蘸有细胞分裂素的棉球均匀处理(表4)。6)果针标识：在2)中标记处，果针伸长后，用彩色线重新标记；同时加强田间水肥、病虫害的管理，直到荚果成熟。表3激素处理对栽培种与野生种间杂交成功率的影响表4不同浓度激素处理对杂交成功率的影响应当理解的是，对上述实施例所用试剂或原料的用量进行等比例扩大或者缩小后的技术方案，与上述实施例的实质相同。虽然，上文中已经用一般性说明及具体实施方案对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。当前第1页12