一种利用大球盖菇富集桑枝中1-脱氧野尻霉素的方法与流程

本发明涉及1-脱氧野尻霉素富集技术领域，具体涉及一种利用大球盖菇富集桑枝中1-脱氧野尻霉素的方法。

背景技术

桑树特有的活性成分1-脱氧野尻霉素(dnj)是一种哌啶多羟基生物碱，对人和动物有多种药理作用：能高效抑制哺乳动物体内α-1,4-葡萄糖苷酶活性，减缓肠道对糖分的吸收，是治疗糖尿病的高效低毒药物成分；对小鼠β-16肺黑色细胞肿瘤的转移有抑制作用；还能够通过改变hiv-1病毒的gp120蛋白的糖基化，抑制hiv-1的复制，在治疗艾滋病等病毒病方面具有很好的潜力。

桑树的枝条中富含dnj，每年桑树剪伐会产生大量的枝条，是桑蚕生产的大宗副产物。近年来业界非常重视桑枝资源的开发利用，用桑枝培养食用菌是其开发利用途径之一。利用废弃桑枝条栽培富含多种生物活性物质的食用菌，形成高效生态产业链，可有效促进蚕桑资源的多元化开发，而且相对于直接从桑枝中提取活性物质的开发利用途径，其投入成本更低，生产技术更简便，更具可行性。

大球盖菇(strophariarugosoannuata)别名皱环球盖菇、皱球盖菇等；其隶属于担子菌门、伞菌纲、伞菌目、球盖菇科、球盖菇属。大球盖菇是人工栽培的著名珍稀食用菌，是联合国粮农组织(fao)向发展中国家推荐栽培的食用菌之一，也是国际菇类交易市场上的十大菇类之一，它菇体色泽艳丽，腿粗盖肥，肉质细嫩，柄脆，味道鲜美，清香可口，干菇浓香，享有“山林珍品”的美誉。大球盖菇与其它食用菌相比，具有更高的营养价值，其氨基酸、粗脂肪、蛋白质等含量显著高于其他食用菌品种，同时还具有抗癌、降血糖的作用，是食用和药用价值较高的珍稀食用菌。

目前有报道某些种类的食用菌对桑枝中的dnj具有富集能力，但不同种类的食用菌对桑枝屑基料中的dnj的富集能力存在较大差异，多数种类的食用菌不具备dnj的富集能力，而且食用菌的代谢过程较为复杂，因此筛选对dnj具有优异富集能力的食用菌具有十分重要的意义。

技术实现要素：

针对上述现有技术的不足，本发明的目的是提供一种利用大球盖菇富集桑枝中dnj的方法。本发明能够有效的将桑枝中的dnj富集到大球盖菇中，不仅能充分利用桑业废弃物资源，同时还提高了大球盖菇的营养及保健价值。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

本发明的第一方面，提供大球盖菇在富集桑枝中1-脱氧野尻霉素中的应用。

本发明的第二方面，提供一种利用大球盖菇富集桑枝中1-脱氧野尻霉素的方法，包括以下步骤：

(1)将大球盖菇栽培料在55-65℃温度条件下进行堆料发酵处理，所述大球盖菇栽培料中含有30-70％(重量百分比)的桑枝木屑；

(2)待堆料发酵处理后的大球盖菇栽培料降温至30℃以下时进行铺料播种；

(3)播种后及时铺盖用石灰水浸泡过的稻草作为覆盖物保湿；待菌丝长到发酵料厚度的2/3以上时开始覆土；

(4)播种20天后根据料堆情况酌情补水，发菌完成后灌大水催菇，同时增大通风量；

(5)出菇期维持空气湿度在85-95％，空气温度超过30℃时及时通风喷水；

(6)待大球盖菇子实体成熟时及时进行采收，即实现将桑枝中的1-脱氧野尻霉素富集到大球盖菇的子实体中。

优选的，步骤(1)中，堆料发酵处理的条件为：向大球盖菇栽培料中加入生石灰，然后加水预湿，混合均匀；建成发酵堆，使发酵堆的含水量在60-70％，发酵堆中每隔30-40cm打一透气孔，建堆完成后用草帘遮盖保湿；待料堆温度升至55-65℃时，保持24h进行第一次翻堆，待料堆温度再次升至55-65℃时，保持24h进行第二次翻堆，发酵至栽培料呈茶褐色，料中有大量白色放线菌，无酸臭味，质地松软，即发酵结束。

更优选的，所述生石灰的加入量为大球盖菇栽培料重量的1-2％。

优选的，步骤(1)中，所述大球盖菇栽培料中含有70％的桑枝木屑。

更优选的，所述大球盖菇栽培料由以下重量百分比的原料制成：

桑枝木屑70％、稻壳30％。

优选的，步骤(2)中，所述铺料播种具体为：每铺一层大球盖菇栽培料，点一层大球盖菇菌种，共三层料两层菌种，建成梯形堆。

更优选的，步骤(2)中，第一层大球盖菇栽培料的厚度为8-10cm，第二层大球盖菇栽培料的厚度为10-12cm，第三层大球盖菇栽培料的厚度为5cm。

更优选的，步骤(2)中，所述大球盖菇菌种是由大球盖菇母种经扩繁得到，扩繁过程包括：大球盖菇母种、原种和栽培种的培养。其中：

大球盖菇母种的培养方法为：将平板上活化好的大球盖菇菌株接种到无菌液体培养基中，置于26℃恒温摇床中160r/min培养7d；所述无菌液体培养基是按马铃薯200.0g，葡萄糖20.0g，蒸馏水1000ml配方配制而成。

大球盖菇原种的培养方法为：将培养后的大球盖菇母种接种至原种培养基中，置于26℃条件下培养箱中培养；所述原种培养基由以下质量百分数的原料配置而成：麦粒96％，麦麸2％，石膏2％；原种培养基的含水量为65％。

大球盖菇栽培种的培养方法为：将培养后的大球盖菇原种接种至栽培种培养料中，置于26℃条件下培养箱中培养，菌丝长满后作为大田栽培时用；所述栽培种培养料由以下质量百分数的原料配置而成：木屑30％，玉米芯30％，稻壳20％，麦麸18％，石膏粉1％，生石灰1％；栽培种培养料的含水量为65％。

优选的，步骤(3)中，覆盖物的厚度为1-2cm。

优选的，步骤(3)中，覆土所选用的材料为表层土与草炭土按质量比1:1混合并加水润湿，使含水量保持在20-25％，覆土厚度为2-4cm。

本发明的有益效果：

(1)本发明首次发现大球盖菇对桑枝中的dnj具有非常好的富集作用。利用桑枝栽培大球盖菇，不仅能充分利用桑业废弃物资源，同时还能将桑枝中的dnj富集到大球盖菇中，提高了大球盖菇的营养及保健价值。

(2)大球盖菇栽培料中的桑枝比例会影响大球盖菇的菌丝长速、子实体产量、出菇期长短和dnj含量，本发明对大球盖菇栽培料中的桑枝比例进行了优化考察，结果发现70％桑枝为桑枝大球盖菇综合利用的最优配方，可以最大效率的提高桑枝废料的利用率，同时保证大球盖菇最好的保健价值。

(3)利用大球盖菇富集桑枝中dnj的过程中，对于含有桑枝的大球盖菇栽培料是在55-65℃温度条件下进行堆料发酵处理，与其他食用菌的栽培相比，其对栽培料的处理温度较低，能够避免桑枝中的dnj因高温而被破坏分解，从而进一步提高了大球盖菇对桑枝中dnj的富集效果。

附图说明

图1：不同桑枝比例子实体出菇期天数。

图2：不同桑枝比例子实体各潮次总产量。

图3：不同桑枝比例三潮菇dnj含量。

具体实施方式

应该指出，以下详细说明都是例示性的，旨在对本申请提供进一步的说明。除非另有指明，本文使用的所有技术和科学术语具有与本申请所属技术领域的普通技术人员通常理解的相同含义。

本发明中的“桑枝木屑”是指将桑枝条粉碎至0.5cm左右的小木屑。

正如背景技术部分所介绍的，利用食用菌富集桑枝中的dnj可以有效提高食用菌的营养价值。但目前报道仅黑木耳、灵芝和猴头菇三种食用菌对dnj具有富集作用，而且这三种食用菌的富集能力相差较大，说明对桑枝中的dnj的富集能力并非是食用菌的共性。加之食用菌的种类繁多，食用菌的代谢过程较为复杂，因此很难预知某种食用菌是否具有富集桑枝中dnj的能力。

本发明意外的发现大球盖菇对桑枝中的dnj具有非常好的富集作用，由此提出了本发明。

本发明利用大球盖菇对桑枝中的dnj进行富集，富集过程中所面临的第一个技术难点是如何优化大球盖菇栽培料中桑枝木屑的比例。桑枝木屑的加入比例不仅关系到桑枝废料的利用率，同时还影响大球盖菇的菌丝长速、子实体产量、出菇期长短和dnj含量。经研究发现，在桑枝木屑比例为70％时，子实体出菇期为33天，总产量为14282.94g/m²，子实体中dnj平均含量为0.1142mg/g，因此，综合来看，大球盖菇栽培料中桑枝木屑的重量百分比为70％时，其综合利用效果最优，可以最大效率的提高桑枝废料的利用率，同时保证大球盖菇最好的保健价值。

另外，大球盖菇的栽培条件也会影响对桑枝中的dnj的富集效果，首先是对于大球盖菇栽培料的处理及发酵，大球盖菇的堆料温度在60℃左右，温度较低，而其他食用菌在栽培过程中需要将料袋放于蒸锅中，100℃保持10h以上。因此，本发明中对于大球盖菇栽培料的处理方式有利于保持桑枝中的dnj的活性，进而提高大球盖菇对桑枝中的dnj的富集效果。

大球盖菇栽培过程中，铺料播种、播种后铺盖覆盖物及覆土、发菌期管理和出菇期管理等一系列栽培条件是一个有机的整体，各栽培步骤相辅相成、协同促进，在提高了大球盖菇子实体产量的同时，也提高了对桑枝中的dnj的富集效果。

为了使得本领域技术人员能够更加清楚地了解本申请的技术方案，以下将结合具体的实施例详细说明本申请的技术方案。

本发明实施例和对比例中所用的试验材料均为本领域常规的试验材料，均可通过商业渠道购买得到。

其中，大球盖菇菌株：来自山东农业大学微生物重点实验室，编号为(大t)；供试桑枝(2016年11月上旬于泰安市马庄镇蚕桑实验基地提供)。

1-脱氧野尻霉素(dnj)标准品(纯度>98％)购自sigma公司；芴甲氧羰酰氯(fmoc-cl，纯度>99％)，购自sigma公司；甲醇、乙腈(hplc专用色谱纯)、甘氨酸等均购自泰安市普天公司。

agilentlc1200液相色谱仪；agilentzorbaxsb-c18色谱柱(4.6×250mm)购自美国安捷伦公司；超声波清洗器(sk5200lh)购自上海汉克科学仪器有限公司；中草药粉碎机(fw135)购自天津市泰斯特仪器有限公司；台式冷冻离心5417r(德国eppendorf)；数显恒温水浴锅hh-2(国华电器有限公司)。

实施例1：利用大球盖菇富集桑枝中1-脱氧野尻霉素

(1)大球盖菇栽培料的配制：

将桑枝条粉碎至0.5cm左右的小木屑，晾干备用；将粉碎后的桑枝条和稻壳混合，作为大球盖菇栽培料。

上述大球盖菇栽培料中，桑枝的重量百分比为70％，稻壳的重量百分比为30％。

(2)大球盖菇栽培料的处理及发酵：

向大球盖菇栽培料中加入占大球盖菇栽培料重量2％的生石灰，加入水进行预湿，使培养料吸足水分。将预湿好的培养料混合均匀，建成底宽1.5m左右、顶宽0.8m左右、高1.5m左右，长度适宜的发酵堆。每隔30-40cm用直径8cm左右的木棒打孔，以改善料堆的透气性，防止料堆中部和底部缺氧造成厌氧发酵。建堆过程中注意补水，使含水量在65％左右，建堆完成后用草帘遮盖保湿，必要时加盖塑料膜。每天测量料堆20cm左右处的温度，若覆盖塑料膜每天通风2-3次，增加膜下氧气含量。

料堆温度升到60℃左右时，保持24h进行第一次翻堆。翻堆时注意将外层料翻入内层，内层料翻入外层，若发现料堆过干可补充适量澄清石灰水，其余操作同第一次建堆一致。待温度再次升至60℃左右后保持24h，进行第二次翻堆，建堆升温后经常检查培养料发酵情况，确保料堆无酸臭味，培养料松软、呈茶褐色，料中有大量白色放线菌，即发酵结束，可用于播种。

(3)栽培场地的选择及处理：

大球盖菇栽培可在丰产林、果园、桑园、设施大棚等场地栽培。

栽培场地处理及准备：分别清理栽培场地内的石块、杂物、杂草及其他植物根茎，撒石灰粉后整地建畦，畦宽1m，比地面高5cm左右。暴晒7d左右以减少病虫危害，灌大水洇湿土壤。另取适量肥沃富含腐殖质的表层土进行暴晒处理，作为覆土材料备用。

(4)大球盖菇栽培及管理：

①播种播种前在整个栽培区洒上生石灰，料温降到30℃以下铺料播种，采用双层播种，即铺一层料播一层菌种，如此重复，共铺三层料，播二层菌种。底层铺料厚度为8-10cm，将菌种掰成核桃大小，采用梅花形点播，点距10-12cm，中层铺料10-12cm，再播一层菌种，上层料厚5cm左右，主要是用于覆盖菌种，起保温保湿、促进菌种正常萌发吃料的作用。播种完毕，用木板拍平料面，并稍加压实呈梯形。用直径3-4cm的木棒从料面垂直向料底打孔，孔距约20-30cm，便于发菌期间增加氧气含量。

②覆土及覆盖物建堆播种后及时铺盖用石灰水浸泡过的稻草作为覆盖物，以保持栽培料的湿度，覆盖物厚度1-2cm。待菌丝长到发酵料2/3以上开始覆土，覆土材料选用晒好的表层土与草炭土1:1混合并加水润湿，使含水量保持20％-25％。覆土厚度3cm左右，覆土后重新打孔。

③发菌期管理发菌前期无需补水，播种20d后根据料堆情况酌情补水。补水时应时常注意料堆侧面的情况，控制水速及水量，防止侧面覆土被水冲走。发菌完成后，灌大水催菇，同时增大通风量，促进菌丝扭结形成原基。

④出菇期管理出菇期空气湿度维持在90％左右，天气晴朗时在中午前后及时喷水，少量多次，增加空气湿度及覆盖物湿度。空气温度过高时(超过30℃)及时通风喷水，确保菇体正常生长。

出菇期间应注意光照强度，必要时要及时加盖遮阳网，防止光照过强，引起灼伤，降低菇质。若光照太弱则影响原基形成分化，子实体颜色变浅，影响产量品质，根据天气及时控制大棚卷帘情况。出菇期间应该加强通风，降低二氧化碳浓度，良好的通风透光情况能够使子实体健壮，整齐度较高。

⑤病虫害防治大球盖菇整个栽培过程中无需使用农药，发菌期主要防治杂菌污染，若出现鬼伞、盘菌、粘菌等杂菌及时拔除即可，若发现局部感染青霉、绿霉或毛霉时及时将感染部位挖掉，并洒少量石灰，补充新土，拢平畦面。菌丝长满后及时悬挂黄板，引诱飞虫，防止菇蚊、菇蝇等的危害，同时使用糖醋液引诱果蝇、小地老虎等。

⑥采收及转潮管理当子实体基本成熟，菌幕尚未破裂时，及时采收。采收时一只手捏着菇脚轻轻转动然后向上提起，另一只手按在菇脚周围，稳固料面及土层，防止带动附近菇蕾。每次采收时间固定在16:00左右，此时经过午间高温期，温度逐渐回落，高温会促使子实体迅速成熟、开伞。此时采收统计一级菇产量可较准确反映大球盖菇子实体耐高温情况。

一潮菇采收结束后，清理菌床，补平覆土，停水养菌5-7d，待菌丝恢复后再灌大水，增大通风进行催菇。

桑枝中的1-脱氧野尻霉素即富集到了采收的大球盖菇子实体中。

实施例2：利用大球盖菇富集桑枝中1-脱氧野尻霉素

(1)大球盖菇栽培料的配制：

将桑枝条粉碎至0.5cm左右的小木屑，晾干备用；将粉碎后的桑枝条和稻壳混合，作为大球盖菇栽培料。

上述大球盖菇栽培料中，桑枝的重量百分比为50％，稻壳的重量百分比为50％。

其余操作同实施例1。

实施例3：利用大球盖菇富集桑枝中1-脱氧野尻霉素

(1)大球盖菇栽培料的配制：

将桑枝条粉碎至0.5cm左右的小木屑，晾干备用；将粉碎后的桑枝条和稻壳、杨树木屑混合，作为大球盖菇栽培料。

上述大球盖菇栽培料中，桑枝的重量百分比为30％，稻壳的重量百分比为50％，杨树木屑的重量百分比为20％。

其余操作同实施例1。

对比例1：

将桑枝条粉碎至0.5cm左右的小木屑，晾干备用；将粉碎后的桑枝条和稻壳混合，作为大球盖菇栽培料。

上述大球盖菇栽培料中，桑枝的重量百分比为90％，稻壳的重量百分比为10％。

大球盖菇栽培料的处理及发酵、栽培场地的选择及处理、大球盖菇栽培及管理过程同

实施例1。

对比例2：

将桑枝条粉碎至0.5cm左右的小木屑，晾干，作为大球盖菇栽培料。

上述大球盖菇栽培料中，桑枝的重量百分比为100％。

大球盖菇栽培料的处理及发酵、栽培场地的选择及处理、大球盖菇栽培及管理过程同

实施例1。

对比例3：

将桑枝条粉碎至0.5cm左右的小木屑，晾干，与稻壳和杨树木屑混合作为大球盖菇栽培料。

上述大球盖菇栽培料中，桑枝的重量百分比为10％，稻壳的重量百分比为50％，杨树木屑的重量百分比为40％。

大球盖菇栽培料的处理及发酵、栽培场地的选择及处理、大球盖菇栽培及管理过程同

实施例1。

对比例4：

将稻壳和杨树木屑混合作为大球盖菇栽培料。

上述大球盖菇栽培料中，桑枝的重量百分比为0％，稻壳的重量百分比为50％，杨树木屑的重量百分比为50％。

大球盖菇栽培料的处理及发酵、栽培场地的选择及处理、大球盖菇栽培及管理过程同

实施例1。

试验例1：

考察实施例1-实施例3、对比例1-对比例4，即大球盖菇栽培料中不同桑枝比例对大球盖菇子实体出菇期及产量的影响，结果见表1、表2、图1和图2。

表1不同桑枝比例下子实体出菇期天数

表2不同桑枝比例子实体各潮次总产量(g/m²)

由上述结果可以看出：不同桑枝比例大球盖菇子实体出菇期长短及菇产量均有差异。第一潮菇子实体出菇期最长的为70％桑枝，其次为50％、10％；从产量上来看，产量最高的为50％桑枝，达到4672.78g/m²，其次为70％、90％、30％，产量最低的为10％桑枝，仅为3365.56g/m²。第二潮菇子实体出菇期最长的为90％桑枝，其次为30％、50％；从产量上来看，产量最高的为90％桑枝，达到6225.00g/m²，其次为70％、50％、30％，产量最低的为0％桑枝，仅为1980g/m²。第三潮菇子实体出菇期最长的为30％桑枝，其次为50％、70％；从产量上来看，产量最高的为70％桑枝，达到3939.44g/m²，其次为30％，产量最低的为10％桑枝，仅为1262.22g/m²。综合三潮菇出菇情况比较，第二潮菇的产量普遍高于第一潮菇和第三潮菇，第三潮菇出菇期明显短于前两潮菇，三潮菇总产量大小顺序为：70％＞90％＞30％＞50％＞100％＞10％＞0％，三潮菇出菇期长短顺序为：50％＞70％＞90％＞30％＞10％＞100％＞0％，由此可见，栽培料中添加桑枝能够提高菇产量，桑枝比例为30％～90％时菇产量较高，达到10000g/m²以上，但50％桑枝出菇期较长，有34天，且产量仅为10685.56g/m²，不利于采收管理，费时费力；因此30％、70％、90％桑枝为较优处理。

试验例2：

考察实施例1-实施例3、对比例1-对比例4，即大球盖菇栽培料中不同桑枝比例对大球盖菇dnj含量的影响。

1.试验方法：

(1)样品溶液的制备

将大球盖菇子实体置于50℃烘箱中烘干，液氮充分研磨过100目筛；准确称取干样品粉末各1.50g，置于50ml离心管中，加入0.05mol/l盐酸溶液20ml，涡旋振荡混合1min，高温超声波提取40min，12000r/min离心15min，收集上清液，剩余沉淀物再加入0.05mol/l盐酸溶液20ml，按上述步骤重复提取1次，合并2次上清液，加蒸馏水定容于50ml容量瓶，即得样品dnj提取液，每个样品3个重复，备用。

(2)dnj标准溶液的制备

精确称取dnj标准品5mg，用蒸馏水溶解、摇匀，并定容于10ml容量瓶中，得到0.5mg/ml的标准品母液，分别称取2ml、1.6ml、0.8ml、0.6ml、0.4ml、0.2ml、0.1ml、0ml用蒸馏水稀释，使标准品质量浓度分别为100、80、40、30、20、10、5、0μg/ml，其中质量浓度为0μg/ml的标准品为空白对照。

(3)衍生化反应及色谱条件

取样品提取液(或dnj标准品)100μl于1.5ml离心管中，加入0.4mol/l硼酸钾缓冲液(ph＝8.5)100μl，再加入5mmol/lfmoc-cl(溶于50％乙腈中)200μl混匀后，25℃水浴20min待其反应完全。反应体系中剩余的fmoc-cl通过加入0.1mol/l甘氨酸100μl来中和，最后加入1％醋酸500μl稀释(酸环境可增加衍生物的稳定性)，10000r/min离心5min，以0.22μm微孔滤膜过滤，收集滤液待测；采用反相高效液相色谱-紫外检测法(rp-hplc-uv)检测样品dnj含量，每个样品重复测定3次。检测波长设置为254nm，流动相为乙腈：0.1％醋酸＝55:45，泵流速设置为1ml/min，进样量20μl，柱温25℃(室温)、保留时间15min。

(4)数据统计分析

子实体产量分三潮统计，并计算每潮菇的出菇时间；dnj标准曲线以标准溶液质量浓度(x)对色谱峰面积(y)进行线性回归，得回归方程；dnj含量用dnj质量(mg)与样品干物质质量(g)之比表示。

2.试验结果：

(1)dnj标准曲线

以dnj质量浓度(c)为横坐标，以色谱峰面积(a)为纵坐标绘制标准曲线。所得线性回归方程为y＝22.277x+18.323，r2＝0.9955，由此可见，dnj质量浓度在0～100μg/ml的范围内，溶液浓度与峰面积呈良好线性关系。

(2)不同桑枝比例对大球盖菇子实体dnj含量的影响

结果发现，桑枝中dnj的含量为0.147mg/g，0％桑枝栽培大球盖菇中未检测到dnj，说明桑枝中含有dnj而未使用桑枝栽培的普通大球盖菇自身并不合成dnj。其他桑枝比例对大球盖菇子实体dnj含量的影响结果见图3和表3。

表3不同桑枝比例对三潮菇子实体dnj含量的影响

结果表明，第一潮菇dnj含量明显高于第二、三潮菇；第一潮菇中，70％桑枝dnj含量显著高于其他处理，为0.2302mg/g；第二潮菇中30％、50％桑枝dnj含量显著高于其他处理，分别为0.1306和0.1289mg/g；在第三潮菇中，30％桑枝dnj含量显著高于其他处理，达到0.0753mg/g；从dnj平均水平来看，30％、50％、70％桑枝dnj含量显著高于其他处理，其中50％最高，达到了0.1183mg/g，在一定浓度范围内，dnj含量随桑枝比例的增加而增加，但桑枝比例过高则会抑制菌丝对dnj的富集，导致含量下降；随着出菇潮次的增加，dnj含量呈现下降的趋势，但三潮菇的dnj总量较为稳定，在桑枝比例为30％～70％之间时，子实体dnj含量较高。结合2.2结果综合比较可知，30％、70％桑枝dnj含量差异较小，且相对于30％桑枝来说、70％桑枝具有更高的产量，因此70％桑枝为试验筛选的最优处理。

综上，在桑枝比例为70％时，子实体出菇期为33天，总产量为14282.94g/m²，子实体中dnj平均含量为0.1142mg/g，对桑枝中dnj的富集效率达77.69％(富集效率是指大球盖菇子实体中的dnj含量与桑枝中dnj含量的比值)，远高于现有报道的其他种类食用菌的富集效率(现有报道最高的是灵芝，其富集效率为72.63％)。

以上所述仅为本申请的优选实施例而已，并不用于限制本申请，对于本领域的技术人员来说，本申请可以有各种更改和变化。凡在本申请的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本申请的保护范围之内。