本发明涉及中药材种植
技术领域：
，具体涉及本一种促进山楂种子发芽的方法。
背景技术：
：山楂为蔷薇科山楂属落叶乔木，是核果类水果，核质硬，果肉薄，味微酸涩。果可生吃或作果脯果糕，干制后可入药，是中国特有的药果兼用树种，具有降血脂、血压、强心、抗心律不齐等作用，同时也是健脾开胃、消食化滞、活血化痰的良药，对胸膈脾满、疝气、血淤、闭经等症有很好的疗效。山楂内的黄酮类化合物牡荆素，是一种抗癌作用较强的药物，其提取物对抑制体内癌细胞生长、增殖和浸润转移均有一定的作用。目前，山楂的主要繁殖方式有无性繁殖和有性繁殖，无性繁殖常用扦插繁殖和嫁接繁殖的方法。嫁接繁殖是利用种子繁殖的实生苗或分株苗均可作砧木，采用芽接或枝接或靠接，以芽接为主。无性繁殖仍然离不开种子繁殖得到的株苗。然而山楂种子属于硬实性种子，种子发芽期长，发芽困难，原因是种壳的不透性、胚的生理休眠现象和天然抑制物质的存在，所以通常需要经两冬一夏层积后才能发芽，故有“二年种子”之称，且发芽不整齐，出芽率第，这为山楂育种和苗木繁殖带来了困难。因此，促进山楂种子发芽，缩短其发芽时间，种子发芽时间，是山楂种子繁殖的关键。目前，关于促进山楂种子发芽的专利也有。。比如专利cn201611189461公开了一种山楂种子的催芽方法，包括浸泡、冷藏、干燥、催芽、播种的步骤，能使山楂种子催芽时间缩短为8～9天，发芽率达到86％。专利cn201710281616公开了一种提高山楂种子发芽率的催芽方法，包括果实酶解、果实发酵、种子干燥、种子拌种和种子催芽的方法，该方法加快了山楂种子发芽，使其播种后20～25天即可发芽出土，发芽率达到67.4％。专利cn201710428120公开了一种促进山楂种子发芽的处理方法，包括：浸泡、冷冻、发酵、催芽、播种的步骤，使山楂种子的催芽处理时间缩短为12～14天，播种后17～19天即可发芽，发芽率为82.7％。虽然这些方法都在一定程度上缩短了山楂种子的发芽时间，但是，种子发芽时间仍然较长。技术实现要素：鉴于上述内容，本发明提供一种促进山楂种子发芽的方法，包括低温冷藏、消毒、种子催芽和种子播种，有效使山楂种子的催芽处理时间缩短为6～9天，播种后15～17天即可发芽，发芽率为86～88％，为山楂种子繁殖提供实际应用价值。为达到上述目的，本发明所采用的技术方案，包括以下步骤：1、一种促进山楂种子发芽的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：(1)种子低温冷藏：挑取成熟、饱满、无病虫害的山楂种子，用淘米水搓洗干净，与含水量60％～70％的湿沙以1～3:6的重量配比混合后，置于冰箱中冷藏，冷藏过程保持沙土湿润透气；(2)种子消毒：将上述冷藏后的种子放入体积浓度为5％～10％的次氯酸钠溶液中浸泡5h～8h，捞出种子，用无菌水冲洗2～3次，沥干水分，用针刺破种皮，再用稀硝酸溶液浸泡种子，捞出种子，用无菌水冲洗2～3次；(3)种子催芽：高温黑暗中采用超声处理步骤(2)的种子，捞出种子，将种子置于催芽箱中，在温度为26～28℃、湿度为75％～85％和光照为100～160lx条件下，连续催芽种子4～6天，得到开裂种子；(4)种子催芽：将步骤(3)得到的开裂种子放入基质中，种子表层覆盖2～3cm厚的基质，再用营养液浇透基质后，将播有种子的基质置于26～28℃温度、45％～65％湿度和200～250lx光照的人工气候箱中培养15～17天，得到发芽种子。进一步地，步骤(1)中，所述冰箱冷藏温度为-4～4℃，处理时间为1～2天。进一步地，步骤(2)中，所述硝酸溶液浓度为0.2～0.4mol/l，浸泡时间为8h～12h。进一步地，步骤(3)中，所述超声波频率为40～50khz，温度为60～65℃，处理时间为40～50min。进一步地，步骤(4)中，所述基质主要由如下重量份数的原料组成：腐殖土6-9份，草木灰3-5份和蛭石3-4份。进一步地，步骤(4)中，所述营养液主要由以下组分混制而成：5～9g/l黑木耳粉、1～5g/l聚乙二醇和100～300mg/l双乙酸钠。本发明所用的黑木耳粉均为市售获得。本发明与现有技术相比，具有如下优点：1、本发明通过低温冷藏、种子消毒、种子催芽和播种处理，有效促进山楂种子发芽，缩短了发芽时间，提高了发芽率，采用本发明方法处理后，山楂种子的催芽处理时间缩短为6～9天，播种后15～17天即可发芽，发芽率为86～88％。2、本发明的基质的原料为腐殖土、草木灰和蛭石，其中，原料的腐殖土富含有机质和少量维生素、生长素、微量元素，具有质轻疏松，透水通气性能好，且保水保肥能力强，营养物质易被山楂吸收；草木灰是含有丰富的磷、钙、镁、硅、硫和铁、锰、铜、锌、硼、钼等大量和微量营养元素，是农村广泛存在的消毒剂原料，具有很强的杀灭病原菌作用，既能山楂种子提供营养物质，又能预防病原菌的侵染；蛭石是一种天然、无机，无毒的矿物质，能起着保肥、保水、储水、透气和矿物肥料等多重作用。通过这些原料的协同作用，有利于为山楂种子提供营养物质和透气保水环境，并能预防病原菌的侵染。3、本发明采用的营养液为黑木耳粉、聚乙二醇和双乙酸钠配制成的溶液，它能有效解除山楂种子休眠，促进种子发芽，缩短发芽时间。其中，黑木耳粉不但能抑制山楂种子产生脱落酸(脱落酸可促进种子休眠)，还能促使种子产生赤霉素(赤霉素可打破种子休眠)，短期内增加了赤霉素含量，进而刺激种子快速发芽；聚乙二醇在一定浓度下，能提高种子萌发初期的atp含量，使种子生理活动提前启动，增强各种代谢活动，从而打破种子休眠，促进种子提早发芽；双乙酸钠具有高效防霉、防腐、保鲜的作用，可加强黑木耳粉与聚乙二醇两者功效，有利于解除种子休眠，促进种子发芽。因此，黑木耳粉、聚乙二醇和双乙酸钠相互作用，协同增效，促进了种子的发芽。4、本发明采用种子冷藏方法，低温促进山楂种子生理后熟，后期采用次氯酸钠溶液浸泡，起到消毒作用，再用稀硝酸溶液浸泡处理，能使种皮变软，增强种皮渗透性。此外，本发明采用高温催芽山楂种子，高温超声波的机械作用具有软化组织，提高生物膜通透性，增强渗透，促进种子内部与外界的物质交换，提高代谢作用，有利于种子的破壳萌发。【具体实施方式】以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。在不背离本发明精神和实质的情况下，对本发明方法、步骤或条件所作的修改或替换，均属于本发明的范围。实施例1：一种促进山楂种子发芽的方法，所述方法包括以下步骤：(1)种子低温冷藏：挑取成熟、饱满、无病虫害的山楂种子，用淘米水搓洗干净，与含水量60％的湿沙以1：6的重量配比混合后，置于-4℃冰箱中冷藏1天，冷藏过程保持沙土湿润透气；(2)种子消毒：将上述冷藏后的种子放入体积浓度为5％的次氯酸钠溶液中浸泡5h，捞出种子，用无菌水冲洗2次，沥干水分，用针刺破种皮，再用0.2mol/l稀硝酸溶液浸泡种子8h，捞出种子，用无菌水冲洗2次；(3)种子催芽：高温黑暗中采用于40khz、60℃下超声处理步骤(2)的种子，处理时间为40min，捞出种子，将种子置于催芽箱中，在温度为26℃、湿度为75％和光照为100lx条件下，连续催芽种子4天，得到开裂种子；(4)种子催芽：将步骤(3)得到的开裂种子放入基质中，种子表层覆盖2cm厚的基质，再用营养液浇透基质后，将播有种子的基质置于26℃温度、45％湿度和200lx光照的人工气候箱中培养15天，得到发芽种子。上述基质主要由如下重量份数的原料组成：腐殖土6份，草木灰3份和蛭石3份。上述营养液主要由以下组分混制而成：5g/l黑木耳粉、1g/l聚乙二醇和100mg/l双乙酸钠。实施例2：一种促进山楂种子发芽的方法，所述方法包括以下步骤：(1)种子低温冷藏：挑取成熟、饱满、无病虫害的山楂种子，用淘米水搓洗干净，与含水量65％的湿沙以1:3的重量配比混合后，置于0℃冰箱中冷藏1.5天，冷藏过程保持沙土湿润透气；(2)种子消毒：将上述冷藏后的种子放入体积浓度为7.5％的次氯酸钠溶液中浸泡6.5h，捞出种子，用无菌水冲洗3次，沥干水分，用针刺破种皮，再用0.3mol/l稀硝酸溶液浸泡种子10h，捞出种子，用无菌水冲洗3次；(3)种子催芽：高温黑暗中采用于45khz、62.5℃下超声处理步骤(2)的种子，处理时间为45min，捞出种子，将种子置于催芽箱中，在温度为27℃、湿度为80％和光照为130lx条件下，连续催芽种子5天，得到开裂种子；(4)种子催芽：将步骤(3)得到的开裂种子放入基质中，种子表层覆盖2.5cm厚的基质，再用营养液浇透基质后，将播有种子的基质置于27℃温度、55％湿度和225lx光照的人工气候箱中培养16天，得到发芽种子。上述基质主要由如下重量份数的原料组成：腐殖土7.5份，草木灰4份和蛭石3.5份。上述营养液主要由以下组分混制而成：7g/l黑木耳粉、3g/l聚乙二醇和200mg/l双乙酸钠。实施例3：一种促进山楂种子发芽的方法，所述方法包括以下步骤：(1)种子低温冷藏：挑取成熟、饱满、无病虫害的山楂种子，用淘米水搓洗干净，与含水量70％的湿沙以1:2的重量配比混合后，置于4℃冰箱中冷藏2天，冷藏过程保持沙土湿润透气；(2)种子消毒：将上述冷藏后的种子放入体积浓度为10％的次氯酸钠溶液中浸泡8h，捞出种子，用无菌水冲洗3次，沥干水分，用针刺破种皮，再用0.4mol/l稀硝酸溶液浸泡种子12h，捞出种子，用无菌水冲洗3次；(3)种子催芽：高温黑暗中采用于50khz、65℃下超声处理步骤(2)的种子，处理时间为50min，捞出种子，将种子置于催芽箱中，在温度为28℃、湿度为85％和光照为160lx条件下，连续催芽种子6天，得到开裂种子；(4)种子催芽：将步骤(3)得到的开裂种子放入基质中，种子表层覆盖3cm厚的基质，再用营养液浇透基质后，将播有种子的基质置于28℃温度、65％湿度和250lx光照的人工气候箱中培养17天，得到发芽种子。上述基质主要由如下重量份数的原料组成：腐殖土9份，草木灰5份和蛭石4份。上述营养液主要由以下组分混制而成：9g/l黑木耳粉、5g/l聚乙二醇和300mg/l双乙酸钠。对照组1：其他步骤与实例1完全相同，但是步骤(1)山楂种子不经过-4℃冰箱沙藏。对照组2：其他步骤与实例1完全相同，但是步骤(4)基质的原料配方为：3份草木灰和3份蛭石。对照组3：其他步骤与实例1完全相同，但是步骤(4)基质的原料配方为：6份腐殖土和3份蛭石。对照组4：其他步骤与实例1完全相同，但是步骤(4)基质的原料配方为：6份腐殖土和3份草木灰。对照组5：其他步骤与实例1完全相同，但是步骤(4)营养液的组分为：1g/l聚乙二醇和100mg/l双乙酸钠。对照组6：其他步骤与实例1完全相同，但是步骤(4)营养液的组分为：5g/l黑木耳粉和100mg/l双乙酸钠。对照组7：其他步骤与实例1完全相同，但是步骤(4)营养液的组分为：5g/l黑木耳粉和1g/l聚乙二醇。对照组8：山楂种子催芽方法参照专利cn201710428120《一种促进山楂种子发芽的处理方法》。上述实施例与对照组分别处理1100粒山楂种子，随机分为11组，每组100颗山楂种子，分别对实施例和对照组的山楂种子进行催芽，催芽后进行播种。测试试验：试验调查各实施例和对照组连续催芽6天后的种子露白粒数，播种17天后山楂种子出土株数，计算发芽率，具体见表1。表1组别种子粒数(粒)露白种子数(粒)发芽出土数(株)实施例11005086实施例21004988实施例31005187对照组11003263对照组21003165对照组31003670对照组41003273对照组51002862对照组61003368对照组71003467对照组81003879由上表可知，本发明的步骤(4)是一个不可分割的整体，组分之间相互协同，共同作用，组分的用量不可随意增减；使用本发明的方法，能有效使山楂种子的催芽处理时间缩短为6～9天，播种后15～17天即可发芽，发芽率为86～88％。以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对本发明范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明的保护范围应以所附权利要求为准。当前第1页12