一种紫薯的育苗方法与流程

文档序号:17579042发布日期:2019-05-03 20:46阅读:545来源:国知局
本发明属于紫薯栽培
技术领域
,具体涉及一种紫薯的育苗方法。
背景技术
:紫薯(ipomoeabatatas(l.)poir.旋花科convolvulaceae番薯属)又叫黑薯,薯肉呈紫色至深紫色。它除了具有普通红薯的营养成分外,还富含硒元素和花青素,紫薯为花青素的主要原料之一。紫薯喜温暖气候环境,茎叶适宜生长温度为18~25℃,温度低于15℃时停止生长。块根最适生长地温为22~24℃,地温低于20℃时停止膨大。紫薯新品种或品系在引种、繁殖和生产过程中主要以薯块和茎蔓等营养器官进行无性繁殖,因此易于造成病毒病的积累和蔓延,从而导致其产量降低、品质下降、种性退化。据统计,中国因紫薯病毒病而造成的平均减产率达29.4%。随着人们对紫薯的青睐越来越高,紫薯的种植面积和规模正不断扩大,对紫薯育苗技术的要求也越来越高。目前,紫薯的育苗方法多采用土壤栽培育苗,受温度环境的影响很大,具有一定的季节性,产苗量低,条件不易控制,出苗不齐,不利于统一管理,因此,需要一种紫薯的高效育苗方法,提高育苗的产量和质量,扩大紫薯的种植规模。目前紫薯育苗主要通过以下几种方法,一是采用大苗棚培育,通过外力加热促进幼苗的生长发育,育苗步骤复杂,工艺繁琐、设备成本高;二是采用冷床小中棚育苗,将紫薯整体埋入土中,这种育苗方法会导致紫薯下半部发芽困难,出苗率及出苗质量较差,育苗效率低、幼苗成活率及成活质量差,不利于紫薯的繁育种植。技术实现要素:本发明的目的在于提供一种紫薯的育苗方法,增殖培养时加入活性炭可降低茎尖的褐化率,愈伤诱导、分化较易,茎尖生长相关蛋白酶的分泌和活性得到提高,幼苗活力旺盛,生根培养过程中的生长素类物质不易被光降解,可经络合-解络合至作用部位发挥调节生长的作用,最终所得幼苗根系粗壮茂密、移栽成活率可达100%,是一种培育效果好、移栽成活率高的紫薯紫薯育苗方法。本发明为实现上述目的所采取的技术方案为:一种紫薯的育苗方法,包括:a)取紫薯幼嫩带芽茎段修剪成小段后进行灭菌处理;b)步骤a)的小段在含有粉状活性炭的增殖培养基中进行增殖培养获取幼苗;c)步骤b)的幼苗在生根培养基中培养获取紫薯增培苗;其中,所述增殖培养基为含有5~10g/l蔗糖、9~19mg/l苄基奎宁氯化物、0.2~0.5g/l乙醇、0.05~0.15g/l土霉素的ms培养基。本发明方法中,首先将采自田间的紫薯幼嫩带芽茎段修剪,依次用抗环血酸溶液、酒精、氯化汞溶液消毒后置于含有苄基奎宁氯化物与乙醇的ms培养基中增殖培养,增殖培养的培养基表面放置有粉状活性炭,增殖培养基利于茎尖的分化增殖,可提高组织的蛋白酶活性和呼吸效率,强化糖酵解过程和线粒体活性,增强可溶性糖的分泌,加速茎尖组织尽早分化增殖;增殖培养获取的幼苗置于生根培养基中进行生根培养,生根培养基中的吲哚乙酸不会因光氧化降解而失去调节作用,而且会刺激形成层细胞分裂,刺激根细胞生长,促进木质部、韧皮部细胞分化,调节愈伤组织的形态建成,促进逾伤组织发根,经生根培养后的紫薯增培苗的根系粗壮茂密,根长度较长,粗度较粗,幼苗移栽成活率可达100%,是一种培育效果好、移栽成活率高的紫薯紫薯育苗方法。优选地,还包括d)紫薯增培苗炼苗后消毒并移栽。一种紫薯的育苗方法,其具体包括以下步骤:灭菌:从田间采回紫薯的幼嫩带芽茎段,去掉叶片及多余叶柄,修剪成约0.5cm长的茎段小段,先在自来水下用毛刷洗去表面的灰尘及泥土,再用抗坏血酸溶液灭菌,用洗衣粉溶液洗净,自来水流水冲洗30min;用酒精灭菌,无菌水冲洗2~3遍,再用氯化汞溶液灭菌,无菌水冲洗2~3次备用;外植体灭菌可以灭杀紫薯茎尖部位携带的有害微生物,避免将有害微生物引入培养基质中造成污染,同时也可以避免微生物对培养基质的吸收利用,为茎尖细胞提供充足的营养成分供其分化;增殖:含有微量苄基奎宁氯化物与适量乙醇的增殖培养基混合均匀后装入容器中,将海绵卷成中空的筒状体,筒状体下部的海绵条插入容器中,以玻璃棒插8~10个小孔至培养基底部,在每个小孔中垂直插入1~2片茎尖小块,培养基表面上放置0.3~0.5cm厚的粉状活性炭,增殖培养获取幼苗;增殖培养基中的活性炭有助于调节培养基的容重、总孔隙度、通气孔隙、持水孔隙和气水比,同时活性炭还有助于降低茎尖的褐化率,在添加活性炭的ms培养基上较容易诱导愈伤组织,愈伤诱导率达99%以上,愈伤分化也较容易,愈伤分化率达98%以上,愈伤的生长情况好,质地疏松,活力旺盛;在增殖培养基加入微量的苄基奎宁氯化物与适量的乙醇有助于茎尖的分化增殖,在适量乙醇的作用下,苄基奎宁氯化物进入茎尖组织,刺激茎尖组织的相关基因表达,加速其蛋白酶分泌,提高蛋白酶活性,同时苄基奎宁氯化物还可以加速组织的呼吸速率,并进一步强化糖酵解过程和线粒体活性,增强可溶性糖的分泌,加速茎尖组织尽早分化增殖,以少量的茎尖获取大量的丛生幼苗,极大地提高产量和产率;生根:将经增殖培养产生的健壮幼苗接入至含有(r)-(-)-2,2-二苯基环戊醇和吲哚乙酸的生根培养基中,增殖培养获取紫薯增培苗;吲哚乙酸能够作用于细胞,可刺激形成层细胞分裂,刺激根细胞生长,促进木质部、韧皮部细胞分化,调节愈伤组织的形态建成,促进逾伤组织发根,赤霉素有助于灭菌,可以防止愈伤组织腐烂,(r)-(-)-2,2-二苯基环戊醇能够与吲哚乙酸发生络合反应,从而可以防止其被光氧化分解为醛与吲哚而失去调节作用,在适当条件下,生长素可以经由解络合反应而转变为游离型,经运输转移到作用部位起作用;经生根培养后,紫薯增培苗的根系粗壮茂密,根长度较长,粗度较粗,幼苗移栽成活率可达100%,是一种培育效果好、移栽成活率高的紫薯紫薯育苗方法;移栽:将生根良好的增培苗移出培养室并置于室温下炼苗2~3d,继续炼苗1~2d,小心取出小苗,冼净基部培养基,消毒后在阴凉处晾10~15min后移栽到栽培基质中即可;通过炼苗并消毒后,紫薯幼苗可以迅速适应栽培基质的土质环境,可以缩短缓苗时间,增强对低温、大风等的抵抗能力,使紫薯迅速成活成长,植株健壮,长势旺盛,完成组培阶段。优选地,所述灭菌步骤中,所述抗坏血酸溶液灭菌为用0.2~0.5%浓度的抗坏血酸溶液浸泡5~10min。优选地,所述灭菌步骤中,所述酒精灭菌为在无菌条件下用酒精灭菌15~30s。优选地,所述灭菌步骤中,所述氯化汞溶液灭菌为用0.08~0.12%氯化汞溶液灭菌8~12min。灭菌可以灭杀紫薯茎尖部位携带的有害微生物,避免将有害微生物引入培养基质中造成污染,同时也可以避免微生物对培养基质的吸收利用,为茎尖细胞提供充足的营养成分供其分化。优选地,所述增殖步骤中,所述海绵选取长15~20cm、宽5~10cm、厚0.4~0.7cm的海绵,将海绵用蒸馏水洗净并在体积分数为70~75%的酒精中浸泡20~30min,再用蒸馏水洗净备用。优选地,所述增殖步骤中,增殖培养基是含有5~10g/l蔗糖、9~19mg/l苄基奎宁氯化物、0.2~0.5g/l乙醇、0.05~0.15g/l土霉素的新鲜的ms培养基。在增殖培养基加入微量的苄基奎宁氯化物与适量的乙醇有助于茎尖的分化增殖,在适量乙醇的作用下,苄基奎宁氯化物进入茎尖组织,刺激茎尖组织的相关基因表达,加速其蛋白酶分泌,提高蛋白酶活性,同时苄基奎宁氯化物还可以加速组织的呼吸速率,并进一步强化糖酵解过程和线粒体活性,增强可溶性糖的分泌,加速茎尖组织尽早分化增殖,以少量的茎尖获取大量的丛生幼苗,极大地提高产量和产率。优选地,所述增殖步骤中,增殖培养条件是:温度为22~24℃、光照时间为12~16h、光照强度为2500~3000lux。培养基中的活性炭有助于调节培养基的容重、总孔隙度、通气孔隙、持水孔隙和气水比,同时活性炭还有助于降低茎尖的褐化率,在添加活性炭的ms培养基上较容易诱导愈伤组织,愈伤诱导率达99%以上,愈伤分化也较容易,愈伤分化率达98%以上,愈伤的生长情况好,质地疏松,活力旺盛。优选地,所述生根步骤中,所述生根培养基是:选取新鲜的ms培养基,遮光条件下依次加入蔗糖25~28g/l、蜂蜜20~22g/l、维生素b10.1~0.15g/l、(r)-(-)-2,2-二苯基环戊醇0.012~0.022g/l、6-苄氨基腺嘌呤1.0~1.2mg/l、吲哚乙酸0.6~0.8mg/l、赤霉素0.03~0.05mg/l。6-苄氨基腺嘌呤、吲哚乙酸能够作用于细胞,可刺激形成层细胞分裂,刺激根细胞生长,促进木质部、韧皮部细胞分化,调节愈伤组织的形态建成,促进逾伤组织发根,赤霉素有助于灭菌,可以防止愈伤组织腐烂,(r)-(-)-2,2-二苯基环戊醇能够与吲哚乙酸发生络合反应,从而可以防止其被光氧化分解为醛与吲哚而失去调节作用,在适当条件下,生长素可以经由解络合反应而转变为游离型,经运输转移到作用部位起作用;经生根培养后,紫薯增培苗的根系粗壮茂密,根长度较长,粗度较粗,幼苗移栽成活率可达100%,是一种培育效果好、移栽成活率高的紫薯紫薯育苗方法。优选地,所述生根步骤中,所述生根培养的条件是:光照12~14h、光照强度2500~3500lux、温度24~26℃,黑暗10~12h、温度15~17℃。经生根培养后,紫薯增培苗的根系粗壮茂密,根长度较长,粗度较粗,幼苗移栽成活率可达100%,是一种培育效果好、移栽成活率高的紫薯紫薯育苗方法。优选地,所述移栽步骤中,所述消毒为用多菌灵可湿性粉剂1500~2000倍液与0.022~0.025%高锰酸钾溶液浸泡消毒7~9min。通过炼苗并消毒后,紫薯幼苗可以迅速适应栽培基质的土质环境,可以缩短缓苗时间。本发明还提供如上述紫薯的育苗方法在紫薯育苗繁殖中的应用。本发明方法中,首先将采自田间的紫薯幼嫩带芽茎段修剪,依次用抗环血酸溶液、酒精、氯化汞溶液消毒后置于含有苄基奎宁氯化物与乙醇的ms培养基中增殖培养,增殖培养的培养基表面放置有粉状活性炭,增殖培养基利于茎尖的分化增殖,可提高组织的蛋白酶活性和呼吸效率,强化糖酵解过程和线粒体活性,增强可溶性糖的分泌,加速茎尖组织尽早分化增殖;增殖培养获取的幼苗置于含有(r)-(-)-2,2-二苯基环戊醇和吲哚乙酸的ms培养基中进行生根培养,生根培养基中的吲哚乙酸不会因光氧化降解而失去调节作用,而且会刺激形成层细胞分裂,刺激根细胞生长,促进木质部、韧皮部细胞分化,调节愈伤组织的形态建成,促进逾伤组织发根,经生根培养后的紫薯增培苗的根系粗壮茂密,根长度较长,粗度较粗,幼苗移栽成活率可达100%,是一种培育效果好、移栽成活率高的紫薯紫薯育苗方法。本发明的有益效果为:1)增殖培养基中的活性炭有助于调节培养基的容重、总孔隙度、通气孔隙、持水孔隙和气水比,同时活性炭还有助于降低茎尖的褐化率,在添加活性炭的ms培养基上较容易诱导愈伤组织,愈伤诱导率达99%以上,愈伤分化也较容易,愈伤分化率达98%以上,愈伤的生长情况好,质地疏松,幼苗活力旺盛;2)在增殖培养基加入微量的苄基奎宁氯化物与适量的乙醇有助于茎尖的分化增殖,在适量乙醇的作用下,苄基奎宁氯化物进入茎尖组织,刺激茎尖组织的相关基因表达,加速其蛋白酶分泌,提高蛋白酶活性;3)同时苄基奎宁氯化物还可以加速组织的呼吸速率,并进一步强化糖酵解过程和线粒体活性,增强可溶性糖的分泌,加速茎尖组织尽早分化增殖,以少量的茎尖获取大量的丛生幼苗,极大地提高产量和产率;4)(r)-(-)-2,2-二苯基环戊醇能够与吲哚乙酸发生络合反应,从而可以防止其被光氧化分解为醛与吲哚而失去调节作用,在适当条件下,生长素可以经由解络合反应而转变为游离型,经运输转移到作用部位起作用;5)经生根培养并炼苗移栽后,紫薯增培苗的根系粗壮茂密,根长度较长,粗度较粗;幼苗移栽成活率可达100%,是一种培育效果好、移栽成活率高的紫薯紫薯育苗方法。本发明采用了上述技术方案提供一种紫薯的育苗方法,弥补了现有技术的不足,设计合理,操作方便。具体实施方式以下结合实施例对本发明作进一步详细描述:实施例1:一种紫薯的育苗方法,其具体包括以下步骤:1灭菌:从田间采回紫薯的幼嫩带芽茎段,去掉叶片及多余叶柄,修剪成0.5cm长的茎段小段,先在自来水下用毛刷洗去表面的灰尘及泥土,再用抗坏血酸溶液灭菌,用洗衣粉溶液洗净,自来水流水冲洗30min;用酒精灭菌,无菌水冲洗2遍,再用氯化汞溶液灭菌,无菌水冲洗2次备用;外植体灭菌可以灭杀紫薯茎尖部位携带的有害微生物,避免将有害微生物引入培养基质中造成污染,同时也可以避免微生物对培养基质的吸收利用,为茎尖细胞提供充足的营养成分供其分化;2增殖:含有微量苄基奎宁氯化物与适量乙醇的增殖培养基混合均匀后装入容器中,将海绵卷成中空的筒状体,筒状体下部的海绵条插入容器中,以玻璃棒插8个小孔至培养基底部,在每个小孔中垂直插入1片茎尖小块,培养基表面上放置0.3cm厚的粉状活性炭,增殖培养获取幼苗;增殖培养基中的活性炭有助于调节培养基的容重、总孔隙度、通气孔隙、持水孔隙和气水比,同时活性炭还有助于降低茎尖的褐化率,在添加活性炭的ms培养基上较容易诱导愈伤组织,愈伤诱导率达99%以上,愈伤分化也较容易,愈伤分化率达98%以上,愈伤的生长情况好,质地疏松,活力旺盛;在增殖培养基加入微量的苄基奎宁氯化物与适量的乙醇有助于茎尖的分化增殖,在适量乙醇的作用下,苄基奎宁氯化物进入茎尖组织,刺激茎尖组织的相关基因表达,加速其蛋白酶分泌,提高蛋白酶活性,同时苄基奎宁氯化物还可以加速组织的呼吸速率,并进一步强化糖酵解过程和线粒体活性,增强可溶性糖的分泌,加速茎尖组织尽早分化增殖,以少量的茎尖获取大量的丛生幼苗,极大地提高产量和产率;3生根:将经增殖培养产生的健壮幼苗接入至含有(r)-(-)-2,2-二苯基环戊醇和吲哚乙酸的生根培养基中,增殖培养获取紫薯增培苗;吲哚乙酸能够作用于细胞,可刺激形成层细胞分裂,刺激根细胞生长,促进木质部、韧皮部细胞分化,调节愈伤组织的形态建成,促进逾伤组织发根,赤霉素有助于灭菌,可以防止愈伤组织腐烂,(r)-(-)-2,2-二苯基环戊醇能够与吲哚乙酸发生络合反应,从而可以防止其被光氧化分解为醛与吲哚而失去调节作用,在适当条件下,生长素可以经由解络合反应而转变为游离型,经运输转移到作用部位起作用;经生根培养后,紫薯增培苗的根系粗壮茂密,根长度较长,粗度较粗,幼苗移栽成活率可达100%,是一种培育效果好、移栽成活率高的紫薯紫薯育苗方法;移栽:将生根良好的增培苗移出培养室并置于室温下炼苗2d,继续炼苗1d,小心取出小苗,冼净基部培养基,消毒后在阴凉处晾10min后移栽到栽培基质中即可;通过炼苗并消毒后,紫薯幼苗可以迅速适应栽培基质的土质环境,可以缩短缓苗时间,增强对低温、大风等的抵抗能力,使紫薯迅速成活成长,植株健壮,长势旺盛,完成组培阶段。所述灭菌步骤中,所述抗坏血酸溶液灭菌为用0.3%浓度的抗坏血酸溶液浸泡6min。所述灭菌步骤中,所述酒精灭菌为在无菌条件下用酒精灭菌15s。所述灭菌步骤中,所述氯化汞溶液灭菌为用0.09%氯化汞溶液灭菌9min。灭菌可以灭杀紫薯茎尖部位携带的有害微生物,避免将有害微生物引入培养基质中造成污染,同时也可以避免微生物对培养基质的吸收利用,为茎尖细胞提供充足的营养成分供其分化。所述增殖步骤中,所述海绵选取长15cm、宽5cm、厚0.4cm的海绵,将海绵用蒸馏水洗净并在体积分数为70%的酒精中浸泡20min,用蒸馏水洗净备用。所述增殖步骤中,增殖培养基是含有6g/l蔗糖、10mg/l苄基奎宁氯化物、0.3g/l乙醇、0.08g/l土霉素的新鲜的ms培养基。在增殖培养基加入微量的苄基奎宁氯化物与适量的乙醇有助于茎尖的分化增殖,在适量乙醇的作用下,苄基奎宁氯化物进入茎尖组织,刺激茎尖组织的相关基因表达,加速其蛋白酶分泌,提高蛋白酶活性,同时苄基奎宁氯化物还可以加速组织的呼吸速率,并进一步强化糖酵解过程和线粒体活性,增强可溶性糖的分泌,加速茎尖组织尽早分化增殖,以少量的茎尖获取大量的丛生幼苗,极大地提高产量和产率。所述增殖步骤中,增殖培养条件是:温度为22℃、光照时间为12h、光照强度为2600lux。培养基中的活性炭有助于调节培养基的容重、总孔隙度、通气孔隙、持水孔隙和气水比,同时活性炭还有助于降低茎尖的褐化率,在添加活性炭的ms培养基上较容易诱导愈伤组织,愈伤诱导率达99%以上,愈伤分化也较容易,愈伤分化率达98%以上,愈伤的生长情况好,质地疏松,活力旺盛。所述生根步骤中,所述生根培养基是:选取新鲜的ms培养基,遮光条件下依次加入蔗糖25g/l、蜂蜜20g/l、维生素b10.1g/l、(r)-(-)-2,2-二苯基环戊醇0.015g/l、6-苄氨基腺嘌呤1mg/l、吲哚乙酸0.6mg/l、赤霉素0.03mg/l。6-苄氨基腺嘌呤、吲哚乙酸能够作用于细胞,可刺激形成层细胞分裂,刺激根细胞生长,促进木质部、韧皮部细胞分化,调节愈伤组织的形态建成,促进逾伤组织发根,赤霉素有助于灭菌,可以防止愈伤组织腐烂,(r)-(-)-2,2-二苯基环戊醇能够与吲哚乙酸发生络合反应,从而可以防止其被光氧化分解为醛与吲哚而失去调节作用,在适当条件下,生长素可以经由解络合反应而转变为游离型,经运输转移到作用部位起作用;经生根培养后,紫薯增培苗的根系粗壮茂密,根长度较长,粗度较粗,幼苗移栽成活率可达100%,是一种培育效果好、移栽成活率高的紫薯紫薯育苗方法。所述生根步骤中,所述生根培养的条件是:光照12h、光照强度2500lux、温度24℃,黑暗12h、温度15℃。经生根培养后,紫薯增培苗的根系粗壮茂密,根长度较长,粗度较粗,幼苗移栽成活率可达100%,是一种培育效果好、移栽成活率高的紫薯紫薯育苗方法。所述移栽步骤中,所述消毒为用多菌灵可湿性粉剂1500倍液与0.022%高锰酸钾溶液浸泡消毒7min。通过炼苗并消毒后,紫薯幼苗可以迅速适应栽培基质的土质环境,可以缩短缓苗时间。实施例2:一种紫薯的育苗方法,包括:a)取紫薯幼嫩带芽茎段修剪成小段后进行灭菌处理;b)步骤a)的小段在含有粉状活性炭的增殖培养基中进行增殖培养获取幼苗;c)步骤b)的幼苗在生根培养基中培养获取紫薯增培苗;d)紫薯增培苗炼苗后消毒并移栽。其中,所述增殖培养基为含有8g/l蔗糖、15mg/l苄基奎宁氯化物、0.4g/l乙醇、0.12g/l土霉素的ms培养基。本发明方法中,首先将采自田间的紫薯幼嫩带芽茎段修剪,依次用抗环血酸溶液、酒精、氯化汞溶液消毒后置于含有苄基奎宁氯化物与乙醇的ms培养基中增殖培养,增殖培养的培养基表面放置有粉状活性炭,增殖培养基利于茎尖的分化增殖,可提高组织的蛋白酶活性和呼吸效率,强化糖酵解过程和线粒体活性,增强可溶性糖的分泌,加速茎尖组织尽早分化增殖;增殖培养获取的幼苗置于生根培养基中进行生根培养,生根培养基中的吲哚乙酸不会因光氧化降解而失去调节作用,而且会刺激形成层细胞分裂,刺激根细胞生长,促进木质部、韧皮部细胞分化,调节愈伤组织的形态建成,促进逾伤组织发根,经生根培养后的紫薯增培苗的根系粗壮茂密,根长度较长,粗度较粗,幼苗移栽成活率可达100%,是一种培育效果好、移栽成活率高的紫薯紫薯育苗方法。上述紫薯的育苗方法具体包括以下步骤:灭菌:从田间采回紫薯的幼嫩带芽茎段,去掉叶片及多余叶柄,修剪成0.5cm长的茎段小段,先在自来水下用毛刷洗去表面的灰尘及泥土,再用抗坏血酸溶液灭菌,用洗衣粉溶液洗净,自来水流水冲洗30min;用酒精灭菌,无菌水冲洗3遍,再用氯化汞溶液灭菌,无菌水冲洗3次备用;外植体灭菌可以灭杀紫薯茎尖部位携带的有害微生物,避免将有害微生物引入培养基质中造成污染,同时也可以避免微生物对培养基质的吸收利用,为茎尖细胞提供充足的营养成分供其分化;增殖:含有微量苄基奎宁氯化物与适量乙醇的增殖培养基混合均匀后装入容器中,将海绵卷成中空的筒状体,筒状体下部的海绵条插入容器中,以玻璃棒插10个小孔至培养基底部,在每个小孔中垂直插入2片茎尖小块,培养基表面上放置0.5cm厚的粉状活性炭,增殖培养获取幼苗;增殖培养基中的活性炭有助于调节培养基的容重、总孔隙度、通气孔隙、持水孔隙和气水比,同时活性炭还有助于降低茎尖的褐化率,在添加活性炭的ms培养基上较容易诱导愈伤组织,愈伤诱导率达99%以上,愈伤分化也较容易,愈伤分化率达98%以上,愈伤的生长情况好,质地疏松,活力旺盛;在增殖培养基加入微量的苄基奎宁氯化物与适量的乙醇有助于茎尖的分化增殖,在适量乙醇的作用下,苄基奎宁氯化物进入茎尖组织,刺激茎尖组织的相关基因表达,加速其蛋白酶分泌,提高蛋白酶活性,同时苄基奎宁氯化物还可以加速组织的呼吸速率,并进一步强化糖酵解过程和线粒体活性,增强可溶性糖的分泌,加速茎尖组织尽早分化增殖,以少量的茎尖获取大量的丛生幼苗,极大地提高产量和产率;生根:将经增殖培养产生的健壮幼苗接入至含有(r)-(-)-2,2-二苯基环戊醇和吲哚乙酸的生根培养基中,增殖培养获取紫薯增培苗;吲哚乙酸能够作用于细胞,可刺激形成层细胞分裂,刺激根细胞生长,促进木质部、韧皮部细胞分化,调节愈伤组织的形态建成,促进逾伤组织发根,赤霉素有助于灭菌,可以防止愈伤组织腐烂,(r)-(-)-2,2-二苯基环戊醇能够与吲哚乙酸发生络合反应,从而可以防止其被光氧化分解为醛与吲哚而失去调节作用,在适当条件下,生长素可以经由解络合反应而转变为游离型,经运输转移到作用部位起作用;经生根培养后,紫薯增培苗的根系粗壮茂密,根长度较长,粗度较粗,幼苗移栽成活率可达100%,是一种培育效果好、移栽成活率高的紫薯紫薯育苗方法;移栽:将生根良好的增培苗移出培养室并置于室温下炼苗3d,继续炼苗2d,小心取出小苗,冼净基部培养基,消毒后在阴凉处晾15min后移栽到栽培基质中即可;通过炼苗并消毒后,紫薯幼苗可以迅速适应栽培基质的土质环境,可以缩短缓苗时间,增强对低温、大风等的抵抗能力,使紫薯迅速成活成长,植株健壮,长势旺盛,完成组培阶段。灭菌步骤中,所述抗坏血酸溶液灭菌为用0.5%浓度的抗坏血酸溶液浸泡10min。灭菌步骤中,所述酒精灭菌为在无菌条件下用酒精灭菌25s。灭菌步骤中,所述氯化汞溶液灭菌为用0.1%氯化汞溶液灭菌10min。灭菌可以灭杀紫薯茎尖部位携带的有害微生物,避免将有害微生物引入培养基质中造成污染,同时也可以避免微生物对培养基质的吸收利用,为茎尖细胞提供充足的营养成分供其分化。增殖步骤中,所述海绵选取长20cm、宽10cm、厚0.5cm的海绵,将海绵用蒸馏水洗净并在体积分数为75%的酒精中浸泡30min,再用蒸馏水洗净备用。增殖步骤中,增殖培养基是含有8g/l蔗糖、15mg/l苄基奎宁氯化物、0.4g/l乙醇、0.12g/l土霉素的新鲜的ms培养基。在增殖培养基加入微量的苄基奎宁氯化物与适量的乙醇有助于茎尖的分化增殖,在适量乙醇的作用下,苄基奎宁氯化物进入茎尖组织,刺激茎尖组织的相关基因表达,加速其蛋白酶分泌,提高蛋白酶活性,同时苄基奎宁氯化物还可以加速组织的呼吸速率,并进一步强化糖酵解过程和线粒体活性,增强可溶性糖的分泌,加速茎尖组织尽早分化增殖,以少量的茎尖获取大量的丛生幼苗,极大地提高产量和产率。增殖步骤中,增殖培养条件是:温度为24℃、光照时间为14h、光照强度为2800lux。培养基中的活性炭有助于调节培养基的容重、总孔隙度、通气孔隙、持水孔隙和气水比,同时活性炭还有助于降低茎尖的褐化率,在添加活性炭的ms培养基上较容易诱导愈伤组织,愈伤诱导率达99%以上,愈伤分化也较容易,愈伤分化率达98%以上,愈伤的生长情况好,质地疏松,活力旺盛。生根步骤中,所述生根培养基是:选取新鲜的ms培养基,遮光条件下依次加入蔗糖28g/l、蜂蜜22g/l、维生素b10.15g/l、(r)-(-)-2,2-二苯基环戊醇0.02g/l、6-苄氨基腺嘌呤1.2mg/l、吲哚乙酸0.8mg/l、赤霉素0.05mg/l。6-苄氨基腺嘌呤、吲哚乙酸能够作用于细胞,可刺激形成层细胞分裂,刺激根细胞生长,促进木质部、韧皮部细胞分化,调节愈伤组织的形态建成,促进逾伤组织发根,赤霉素有助于灭菌,可以防止愈伤组织腐烂,(r)-(-)-2,2-二苯基环戊醇能够与吲哚乙酸发生络合反应,从而可以防止其被光氧化分解为醛与吲哚而失去调节作用,在适当条件下,生长素可以经由解络合反应而转变为游离型,经运输转移到作用部位起作用;经生根培养后,紫薯增培苗的根系粗壮茂密,根长度较长,粗度较粗,幼苗移栽成活率可达100%,是一种培育效果好、移栽成活率高的紫薯紫薯育苗方法。生根步骤中,所述生根培养的条件是:光照14h、光照强度3000lux、温度25℃,黑暗10h、温度16℃。经生根培养后,紫薯增培苗的根系粗壮茂密,根长度较长,粗度较粗,幼苗移栽成活率可达100%,是一种培育效果好、移栽成活率高的紫薯紫薯育苗方法。移栽步骤中,所述消毒为用多菌灵可湿性粉剂2000倍液与0.024%高锰酸钾溶液浸泡消毒8min。通过炼苗并消毒后,紫薯幼苗可以迅速适应栽培基质的土质环境,可以缩短缓苗时间。本发明方法中,首先将采自田间的紫薯幼嫩带芽茎段修剪,依次用抗环血酸溶液、酒精、氯化汞溶液消毒后置于含有苄基奎宁氯化物与乙醇的ms培养基中增殖培养,增殖培养的培养基表面放置有粉状活性炭,增殖培养基利于茎尖的分化增殖,可提高组织的蛋白酶活性和呼吸效率,强化糖酵解过程和线粒体活性,增强可溶性糖的分泌,加速茎尖组织尽早分化增殖;增殖培养获取的幼苗置于含有(r)-(-)-2,2-二苯基环戊醇和吲哚乙酸的ms培养基中进行生根培养,生根培养基中的吲哚乙酸不会因光氧化降解而失去调节作用,而且会刺激形成层细胞分裂,刺激根细胞生长,促进木质部、韧皮部细胞分化,调节愈伤组织的形态建成,促进逾伤组织发根,经生根培养后的紫薯增培苗的根系粗壮茂密,根长度较长,粗度较粗,幼苗移栽成活率可达100%,是一种培育效果好、移栽成活率高的紫薯紫薯育苗方法。实施例3:实施例3与实施例2基本相同,不同之处在于实施例3中,所述增殖培养基中未含有苄基奎宁氯化物。实施例4:实施例4与实施例2基本相同,不同之处在于实施例4中,所述增殖培养基中未含有乙醇。实施例5:实施例5与实施例2基本相同,不同之处在于实施例5中,所述生根培养基中未含有(r)-(-)-2,2-二苯基环戊醇。实施例6:实施例6与实施例2基本相同,不同之处在于实施例6中,所述生根培养基中未含有吲哚乙酸。对比例:对比例是常规紫薯的育苗方法。实验例:在相同地区,分别按照实施例1~6的育苗方法对相同品种的紫薯进行育苗,对紫薯育苗方法的各指标进行测定,实施例1~6中紫薯育苗方法各指标的测定结果见表1。表1:实施例1~6中紫薯育苗方法各指标的测定指标实施例1实施例2实施例3实施例4实施例5实施例6对比例病虫率·%10563416年产苗率提高·%30.231.014.615.013.211.0—育苗生长期·d16151820192230移栽成活率·%10010010098959691产量提高·%25.426.515.214.012.510.9—由表1可以看出,本发明方法的优选实施例1~2紫薯的育苗方法中,病虫率明显较对比例低,年产苗量较对比例提高达31%,育苗周期明显较对比例短,抗逆性和适应性强,移栽后成活率为100%,经济收入较对比例提高26.5%,说明本发明提供的紫薯的高效育苗方法具有良好的育苗效果。上述实施例中的常规技术为本领域技术人员所知晓的现有技术,故在此不再详细赘述。以上实施方式仅用于说明本发明,而并非对本发明的限制,本领域的普通技术人员,在不脱离本发明的精神和范围的情况下,还可以做出各种变化和变型。因此,所有等同的技术方案也属于本发明的范畴,本发明的专利保护范围应由权利要求限定。当前第1页12
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