一种小白菜亲本配合力测定方法及其应用与流程

本发明属于亲本配合力测定技术领域，具体涉及一种小白菜亲本配合力测定方法及其应用。

背景技术：

小白菜亲本配合力测定，包括大量配制小白菜组合以及试验鉴定，都属于小白菜育种中的重要工作内容。目前配制小白菜组合的主要方法仍然是人工剥蕾杂交，此项工作要对亲本(母本和父本均为自交不亲和系)做大量的测交。具体是在亲本开花之后，选取粗壮的枝条中下部的花蕾(一般2～3天后可以开花)，用镊子人工剥蕾，用父本的花粉进行授粉，然后套上隔离硫酸纸袋，挂上标签。这种人工剥蕾杂交技术对操作人员的工作技能要求高，工作效率低，种子数量少，往往很难获得足够的种子。由于人工杂交种子少，小白菜组合鉴定往往采用育苗移栽，这与实际生产(尤其南方夏秋季栽培亩用种量750g)采取撒播后间苗(5～6片真叶时)的栽培方式不同，当年组合区试及生产适应性鉴定也不能很好开展，既影响新品种选育进程，也不利于快速选育符合生产要求的新品种。

技术实现要素：

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种小白菜亲本配合力测定方法及其应用，方法简单，测定周期短，并且经配合力测定后，综合表现好的说明其亲本一般配合力高，优良单株(组合)即是其特殊配合力，可作为新品种进行下一步试验。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一种小白菜亲本配合力测定方法，包括以下步骤：(1)在封闭环境中，将若干种小白菜亲本种植在畦上，使各亲本同时抽薹开花；在每个所述畦上种植4行亲本，其中中间两行种植相同的亲本，两个边行分别种植不同亲本；

(2)待所述小白菜亲本开花后，在所述封闭环境中放熊蜂辅助授粉；

(3)待所述小白菜亲本结籽后，将同一亲本所结种子混合采收，不同亲本间所结种子单独采收；

(4)分别将各亲本采收到的种子单独撒播在小区内，在不同生育期进行鉴定，筛选出具有目的性状的优良单株；

(5)对筛选得到的优良单株进行dna检测，以确定所述优良单株的亲本组合。

优选的，步骤(1)所述畦的宽度为1.3m。

优选的，步骤(1)所述亲本种植时，每个亲本连续种植10棵后种植另一亲本。

优选的，所述亲本种植时的株距为30cm。

本发明还提供了所述方法在培育小白菜新品种中的应用。

本发明提供了一种小白菜亲本配合力测定方法，包括大量配制小白菜组合以及试验鉴定，将不同亲本进行杂交后，得到足够数量的杂交种子，将得到的杂交种子直接采用撒播方式进行试验鉴定，筛选出抗性强且符合育种目标的表型性状不同优良单株，对筛选出的优良单株(相同群体)进行dna检测(包括检测所有亲本基因组dna)，从而确定优良单株(组合)的亲本，小区试验鉴定综合表现好的说明其亲本一般配合力高，优良单株(组合)即是其特殊配合力。本发明所述小白菜亲本配合力测定方法具有能获得充足的试验用种、加快育种进程的优点。

附图说明

图1为组合5109(q1与q10杂交)，表现为直立、较耐热、生长快、叶片和叶柄深绿色；

图2为组合5121(q11与q13杂交)，表现为较束腰，叶片光泽度好，叶柄绿色，商品性好；

图3为组合5178(q8与q17杂交)，表现为束腰、叶片绿色有光泽，产量高；

图4为组合5181(q15与q17杂交)，表现为生长势强、叶片绿色、产量高。

具体实施方式

本发明提供了一种小白菜亲本配合力测定方法，包括以下步骤：(1)在封闭环境中，将若干种小白菜亲本种植在畦上，使各亲本同时抽薹开花；在每个所述畦上种植4行亲本，其中中间两行种植相同的亲本，两个边行分别种植不同亲本；

(2)待所述小白菜亲本开花后，在所述封闭环境中放熊蜂辅助授粉；

(3)待所述小白菜亲本结籽后，将同一亲本所结种子混合采收，不同亲本间所结种子单独采收；

(4)分别将各亲本采收到的种子单独撒播在小区内，在不同生育期进行鉴定，筛选出具有目的性状的优良单株；

(5)对筛选得到的优良单株进行dna检测，以确定所述优良单株的亲本组合。

本发明在封闭环境中，将若干种小白菜亲本种植在畦上，使各亲本同时抽薹开花；在每个所述畦上种植4行亲本，其中中间两行种植相同的亲本，两个边行分别种植其他亲本。本发明所述封闭环境优选包括覆盖防虫网的大棚、温室或者其他隔离条件。本发明优选根据不同亲本的抽薹开花时间与亲本的播始历期确定各个亲本的播种时间及播种量，以确定各亲本同时抽薹开花。本发明实施例中以20个亲本为例，每个亲本需要200株左右，每个亲本可采收种子2kg左右。本发明所述畦的宽度优选为1.3m，每个所述畦上种植4行亲本，呈abbc状。本发明在种植所述亲本时，每行每个亲本连续种植10棵后优选种植另一亲本，所述亲本种植时的株距优选为30cm。本发明在将所述亲本进行种植后，优选还包括在所述种植的地方进行标记。本发明对所述亲本的品种及来源并没有特殊限定，利用本领域的常见市售品种即可。

本发明待所述小白菜亲本开花后，在所述封闭环境中放熊蜂辅助授粉。本发明所述熊蜂的密度优选为一个标准大棚(长30m，宽7m)放蜂一箱(约80只)。

本发明待所述小白菜亲本结籽后，将同一亲本所结种子混合采收，不同亲本间所结种子单独采收。本发明对所述种子的采收方法并没有特殊限定，利用本领域的常规种子采收方法即可。

本发明分别将各亲本采收到的种子单独撒播在小区内，在不同生育期进行鉴定，筛选出具有目的性状的优良单株。本发明所述小区的面积优选为30m²，本发明对所述种子撒播后的管理方法并没有特殊限定，利用常规管理方法即可。本发明将所述种子播种后，优选还包括在不同生育期进行鉴定，从而筛选出抗性强且符合育种目标的表型性状不同优良单株。本发明所述不同生育期的鉴定优选包括：苗期生长势、叶色，采收期抗病性、株型、株高、叶形、叶色、叶柄形、叶柄色和单株质量等。

本发明对筛选得到的优良单株进行dna检测，以确定所述优良单株的亲本组合。本发明对所述dna检测的方法并没有特殊限定，利用本领域的常规方法即可。本发明在进行所述dna检测时，优选还包括提取所有亲本的基因组dna，从而获得所述优良单株的亲本组合。在本发明中，小区试验鉴定综合表现好的说明其亲本一般配合力高，优良单株(组合)即是其特殊配合力。

本发明还提供了所述方法在培育小白菜新品种中的应用。

下面结合实施例对本发明提供的一种小白菜亲本配合力测定方法及其应用进行详细的说明，但是不能把它们理解为对本发明保护范围的限定。

实施例1

选取20个不同亲本，亲本名称及来源如表1所示；

表1亲本名称及来源

每个亲本播种250粒种子(50穴的育苗盘5盘)，播种时间：2017年11月18日播种q1-q8，11月28日播种q9-q20；

在覆盖防虫网的大棚内，每畦(畦宽1.3m)种植4行，中间两行种植同一个亲本，株距30cm，每行亲本连续种植10株后更换另一个亲本(表2)，每个亲本种植的地方均要插牌子标记；

表2亲本种植方案

放熊蜂辅助授粉；

各亲本(组合)种子分开采收，同一个亲本的种子混合采收；各亲本收获的种子分别种植一个小区(小区面积30m²)，采取撒播方式进行试验鉴定，其他管理按常规生产进行，在不同生育期进行鉴定，筛选出抗性强且符合育种目标的表型性状不同优良单株：夏季耐热性试验鉴定，主要鉴定组合耐热、耐湿及抗病性，从q1、q10、q11、q13中筛选出优良单株；秋季优质高产试验鉴定，主要鉴定组合品质(商品性)、丰产性等，从q8、q15、q17中筛选出优良单株；

对筛选出的优良单株(相同群体)进行dna检测(包括检测所有亲本基因组dna)，从而确定优良单株(组合)的另一个亲本；

小区试验鉴定综合表现好的说明其亲本一般配合力高，优良单株(组合)即是其特殊配合力。经试验鉴定优良单株(组合)有：q1×q10与q10×q1(正反交，下同，图1)，q11×q13与q13×q11(图2)，q8×q17与q17×q8(图3)，q15×q17与q17×q15(图4)；

采用人工授粉方法配制这4个组合，经对比试验鉴定，试验于2019年7月10日播种，人工授粉配制的4个组合分别与相应的原来亲本收获的混合种子相连种植，采取撒播方式进行试验鉴定，其他管理按常规生产进行，于8月15日进行鉴定，试验结果验证本发明方法的准确性达100％。

以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。