本发明属于耐储性检测技术领域，具体涉及一种检测玉米耐储性的方法。
背景技术：
玉米是我国第一大农作物，在农业生产中占有着举足轻重的地位。进入21世纪以来，随着我国玉米种业的快速发展，越来越多的种子企业进入到种业市场，使得玉米种子生产量远远大于需求量，大量玉米种子需要进行短期或长期的贮藏。目前，大部分种业单位普遍使用常温仓库储藏剩余的玉米种子，即便是利用低温储藏库，随着贮藏时限的增长，种子活力也呈现出逐年下降的趋势，最后丧失使用价值，不仅提高了储藏成本，也会给制种单位带来不同程度的经济损失。研究表明，不同基因型的玉米种子之间耐储性存在显著性差异，这为评价耐储性种质、选育耐储性玉米种质提供了可能。因此，育种单位迫切需要一种简单、高效的玉米自交系耐储性鉴定方法，以筛选出耐储性玉米种质资源，为今后培育综合性状良好的耐储性玉米新品种提供丰富的基础材料。
目前，研究者们通常采用加速老化试验检测老化后种子的发芽势、发芽率、活力指数和相关酶活性等作为植物种子耐储性的主要指标进行评价和检测。常用的人工老化法包括40℃高温高湿老化法(hh)、饱和盐加速老化法(ssaa)、58±1℃热水浴老化法(hw)以及50％甲醇老化法(ms)，然而不同的方法对于耐储性的结果差异巨大，且没有研究表示哪种方法最合适，可作为检测标准。同时，随着玉米遗传育种水平的不断提高，以玉米自交系为代表的育种材料在耐储性等方面的能力已逐步提升，现有人工老化方法已不能满足育种家对玉米耐储性的要求。
技术实现要素：
有鉴于此，本发明的目的在于提供一种更为严苛的检测玉米耐储性的方法，提高胁迫处理条件并对人工老化方法的温湿度进行控制，最适宜鉴定东北玉米自交系种子的耐储性，实验操作简单明了，方法适宜推广。
为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：
本发明提供了一种检测玉米耐储性的方法，包括以下步骤：(1)当年收玉米种子晾干、脱粒后消毒，利用人工老化法对消毒后的玉米种子进行老化，获得老化种子；所述老化的温度为48～53℃，老化的湿度为95～100％；
(2)将所述老化种子晾干后播种，测定种子的发芽势和发芽率；
发芽率＝g7/n×100％式ⅰ；
其中式ⅰ中，g7为播种后7天的发芽数，n为老化种子总数；
当发芽率≥90％时为耐储型，75％～80％为中间型，＜75％为不耐储型。
优选的，步骤(1)所述玉米的种类包括自交系玉米。
优选的，步骤(1)中将当年收玉米种子晾干至含水量为14％后进行脱粒。
优选的，步骤(1)所述消毒包括：将脱粒后的种子在质量百分含量为8～10％的次氯酸钠水溶液中浸泡20～30分钟，用蒸馏水清洗三次后自然晾干。
优选的，步骤(1)所述老化在人工老化箱内进行，在人工老化箱启动前还包括对人工老化箱进行消毒，所述对人工老化箱的消毒包括用紫外灭菌灯灭菌8～12小时，然后用体积百分含量为75％酒精水溶液再次消毒。
优选的，所述老化的时间为68～73小时。
优选的，步骤(2)所述播种后还包括种子培养，所述种子培养的温度为25℃，所述种子培养的光照周期为每天16小时光照后8小时黑暗；在所述种子培养过程中，每隔两天浇水1次。
优选的，所述播种为将晾干后的老化种子种在盛有湿润蛭石的搪瓷盘内。
优选的，所述耐储性的判定标准还包括发芽势，所述发芽势＝g4/n×100％式ⅱ；
其中式ⅱ中，g4为播种后4天的发芽数，n为老化种子总数
本发明提供了一种检测玉米耐储性的方法，在利用高温高湿法进行玉米种子耐储性测试时，控制温度为48～53℃，湿度为95～100％，并测定老化后种子的发芽率，从而判断玉米种子的耐储性。本发明所述方法中，对于温湿度的控制，可作为鉴定东北玉米自交系种子耐储性的标准，实验操作简单明了，方法适宜推广。利用本发明所述方法，对吉林省农业科学院玉米研究所提供的60份北方春玉米区育种常用自交系材料进行耐储性测试，结果显示，筛选出耐储自交系9份，不耐储自交系47份，中间型4份。
具体实施方式
本发明提供了一种检测玉米耐储性的方法，包括以下步骤：(1)当年收玉米种子晾干、脱粒后消毒，利用人工老化法对消毒后的玉米种子进行老化，获得老化种子；所述老化的温度为48～53℃，老化的湿度为95～100％；
(2)将所述老化种子晾干后播种，测定种子的发芽势和发芽率；
发芽率＝g7/n×100％式ⅰ；
其中式ⅰ中，g7为播种后7天的发芽数，n为老化种子总数；
当发芽率≥90％时为耐储型，75％～80％为中间型，＜75％为不耐储型。
本发明将当年收玉米种子晾干、脱粒后消毒，利用人工老化法对消毒后的玉米种子进行老化，获得老化种子；所述老化的温度为48～53℃，老化的湿度为95～100％。本发明所述玉米的种类优选包括自交系玉米，更优选包括适合东北地区种植的玉米自交系。本发明优选将当年收玉米种子晾干至含水量为14％后进行脱粒。本发明对脱粒后的玉米种子进行消毒，所述消毒优选为在每一批脱粒后的玉米种子中随机选取50粒进行消毒，所述消毒包括：将脱粒后的种子在质量百分含量为8～10％的次氯酸钠水溶液中浸泡20～30分钟，用蒸馏水清洗三次后自然晾干。
本发明对消毒后的种子进行老化，所述老化优选在人工老化箱内进行，在人工老化箱启动前优选还包括对人工老化箱进行消毒，所述对人工老化箱的消毒包括用紫外灭菌灯灭菌8～12小时，然后用体积百分含量为75％酒精水溶液再次消毒。本发明所述人工老化箱优选为lh-150s(托普科学仪器(浙江)有限公司)。本发明在进行所述老化时，设定人工老化箱老化条件为48～53℃、湿度95～100％，老化时间68～73小时，待老化箱温度达到要求后，快速将准备好的种子放入老化箱内，待老化处理后取出放入干燥器内室温晾干。
本发明将所述老化种子晾干后播种，测定种子的发芽率。本发明在所述播种后优选还包括种子培养，所述种子培养的温度优选为25℃，所述种子培养的光照周期优选为每天16小时光照后8小时黑暗；在所述种子培养过程中，优选每隔两天浇水1次。本发明所述播种优选为将晾干后的老化种子种在盛有湿润蛭石的搪瓷盘内，所述搪瓷盘的规格优选为37cm×25cm×3.5cm(长×宽×深)。本发明所述湿润蛭石的粒径优选为2mm。
在本发明中，所述耐储性的判定标准优选还包括发芽势，所述发芽势＝g4/n×100％式ⅱ；
其中式ⅱ中，g4为播种后4天的发芽数，n为老化种子总数。在本发明中，发芽势可判断种子出苗是否整齐迅速，大部分材料发芽率和发芽势呈显著正相关，因此将发芽势作为辅助指标。
下面结合实施例对本发明提供的检测玉米耐储性的方法进行详细的说明，但是不能把它们理解为对本发明保护范围的限定。
实施例1
1、实验材料
北方春玉米区育种常用自交系60份，由吉林省农业科学院玉米研究所提供。
2、实验仪器及耗材
高温高湿人工老化箱(lh-150s，托普科学仪器(浙江)有限公司)
人工培养室，10×15cm纱网袋，搪瓷托盘，蛭石。
所有试剂均为分析纯，水为蒸馏水或同等纯度的水。
3、实验方法
(1)取当年秋季收获后的自交系果穗，每份材料收货后晾晒到籽粒含水量14％以下，脱粒后取50粒饱满一致玉米种子，10％次氯酸钠溶液浸泡30分钟，用蒸馏水清洗三次后自然晾干，用10×15cm纱网袋封好做好标记后备用。
(2)人工老化箱启动前用紫外灭菌灯灭菌10小时后用75％酒精进行再次消毒，保证老化箱体内干净、整洁、无杂菌。
(3)设定人工老化箱老化条件为50℃、湿度95％，老化时间72小时，待老化箱温度达到要求后，快速将准备好的种子放入老化箱内，待老化处理后取出放入干燥器内室温晾干。
(4)将老化后的种子种在盛有湿润蛭石(2mm)的搪瓷盘内(37×25cm)，25℃常温培养，光照16小时，8小时黑暗条件下培养，每隔两天用喷壶浇水(1升)，第四天起统计发芽数至第七天停止统计，计算种子的发芽势和发芽率，具体如表1所示。
计算公式：发芽势＝g4/n×100％；发芽率＝g7/n×100％。
表160种材料的耐储性测试
由表1可知，利用高温高湿人工老化法，筛选出耐储性自交系9份，不耐储自交系47份，中间型自交系4份。
同时，对上述60种材料的储存条件较长(常温库储存3年，平均温度20度左右，湿度50％左右)的种子，也进行了发芽实验(表2)，符合本实验数据的趋势。
表2常温保存自交系发芽实验结果
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。