一种梓叶槭种子保存方法与流程

本发明属于梓叶槭种子保存技术领域，具体涉及一种梓叶槭种子保存方法。

背景技术：

梓叶槭(acercatalpifoliumrehd.)槭树科槭属乔木，为我国特有种，国家2级重点保护植物，主要分布于四川中部平原地区，散生于海拔500～1300m的亚热带常绿阔叶林中。作为极小种群树种，由于人为砍伐和毁林耕种等干扰，目前该物种在各分布区极其少见，处于濒危状态。

梓叶槭为中国特有的珍稀树种，又为槭树科槭属中较原始的种类，对探讨该科的系统演化及地理分布等有重要的科学价值。其树干高大，材质坚硬、致密，为优良的用材树种。其树形优美，冠幅大，又可作绿化观赏树种。然而，梓叶槭天然更新能力极差，进而严重影响了该物种的种群发展和保护，近年来，科学家已经对种子育苗技术开展了充分的研究，使得种子萌发能力有了大幅度的提升，但这仅限于当年生种子。梓叶槭种子在常规条件下保存1年，梓叶槭种子的萌发率也会急剧下降，甚至不育。梓叶槭种子无法在保存1年后继续保持发芽能力，在10个月左右丧失发芽能力，发芽率急剧下降，无法大规模培育，这为梓叶槭种质资源的保存提出了新的挑战，深入研究梓叶槭种子保存技术，可为梓叶槭种子的长期保存提供基础数据，为梓叶槭的合理保护与开发利用奠定科学基础。

技术实现要素：

针对现有技术中存在的上述问题，本发明提供一种梓叶槭种子保存方法，操作简单便捷，能够最大程度的保存梓叶槭种子的发芽能力，将种子的保存时间延长一年，种子的发芽率和发芽指数均保持在较高水平，有效解决了种子发芽率低、保存时间短等问题，便于梓叶槭种子的大规模培育种植，促进梓叶槭种植业的发展。

为实现上述目的，本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：提供一种梓叶槭种子保存方法，依次包括以下步骤：

(1)在梓叶槭果实成熟脱落前，采摘种子饱满、绿色褪去、棕黄色的果实，清除杂质后在0～4℃温度下保存；

(2)选择无病虫害的种子用稀释400～600倍的灭菌剂浸泡1～2h，然后在30～50mg/l的赤霉素溶液中浸泡30～60min，最后将种子在阴凉通风处晾干；

(3)去除种子果翅果皮，然后将种子和硅胶按重量比1～2:1混合，在常温下的密闭空间中放置3h以上，再将种子置于真空袋中进行真空处理，在3～5℃和7～8％湿度条件下保存。

进一步，灭菌剂为多菌灵、百菌清和0.05～0.2vt％氯化汞按体积比2～4:2～4:1混合而成的混合液。

进一步，灭菌剂为多菌灵、百菌清和0.05～0.2vt％氯化汞按体积比3:3:1混合而成的混合液。

进一步，灭菌剂中滴加有2～7滴聚山梨酯-80溶液。

进一步，赤霉素溶液中添加有十二烷基磺酸钠，十二烷基磺酸钠占赤霉素溶液体积的0.8～2％。

进一步，十二烷基磺酸钠占赤霉素溶液体积的1.5％。

进一步，步骤(2)中，先用稀释500倍的灭菌剂浸泡2h，然后在40mg/l的赤霉素溶液中浸泡45min。

进一步，步骤(3)中，将种子和硅胶按重量比1:1混合。

进一步，步骤(3)中，放置在4℃和8％湿度条件下保存。

进一步，硅胶为变色硅胶。

综上所述，本发明具备以下优点：

1、本发明的保存方法操作简单便捷，有效减少水分和空气进入种子内部，减缓种子呼吸作用，进而延缓种子的失活时间，能够最大程度地保存梓叶槭种子的发芽能力，将种子的保存时间延长一年，种子的发芽率和发芽指数均保持在较高水平，发芽率最高可达72％，发芽势最高为68％，发芽指数最高为8.74，有效解决了种子发芽率低、保存时间短等问题，便于梓叶槭种子的大规模培育种植，促进梓叶槭种植业的发展。

2、首先选取成熟脱落前种子饱满、绿色褪去、以棕黄色为主的梓叶槭果实，脱落前种子的发芽率高于脱落后，且棕黄色果实发芽率高于绿色果实，进一步提高发芽率；在0～4℃温度下保存，是最适宜梓叶槭的保存温度，避免较高温度损伤梓叶槭果实，影响发芽率；选择饱满、无病虫害的果实，规避发芽的不利因素，可以避免干瘪或有伤病种子出现不能发芽的情况，适当地提高发芽率和保存的经济性；种子先在灭菌剂中浸泡，可以有效杀菌，降低种子受细菌等微生物感染的可能性，避免发生霉变；再在赤霉素溶液中浸泡，赤霉素可以提高梓叶槭种子的抗逆能力，增强适应能力，使得种子经过长时期的保存储藏后，依然具备较高的活力。

3、种子去除果翅果皮后保存，降低了梓叶槭果翅对种子萌发的抑制作用，保存效果最好，种子生命力强，发芽整齐、出苗一致、发芽率高。采用硅胶进行干燥处理，硅胶能让种子在短期内快速脱水且不会对种子造成损伤，还可以清楚地指示种子的干燥状态，与其他干燥剂相比，硅胶具有经济实惠、分散度好、易于分离与识别等优势；将种子和硅胶按重量比1～2:1混合放置，既保证干燥效果，又经济实惠；进一步可以采用变色硅胶，如果变色硅胶变为粉红或红色，要及时更换硅胶，直到变色硅胶保持为蓝色，表明种子已完全干燥。干燥后在密闭空间放置，且放置后立即进行真空处理，是为了防止水分和空气与种子接触，提高发芽率。真空处理可以抑制种子呼吸和微生物生长，隔绝细菌和真菌侵染，保证种子的发芽率。在3～5℃和7～8％湿度条件为最适宜的保存条件，能够最大程度地保留梓叶槭种子的发芽能力，提高发芽率。

4、多菌灵、百菌清和0.05～0.2vt％氯化汞混合而成的灭菌剂，可以有效地杀灭细菌，多菌灵为内吸性杀菌剂，也兼有保护和治疗作用，不会对种子本身产生损伤，百菌清化学性质稳定，可以防止多种真菌性伤害，且对多菌灵产生抗药性的病害具有良好的效果，对多菌灵的杀菌起到补充作用，多菌灵和百菌清搭配使用效果更好；氯化汞作为重金属盐，细菌中的蛋白质能够与带正电的重金属离子结合形成蛋白质盐，发生蛋白质的不可逆沉淀反应，致使细菌死亡，具有较好的杀菌作用；而加入的聚山梨酯-80溶液可以促使氯化汞有效地渗透梓叶槭种子表层，使得杀菌效果更好，从而提高成活率。在赤霉素溶液中加入十二烷基磺酸钠，使得赤霉素溶液具有更好的渗透能力，进一步加强赤霉素溶液的抗逆作用，提高梓叶槭种子的发芽能力。

附图说明

图1为不同保存方法梓叶槭种子的发芽率；

图2为不同保存方法梓叶槭种子的发芽势；

图3为不同保存方法梓叶槭种子的发芽指数；

图4为不同保存时间下梓叶槭种子的发芽率。

具体实施方式

实施例1

一种梓叶槭种子保存方法，依次包括以下步骤：

(1)在梓叶槭果实成熟脱落前，采摘种子饱满、绿色褪去、以棕黄色为主的果实，清除杂质后在0℃温度下保存；

(2)选择无病虫害的种子用稀释400倍的灭菌剂浸泡1h，然后在30mg/l的赤霉素溶液中浸泡30min，最后将种子在阴凉通风处晾干；灭菌剂为多菌灵、百菌清和0.05vt％氯化汞按体积比2:2:1混合而成的混合液；灭菌剂中滴加有2滴聚山梨酯-80溶液，赤霉素溶液中添加有十二烷基磺酸钠，十二烷基磺酸钠占赤霉素溶液体积的0.8％；

(3)去除种子果翅果皮，然后将种子和硅胶按重量比1:1混合，在常温下的密闭空间中放置3h以上，再将种子置于真空袋中进行真空处理，在3℃和7％湿度条件下保存。

实施例2

一种梓叶槭种子保存方法，依次包括以下步骤：

(1)在梓叶槭果实成熟脱落前，采摘种子饱满、绿色褪去、以棕黄色为主的果实，清除杂质后在2℃温度下保存；

(2)选择无病虫害的种子用稀释500倍的灭菌剂浸泡2h，然后在40mg/l的赤霉素溶液中浸泡45min，最后将种子在阴凉通风处晾干；灭菌剂为多菌灵、百菌清和0.15vt％氯化汞按体积比3:3:1混合而成的混合液；灭菌剂中滴加有5滴聚山梨酯-80溶液，赤霉素溶液中添加有十二烷基磺酸钠，十二烷基磺酸钠占赤霉素溶液体积的1.5％；

(3)去除种子果翅果皮，然后将种子和硅胶按重量比1:1混合，在常温下的密闭空间中放置3h以上，再将种子置于真空袋中进行真空处理，在4℃和8％湿度条件下保存。

实施例3

一种梓叶槭种子保存方法，依次包括以下步骤：

(1)在梓叶槭果实成熟脱落前，采摘种子饱满、绿色褪去、以棕黄色为主的果实，清除杂质后在3℃温度下保存；

(2)选择无病虫害的种子用稀释500倍的灭菌剂浸泡2h，然后在45mg/l的赤霉素溶液中浸泡50min，最后将种子在阴凉通风处晾干；灭菌剂为多菌灵、百菌清和0.1vt％氯化汞按体积比3:2:1混合而成的混合液；灭菌剂中滴加有4滴聚山梨酯-80溶液，赤霉素溶液中添加有十二烷基磺酸钠，十二烷基磺酸钠占赤霉素溶液体积的1.2％；

(3)去除种子果翅果皮，然后将种子和硅胶按重量比1:1混合，在常温下的密闭空间中放置3h以上，再将种子置于真空袋中进行真空处理，在4℃和8％湿度条件下保存。

实施例4

一种梓叶槭种子保存方法，依次包括以下步骤：

(1)在梓叶槭果实成熟脱落前，采摘种子饱满、绿色褪去、以棕黄色为主的果实，清除杂质后在4℃温度下保存；

(2)选择无病虫害的种子用稀释600倍的灭菌剂浸泡2h，然后在50mg/l的赤霉素溶液中浸泡60min，最后将种子在阴凉通风处晾干；灭菌剂为多菌灵、百菌清和0.2vt％氯化汞按体积比4:4:1混合而成的混合液；灭菌剂中滴加有7滴聚山梨酯-80溶液，赤霉素溶液中添加有十二烷基磺酸钠，十二烷基磺酸钠占赤霉素溶液体积的2％；

(3)去除种子果翅果皮，然后将种子和硅胶按重量比2:1混合，在常温下的密闭空间中放置3h以上，再将种子置于真空袋中进行真空处理，在5℃和8％湿度条件下保存。

对比例1

一种梓叶槭种子保存方法，依次包括以下步骤：

(1)在梓叶槭果实成熟脱落前，采摘种子饱满、绿色褪去、以棕黄色为主的果实，清除杂质后在2℃温度下保存；

(2)选择无病虫害的种子用稀释500倍的多菌灵浸泡2h，然后在40mg/l的赤霉素溶液中浸泡45min，最后将种子在阴凉通风处晾干；

(3)去除种子果翅果皮，然后将种子和硅胶按重量比1:1混合，在常温下的密闭空间中放置3h以上，再将种子置于真空袋中进行真空处理，在4℃和8％湿度条件下保存。

分别采用实施例1和对比例1保存后种子进行发芽试验，并测定发芽率，实施例1中种子的发芽率为70％，而对比例1保存后种子的发芽率只有30％。这是由于灭菌剂和赤霉素溶液组合消毒灭菌的效果强于常规的多菌灵消毒效果，具有更好的杀菌作用，提高发芽率。

对比例2

对比例2与实施例2的不同之处在于，保存时不去除种子果翅果皮，不在真空条件下保存，温度和湿度条件不变。

对比例3

对比例3与实施例2的不同之处在于，保存时不去除种子果翅果皮，同样在真空条件下保存，温度和湿度条件不变。

对比例4

对比例4与实施例2的不同之处在于，保存时去除种子果翅果皮，但不在真空条件下保存，温度和湿度条件不变。

分别采用实施例2和对比例2～4的保存方法将梓叶槭种子保存24个月后，进行种子发芽试验，测定其发芽率、发芽势和发芽指数，分别见图1～3。

由图1可知，实施例2真空条件下保存的梓叶槭种子发芽率最高，达到72％，显著高于对比例2～4的32％、4％和58％；由图2可知，实施例2真空条件下保存的梓叶槭种子发芽势最高，达到了68％，高于对比例2～4的26％、2％和56％；由图3可知，实施例2真空条件下保存的梓叶槭种子发芽指数最大，为8.74，高于对比例2～4的1.76、0.18和4.97。本发明提供的先灭菌剂和赤霉素溶液灭菌，再除去果翅果皮在真空条件下保存的方法，相较于对比例2～4提供的其他方法，能够抑制种子呼吸和微生物生长，隔绝细菌和真菌侵染，更好的保存种子的发芽能力，提高发芽率，延长保存时间，便于梓叶槭种子的大规模培育种植。

再通过实施例2和对比例2提供的方法进行梓叶槭种子保存24个月，并分别在2个月、8个月、16个月和24个月测定种子的发芽率，其结果见图4。

由图4可知，本发明提供的保存方法能够将梓叶槭种子至少保存24个月，在24个月时发芽率仍在66％以上，呈现出良好态势，而常规的保存方法在8个月时发芽率骤降，甚至在后续保存过程中丧失了发芽能力。本发明能够有效减少水分和空气进入种子内部，减缓种子呼吸作用，进而延缓种子的失活时间，能够最大程度的保存梓叶槭种子的发芽能力，将种子的保存时间延长一年，种子的发芽率和发芽指数均保持在较高水平。

虽然结合附图对本发明的具体实施方式进行了详细地描述，但不应理解为对本专利的保护范围的限定。在权利要求书所描述的范围内，本领域技术人员不经创造性劳动即可作出的各种修改和变形仍属本专利的保护范围。