一种鸡禽白血病净化方法与流程

1.本发明属于家禽养殖技术领域，尤其涉及一种鸡禽白血病净化方法。


背景技术：

2.目前，家禽是指人工豢养的鸟类动物，主要为了获取其肉、卵和羽毛，也有作为其他用处。一般为雉科和鸭科动物，如鸡、鸭、鹅等，也有其他科的鸟类如火鸡、鸽、鹌鹑和各种鸣禽的。有家鸡、火鸡、珍珠鸡、鸽等陆禽及鸭、鹅等水禽，通常是以卵、肉、羽毛等的生产为目的，但也有为玩赏用而饲养的。其中，鸡禽是家禽中的一种。在鸡禽养殖过程中，易出现白血病。
3.鸡禽白血病是由禽白血病病毒(alv)和禽肉瘤病毒(asv)引起的多种肿瘤疾病的总称。在自然界中，只有鸡才能感染禽白血病。不同品种或品系的鸡对病毒感染和肿瘤发生的抗性有很大差异。鸡的易感性高于公鸡，主要发生在18周龄以上，死亡率为5％～6％。alv可通过产卵进行垂直和水平传播。因此，alv一直是蛋鸡养殖和产蛋中的重要疾病。
4.但是，现有技术将禽白血病的净化分为还原、控制和根除三个阶段，难度依次增加的问题；同时现有的鸡禽白血病净化技术成本高，效率低的问题，达不到完全净化禽白血病的目的。因此，亟需一种新的鸡禽白血病净化方法，以弥补现有技术中存在的问题及缺陷。
5.通过上述分析，现有技术存在的问题及缺陷为：现有技术将禽白血病的净化分为还原、控制和根除三个阶段，难度依次增加的问题；同时现有的鸡禽白血病净化技术成本高，效率低的问题，达不到完全净化禽白血病的目的。


技术实现要素：

6.针对现有技术存在的问题，本发明提供了一种鸡禽白血病净化方法。
7.本发明是这样实现的，一种鸡禽白血病净化方法，所述鸡禽白血病净化方法包括以下步骤：
8.步骤一，建立安全基础设施，在培育过程中实施安全管理；其中，所述安全基础设施，包括台酶标仪、台洗板机、二氧化碳培养箱、生物安全柜、台细胞专用显微镜、大通量冷冻离心机、超纯水机、干燥箱、恒温培养箱及移液器；所述安全管理，包括孵化过程阶段的安全管理、生产过程阶段的安全管理、免疫阶段的安全管理和改善饲养管理；
9.步骤二，在安全培育过程中，对鸡禽进行白血病净化；在鸡禽白血病净化过程中，根据不同培育阶段，采集不同的检测指标，去除显示阳性的鸡；其中，所述根据不同培育阶段，采集不同的检测指标，去除显示阳性的鸡，包括：
10.在1～5周龄，对家禽鸡进行逐只标记，并采集各个胎粪；胎粪样本经液氮冻融后进行alv p27抗原检测，若检出阳性，则淘汰雏鸡；未检出阳性的雏鸡，进行小群隔离饲养；
11.在6～10周龄，逐只采集进行alvp27抗原检测，淘汰所有阳性鸡只；
12.在23～25周龄，初产蛋蛋清逐只检测3枚，公鸡逐只采集精液样本，对蛋样和精液进行alv p27抗原检测，淘汰所有阳性鸡只；
13.在24～25周龄，禽白血病ab亚群和j亚群抗体抽检；
14.在35～45周龄，蛋清逐只检测3枚，公鸡逐只采集精液样本，对蛋样和精液进行alv p27抗原检测，淘汰所有阳性鸡只；
15.在45周龄以后，每10天逐只检测蛋清一次直至留种，胎粪及蛋清淘汰标准判定值为s/p≥0.1，病毒分离淘汰标准判定值为s/p≥0.08；
16.步骤三，在培育过程中对基础设施进行按时进行清理消毒、扩种以及注射疫苗：在鸡禽放入到基础设施之前，基础设施空置1～2周；对栏舍内所有设施设备进行整理、清扫、彻底消毒，对栏舍的周围场地、道路进行清扫、彻底消毒；同时在第1天、第13天、第14天，用三种不同的消毒液进行消毒；将检测阴性的鸡禽放入到设施中进行扩种，并对检测阴性的鸡禽注射疫苗。
17.进一步，步骤一中，所述孵化过程阶段的安全管理，包括：雏鸡的孵化需做到独立，做到单品系入孵和单家系出孵。
18.进一步，步骤一中，所述生产过程阶段的安全管理，包括：
19.培育阶段小笼饲养，产蛋阶段单笼饲养；
20.育成阶段须及时检测淘汰，而后将阴性鸡群搬入消毒后符合生物安全标准的鸡舍，并且须注意卫生安全，改善饲养管理；
21.人工输精时一定要做到一只鸡一个输精管，防止交叉污染。
22.进一步，步骤一中，所述免疫阶段的安全管理，包括：
23.通过禽白血病抗原检测试剂盒检测禽白血病病毒p27抗原，核心群减少活疫苗的使用，用基因工程苗取代弱毒疫苗。
24.进一步，步骤一中，所述改善饲养管理，包括：
25.将鸡舍进行熏蒸，地面和墙壁用1％～3％热火碱稀释液喷洒消毒；
26.雏鸡进入鸡舍后，先饮用温开水，再开食，并在饮水中添加少量的葡萄糖、有机酸、益生菌以及维生素c；
27.将饲料撒在浅料盘或塑料布上，保证每只雏鸡都能自由采食，同时将鸡舍的温度控制在33℃～38℃。
28.进一步，步骤二中，所述胎粪样本经液氮冻融后进行alv p27抗原检测，包括：
29.(1)将种蛋放置于纸袋中进行隔离孵化，每只鸡所产种蛋单独使用一个出壳纸袋，避免出现传播；将胎粪放置于离心管中，向离心管中加入样品稀释液，进行充分振荡均匀；
30.(2)振荡均匀的溶液快速放入到液氮中进行冷冻后取出，放入三十七摄氏度进行水浴进行融化；
31.(3)反复几次，使鸡禽白血病病毒p27抗原充分释放，离心取上清液用以检测胎粪中鸡禽白血病病毒p27抗原；鸡禽白血病病毒p27抗原采用等效的酶联免疫吸附试验试剂盒进行。
32.进一步，所述样品稀释液含有体积分数百分之十的新生牛血清的pbst溶液或商品化试剂盒专用稀释液。
33.进一步，步骤三中，将检测阴性的鸡禽放入到设施中进行扩种，包括：
34.将阴性鸡禽作为育种进行隔离饲养，阴性鸡禽放于同一笼中；
35.每个笼具之间采取阻隔措施，避免水平传播，同时避免笼间直接接触和直接气流
的对流。
36.进一步，步骤三中，所述对检测阴性的鸡禽注射疫苗，包括：
37.在进行疫苗注射时，进行检测；
38.利用鸡胚来源的细胞作为原材料生产的疫苗。
39.进一步，步骤三中，在对检测阴性的鸡禽注射疫苗进行免疫接种时，进行器械消毒和手部消毒，同时接种时每个鸡都更换一个针头。
40.结合上述的所有技术方案，本发明所具备的优点及积极效果为：本发明提供的鸡禽白血病净化方法，解决了现有技术将禽白血病的净化分为还原、控制和根除三个阶段，难度依次增加的问题，解决了现有鸡禽白血病净化技术成本高，效率低的问题，达到了完全净化禽白血病的目的。本发明可以避免病毒水平从感染胚胎的胰腺传播到新孵出的鸡，并且避免了胎粪冻融次数减少，导致漏检率增加的问题；同时本发明经长期用于净化禽白血病，各株禽白血病阳性率均小于1％，效果显著。
附图说明
41.为了更清楚地说明本技术实施例的技术方案，下面将对本技术实施例中所需要使用的附图做简单的介绍，显而易见地，下面所描述的附图仅仅是本技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下还可以根据这些附图获得其他的附图。
42.图1是本发明实施例提供的鸡禽白血病净化方法流程图。
43.图2是本发明实施例提供的生产过程阶段的安全管理方法流程图。
44.图3是本发明实施例提供的改善饲养管理方法流程图。
45.图4是本发明实施例提供的胎粪样本经液氮冻融后进行alv p27抗原检测的方法流程图。
46.图5是本发明实施例提供的在培育过程中对基础设施进行按时进行清理消毒处理的方法流程图。
具体实施方式
47.为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
48.针对现有技术存在的问题，本发明提供了一种鸡禽白血病净化方法，下面结合附图对本发明作详细的描述。
49.如图1所述，本发明实施例提供的鸡禽白血病净化方法包括以下步骤：
50.s101，建立安全基础设施，在培育过程中实施安全管理；
51.s102，在安全培育过程中，对鸡禽进行白血病净化；在鸡禽白血病净化过程中，根据不同培育阶段，采集不同的检测指标，去除显示阳性的鸡；
52.s103，在培育过程中对基础设施进行按时进行清理消毒，将检测阴性的鸡禽放入到设施中进行扩种，并对检测阴性的鸡禽注射疫苗。
53.本发明实施例提供的步骤s101中，所述安全基础设施，包括台酶标仪、台洗板机、
二氧化碳培养箱、生物安全柜、台细胞专用显微镜、大通量冷冻离心机、超纯水机、干燥箱、恒温培养箱及移液器。
54.本发明实施例提供的步骤s101中，所述安全管理，包括孵化过程阶段的安全管理、生产过程阶段的安全管理、免疫阶段的安全管理和改善饲养管理。
55.本发明实施例提供的孵化过程阶段的安全管理，包括：雏鸡的孵化需做到独立，做到单品系入孵和单家系出孵。
56.如图2所示，本发明实施例提供的生产过程阶段的安全管理，包括：
57.s201，培育阶段小笼饲养，产蛋阶段单笼饲养；
58.s202，育成阶段须及时检测淘汰，而后将阴性鸡群搬入消毒后符合生物安全标准的鸡舍，并且须注意卫生安全，改善饲养管理；
59.s203，人工输精时一定要做到一只鸡一个输精管，防止交叉污染。
60.本发明实施例提供的免疫阶段的安全管理，包括：通过禽白血病抗原检测试剂盒检测禽白血病病毒p27抗原，核心群减少活疫苗的使用，用基因工程苗取代弱毒疫苗。
61.如图3所示，本发明实施例提供的改善饲养管理，包括：
62.s301，将鸡舍进行熏蒸，地面和墙壁用1％～3％热火碱稀释液喷洒消毒；
63.s302，雏鸡进入鸡舍后，先饮用温开水，再开食，并在饮水中添加少量的葡萄糖、有机酸、益生菌以及维生素c；
64.s303，将饲料撒在浅料盘或塑料布上，保证每只雏鸡都能自由采食，同时将鸡舍的温度控制在33℃～38℃。
65.本发明实施例提供的改善饲养管理，还包括：饲喂有机酸与益生菌，减少肠道反应，提高免疫力，减少鸡群应激；做好鸡笼、料槽、水线的卫生，注意灭蚊蝇、灭鼠。
66.本发明实施例提供的步骤s102中，所述根据不同培育阶段，采集不同的检测指标，去除显示阳性的鸡，包括：
67.在1～5周龄，对家禽鸡进行逐只标记，并采集各个胎粪；胎粪样本经液氮冻融后进行alv p27抗原检测，若检出阳性，则淘汰雏鸡；未检出阳性的雏鸡，进行小群隔离饲养；
68.在6～10周龄，逐只采集进行alvp27抗原检测，淘汰所有阳性鸡只；
69.在23～25周龄，初产蛋蛋清逐只检测3枚，公鸡逐只采集精液样本，对蛋样和精液进行alv p27抗原检测，淘汰所有阳性鸡只；
70.在24～25周龄，禽白血病ab亚群和j亚群抗体抽检；
71.在35～45周龄，蛋清逐只检测3枚，公鸡逐只采集精液样本，对蛋样和精液进行alv p27抗原检测，淘汰所有阳性鸡只；
72.在45周龄以后，每10天逐只检测蛋清一次直至留种，胎粪及蛋清淘汰标准判定值为s/p≥0.1，病毒分离淘汰标准判定值为s/p≥0.08。
73.如图4所示，本发明实施例提供的步骤s102中，所述胎粪样本经液氮冻融后进行alv p27抗原检测，包括：
74.s401，将种蛋放置于纸袋中进行隔离孵化，每只鸡所产种蛋单独使用一个出壳纸袋，避免出现传播；将胎粪放置于离心管中，向离心管中加入样品稀释液，进行充分振荡均匀；
75.s402，振荡均匀的溶液快速放入到液氮中进行冷冻后取出，放入三十七摄氏度进
行水浴进行融化；
76.s403，反复几次，使鸡禽白血病病毒p27抗原充分释放，离心取上清液用以检测胎粪中鸡禽白血病病毒p27抗原；鸡禽白血病病毒p27抗原采用等效的酶联免疫吸附试验试剂盒进行。
77.本发明实施例提供的样品稀释液含有体积分数百分之十的新生牛血清的pbst溶液或商品化试剂盒专用稀释液。
78.如图5所示，本发明实施例提供的步骤s103中，所述在培育过程中对基础设施进行按时进行清理消毒处理，包括：
79.s501，在鸡禽放入到基础设施之前，基础设施空置1～2周；
80.s502，对栏舍内所有设施设备进行整理、清扫、彻底消毒，对栏舍的周围场地、道路进行清扫、彻底消毒；
81.s503，在第1天、第13天、第14天，用三种不同的消毒液进行消毒；将检测阴性的鸡禽放入到设施中进行扩种，并对检测阴性的鸡禽注射疫苗。
82.本发明实施例提供的步骤s103中，所述将检测阴性的鸡禽放入到设施中进行扩种，包括：
83.将阴性鸡禽作为育种进行隔离饲养，阴性鸡禽放于同一笼中；
84.每个笼具之间采取阻隔措施，避免水平传播，同时避免笼间直接接触和直接气流的对流。
85.本发明实施例提供的步骤s103中，所述对检测阴性的鸡禽注射疫苗，包括：
86.在进行疫苗注射时，进行检测；
87.利用鸡胚来源的细胞作为原材料生产的疫苗。
88.本发明实施例提供的步骤s103中，所述在对检测阴性的鸡禽注射疫苗进行免疫接种时，进行器械消毒和手部消毒，同时接种时每个鸡都更换一个针头。
89.在本发明的描述中，除非另有说明，“多个”的含义是两个或两个以上；术语“上”、“下”、“左”、“右”、“内”、“外”、“前端”、“后端”、“头部”、“尾部”等指示的方位或位置关系为基于附图所示的方位或位置关系，仅是为了便于描述本发明和简化描述，而不是指示或暗示所指的装置或元件必须具有特定的方位、以特定的方位构造和操作，因此不能理解为对本发明的限制。此外，术语“第一”、“第二”、“第三”等仅用于描述目的，而不能理解为指示或暗示相对重要性。
90.以上所述，仅为本发明较优的具体的实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，都应涵盖在本发明的保护范围之内。