1.本技术涉及烟叶黑胫病实验模拟技术领域，特别是一种红花大金元品种盆栽烟叶的黑胫病诱导发病方法。
背景技术：
2.红花大金元(简称“红大”)作为特色烟叶的代表，受到广大卷烟企业的青睐。近年来全国烟区的红花大金元种植比例稳定在4％左右，在云贵川等西南地区的种植面积相对较大。但该品种操作诱导黑胫病难度大的问题。
3.在开展黑胫病药剂防治试验的过程中，为了更好、更准确的观察各种药剂的防治效果，需通过诱导使烟株发病后作为试验材料，通过对实验烟株施药后，根据烟株的抗病效果筛选出具有最佳防治效果的药剂。
4.为此，在药剂试验开始前，需对供试烟株进行诱导发病操作。
5.现有诱导发病方法：从田间选取已发生黑胫病的烟株，从该烟株上分离出黑胫病菌株，然后在试验室内进行该病菌株的培养和繁扩，待繁扩工作完成后再移栽烟叶。移栽时，将这些繁扩的菌株接种于每株烟的胫基部后再覆土移栽。
6.采用上述方法存在以下缺点：
7.1、烟苗移栽期受到菌株繁扩工作的限制，烟苗移植必须等黑胫病菌株繁扩完成后才能移栽，若菌株繁扩工作无法按期完成，会导致实验烟苗不能在最佳节令内完成移栽。影响实验烟苗的生长和成活率。
8.2、采用该方法虽然可以对实验烟苗定向准确接种黑胫病菌，但接种后对烟苗的诱导发病率低，诱导发病率仅为40％-60％之间。
技术实现要素：
9.本技术提供了一种红花大金元品种盆栽烟叶的黑胫病诱导发病方法，用于解决现有技术中存在的采用黑胫病菌繁扩后接种于实验烟苗的诱导发病方法，病菌繁殖进度干扰实验烟苗移植时机；烟苗诱导发病比例低的技术问题。
10.本技术提供了一种红花大金元品种盆栽烟叶的黑胫病诱导发病方法，包括以下步骤：
11.1)在烟苗移栽前，选取往年黑胫病高发田块内墒面下10～20cm的土壤作为诱导土样；
12.2)在烟苗移栽时，将所述诱导土样放在每株烟苗的胫基部，每株施用诱导土样不少于50g；
13.3)实验烟苗移栽7～10天后，在每天下午2～3点对实验烟苗进行补水；
14.黑胫病高发田块是指：黑胫病发病烟株数量占该田块种植烟株总量的90％以上。
15.采用上述方法能有效利用黑胫病高发病率土壤中自带黑胫病病菌，实现对实验烟苗的有效定向诱导，按上述方法选取诱导土壤，能避免其他杂菌对实验烟苗的感染，影响实
验正常进行。同时利用黑胫病的土传特性，采用诱导土壤进行诱导，能有效提高诱导后烟株染病比例至70％，高于现有常用菌种接种诱导方法。上述方法无需进行病菌培养、繁扩、接种，操作简单，适用于快速大批量的诱导黑胫病，对实验环境要求低，适合在缺乏无菌环境的实验场地上快速开展实验。在该时间段内对烟苗补水，能有利于促进烟苗植株感染的黑胫病发病，从而提高发病比例。
16.采用上述方法能在满足实验烟苗移植节令要求的前提下，完成对实验烟苗黑胫病的有效诱导，避免烟苗移植错失节令或无法诱导黑胫病的问题。
17.选取该深度的土壤作为诱导土壤能有效避免其他杂菌对诱导土壤的污染。
18.优选的，所述补水操作：每次补水每株实验烟苗补水量不少于500ml。按该补水量，能有效提高移植后的实验烟苗成活率，有利于实验的正常惊喜。
19.优选的，所述补水操作：每株实验烟苗连续补水7-10天。按此周期补水，能有效保证植物的正常生长。
20.优选的，所述补水操作在每天下午2点进行。在该时间段内对烟苗补水，发病比例最大。
21.优选的，所述往年为连续种植烟叶植株2年，且每年的黑胫病发病烟株数量占该田块种植总量的90％以上。采用该条件的诱导土壤，能满足对黑胫病菌的含菌量要求，避免杂菌对实验的干扰和影响，采用该条件的诱导土壤，仅能诱导得到黑胫病染病烟株，不会同时产生其他病菌烟株。
22.优选的，施用诱导土样将实验烟苗的胫基部周围围填。采用该操作能保证诱导土壤与烟株的发病部位有效接触，有利于提高发病比例。
23.本技术能产生的有益效果包括：
24.1)本技术所提供的红花大金元品种盆栽烟叶的黑胫病诱导发病方法，该诱导方法操作简单，不需要无菌环境下对黑胫病菌的培养、繁扩、接种操作，在任何烟区均可以开展实验操作；实验烟苗移栽时在胫基部填补诱导土壤，烟苗移植能按节令进行，有利于烟苗的生长和存活，提高实验的可靠性，采用该方法实验烟苗的黑胫病发病率70％以上。
具体实施方式
25.为使本发明实施方式的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合本发明实施方式中具体实验结果进行详细说明。
26.实施例
27.以下实施例中所用烟苗和其他实验仪器如无特殊说明，均为商业渠道获得。
28.实施例1
29.红花大金元品种盆栽烟叶的黑胫病诱导发病方法，包括以下步骤：
30.1)在烟苗移栽前，选取往年黑胫病高发田块内墒面下10cm的土壤作为诱导土样；
31.2)选取100株，播种以后生长70天的的红花大金元品种作为实验烟苗，在烟苗移栽时，将所述诱导土样放在每株烟苗的胫基部，每株施用诱导土样不少于50g；黑胫病高发田块是指：黑胫病发病烟株数量占该田块种植烟株总量的90％以上。
32.3)实验烟苗移栽7天后，每天下午2点的时候去给烟株补水，每次补水不少于每株500ml，连续补水7天。
33.实施例2
34.红花大金元品种盆栽烟叶的黑胫病诱导发病方法，包括以下步骤：
35.1)在烟苗移栽前，选取往年黑胫病高发田块内墒面下20cm的土壤作为诱导土样；
36.2)选取100株，播种以后生长65天的红花大金元品种作为实验烟苗，在烟苗移栽时，将所述诱导土样放在每株烟苗的胫基部，每株施用诱导土样不少于50g；黑胫病高发田块是指：黑胫病发病烟株数量占该田块种植烟株总量的90％以上。
37.3)实验烟苗移栽10天后，每天下午3点的时候去给烟株补水，每次补水不少于每株500ml，连续补水10天。
38.实施例3
39.红花大金元品种盆栽烟叶的黑胫病诱导发病方法，包括以下步骤：
40.1)在烟苗移栽前，选取往年黑胫病高发田块内墒面下15cm的土壤作为诱导土样；
41.2)选取100株，播种以后生长68天的的红花大金元品种作为实验烟苗，在烟苗移栽时，将所述诱导土样放在每株烟苗的胫基部，每株施用诱导土样不少于50g；黑胫病高发田块是指：黑胫病发病烟株数量占该田块种植烟株总量的90％以上。
42.3)实验烟苗移栽8天后，每天下午2：30点的时候去给烟株补水，每次补水不少于每株500ml，连续补水8天。
43.对比例1
44.与实施例1的区别在于：从田间选取已发生黑胫病的烟株，从该烟株上分离出黑胫病菌株，然后在试验室内进行该病菌株的培养和繁扩，待繁扩工作完成后再移栽烟叶。移栽时，将繁扩的菌株接种于100株实验烟苗每株的胫基部后，再覆土移栽。上述未详述操作均按微生物接种操作进行，在此不累述。
45.实施例1～3及对比例1对烟苗的黑胫病诱导结果如表1所示：
46.表1
47.项目黑胫病发病率(％)实验烟苗存活率(％)实施例181100实施例270100实施例379100对比例145％60
48.由表1可见，采用本技术提供方法对烟苗进行诱导，黑胫病的发病率能有效提高，有利于实验的正常进行。采用现有接种病菌的方法虽然能避免其他杂菌污染实验样本，但诱导染病率较低，还会对烟苗的生长产生影响。
49.尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换,凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。