云南独蒜兰的培育方法及其有效成分的检测方法与流程

1.本发明属于农业技术和轻工业交叉技术领域，具体涉及一种云南独蒜兰的培育方法及其有效成分的检测方法。


背景技术：

2.云南独蒜兰来源于兰科独蒜兰属，是一种兼具较高的药用价值和园艺价值的兰科植物。其干燥假鳞茎习称“冰球子”含有联苄基、二氢菲类化合物、生物碱、多糖等多种化学成分，在医药领域发挥很大的作用，具有清热解毒，化痰散结的功效，临床上用于痈肿疔毒，瘰疬痰核，蛇虫咬伤，癥瘕痞块。
3.然而，云南独蒜兰自然繁殖成功率低，加上由于近年来的过度采挖，资源短缺问题严重，市场价格居高不下，进行人工种植，是拯救珍稀药材云南独蒜兰资源，满足市场需求的唯一途径。目前人工栽培技术多使用化肥，而使用化肥有以下危害：化肥多数易溶于水，易被植物吸收利用，易潮解结成硬块导致养分的损失和施用的不便；同时化肥尤其是氮肥在硝化作用的过程中会释放出氢离子，引起土壤酸化，钙离子的联结作用，造成土壤颗粒分散，土壤团粒结构受到破坏，从而引起土壤的物理化学特性的变化，导致土壤板结，肥力下降；同时化肥的大量施用，大量非主要营养成分或有毒物质进入土壤，如硫铵中的硫酸根离子和氯铵中氯离子对土壤微生物的正常活动有抑制或毒害作用，导致产品品质下降；同时偏施某种化肥，导致作物营养失调，体内部分物质转化合成受阻，造成产品品质降低。而云南独蒜兰对微量元素需求较高，普通化肥难以满足全面的要求，进而影响了成活率和产量提高。在农业生产中利用有机肥已成为一项安全、环保、有效的农艺措施；而普通化肥或普通腐殖土肥料均不能使独蒜兰产量显著提高，更不能促进云南独蒜兰中总多糖、总多酚和类黄酮含量提高；因而云南独蒜兰人工种植技术尚不成熟，难以规模化发展，迫切需要对人工种植中施肥工艺加以改进，进一步提高云南独蒜兰产量及有效成分含量。


技术实现要素：

4.为解决以上至少一个问题，进一步提高云南独蒜兰假鳞茎产量和有效成分含量，本发明设计了一种云南独蒜兰高产、高浸出物含量、高总多糖、高类黄酮含量和高总多酚含量培育方法及总多糖、类黄酮含量和总多酚检测方法，本文优化云南独蒜兰施肥工艺优选有机肥作为基肥在云南独蒜兰产量、浸出物含量、总多糖含量、类黄酮含量和总多酚含量分别或同时取得较现有技术更好的结果；同时还提供了总多糖含量、类黄酮含量和总多酚含量的准确灵敏的检测方法。
5.一种云南独蒜兰的培育方法，包括以下步骤：挑选云南独蒜兰种茎进行种植，栽种时施用基肥为饼肥、腐熟羊粪、蚯蚓粪肥或腐熟鸡粪中至少一种。
6.优选的，栽种时施用基肥为饼肥、腐熟羊粪或蚯蚓粪肥中一种，培育的云南独蒜兰假鳞茎平均高度≧24.44mm，平均鲜重≧4.65g。
7.优选的，栽种时施用基肥为饼肥，培育的云南独蒜兰平均浸出物含量≧63.12％。
8.优选的，栽种时施用基肥为蚯蚓粪肥，培育的云南独蒜兰平均类黄酮含量≧7.32％。
9.优选的，栽种时施用基肥为饼肥，培育的云南独蒜兰平均总多糖含量≧129.75mg/g。
10.优选的，栽种时施用的基肥为腐熟鸡粪、腐熟羊粪或蚯蚓粪肥中一种，培育的云南独蒜兰平均总多酚含量≧6.19％。优选的，栽种时施用的基肥为蚯蚓粪肥，培育的云南独蒜兰平均总多酚含量≧7.21％。
11.一种云南独蒜兰有效成分的检测方法，用于检测上述培育方法培育的云南独蒜兰的有效成分含量，包括以下步骤：
12.将云南独蒜兰烘干至恒重，粉碎，过筛；
13.依次加入处理试剂制备试验组样品和空白组样品；
14.采用分光光度计测量有效成分含量。
15.优选的，所述有效成分为类黄酮、总多糖或总多酚；所述处理试剂为5％亚硝酸钠溶液、10％硝酸铝溶液、4％氢氧化钠溶液、5％苯酚溶液、酒石酸铁溶液和磷酸缓冲液中至少一种。
16.优选的，所述类黄酮的含量检测，包括以下步骤：
17.将云南独蒜兰烘干至恒重，粉碎，过筛之后，加入60％乙醇溶液制备0.1-20g/l的混合液，震荡提取后离心得第一产物；
18.取8z-20z体积所述第一产物的上清液加入z体积试剂一，混匀静置后再加入0.5z-1.5z体积试剂二，混匀静置后加入8z-15z试剂三，混匀静置得第一试验组样品；z为任一正实数；
19.同时取蒸馏水8z-20z体积加入z体积试剂一，混匀静置后再加入0.5z-1.5z体积试剂二，混匀静置后加入8z-15z体积试剂三，混匀静置得第一空白组样品；所述试剂一为5％亚硝酸钠溶液；所述试剂二为10％硝酸铝溶液；所述试剂三为4％氢氧化钠溶液；
20.分别测定所述第一试验组样品和所述第一空白组样品在510nm处吸光值，根据类黄酮标准曲线计算所述第一试验组样品实际浓度和类黄酮含量。
21.优选的，所述类黄酮标准曲线为y1＝5.02x1+0.0007，r
12
＝0.9996，x1为所述第一试验组样品实际浓度，y1为第一试验组样品对应类黄酮含量，r
12
为决定系数；所述过筛使用40目筛；所述震荡提取为60℃震荡提取2h；所述离心的条件为10000g，25℃，离心10min。
22.优选的，所述总多糖的含量检测，包括以下步骤：
23.将云南独蒜兰烘干至恒重，粉碎，过筛之后，加入v体积水制备1-100g/l的混合液，第一次水浴处理后离心得第二产物；v为任一正实数；
24.取所述第二产物的上清液0.1v-0.5v，加入0.4v-2v无水乙醇，混匀后静置过夜，离心得第三产物；
25.所述第三产物离心后取沉淀加水10v-30v，充分混匀溶解沉淀得第四产物；取0.2v-0.8v所述第四产物，加入0.1v-0.4v体积试剂四和0.8v-1.2v浓硫酸，混匀后第二次水浴反应，流水冷却得第二试验组样品；所述试剂四为5％苯酚溶液；
26.同时取蒸馏水代替第二产物制得第二空白组样品，制备过程同所述第二试验组样品；
27.分别测定所述第二试验组样品和所述第二空白组样品在490nm处吸光值，根据总多糖标准曲线计算所述第二试验组样品实际浓度和总多糖含量。
28.优选的，所述总多糖标准曲线为y2＝15.962x
2-0.0037，r
22
＝0.9973，x2为所述第二试验组样品实际浓度，y2为第二试验组样品对应总多糖含量，r
22
为决定系数；所述过筛使用40目筛；所述静置过夜温度为4℃；所述第一次水浴为100℃密封水浴2h；所述离心的条件为10000g，离心10min；所述第二次水浴反应为90℃反应20min。
29.优选的，所述总多酚的含量检测，包括以下步骤：
30.将云南独蒜兰烘干至恒重，粉碎，过筛之后，加入x体积60％乙醇溶液制备10-80g/l的混合液，震荡提取后离心得第五产物；x为任一正实数；
31.取所述第五产物的上清液0.01x-0.1x体积加入60％乙醇定容至x并加入0.05x-0.5x体积试剂五，混匀静置后再加入0.05x-0.5x体积试剂六和0.09x-0.9x水，混匀静置得第三试验组样品；另取所述第五产物的上清液0.01x-0.1x体积加入0.05x-0.5x体积试剂六和0.07x-0.7x体积水混合均匀作为第三空白组样品；所述试剂五为酒石酸铁溶液；所述试剂六为磷酸缓冲液；
32.分别测定所述第三试验组样品和所述第三空白组样品在760nm处吸光值，根据总多酚标准曲线计算所述第三试验组样品的实际浓度和总多酚含量。
33.优选的，所述总多酚标准曲线为y3＝5.615x3+0.0012，r
32
＝0.9994，x3为所述第三试验组样品实际浓度，y3为第三试验组样品对应总多酚含量，r
32
为决定系数；所述过筛使用40目筛；所述震荡提取为60℃震荡提取2h；所述离心的条件为10000g，25℃，离心10min。
34.有益效果为：
35.(1)使用有机肥替代化肥可以有效避免化肥长期使用带来的板结、肥力下降和生态环境破坏问题，能长期保持土壤肥力并同时为云南独蒜兰模拟更合适的自然种植环境和提供更为均衡的营养；
36.(2)施用优选的有机肥，云南独蒜兰假鳞茎高度、假鳞茎单个鲜重及云南独蒜兰产量均有显著提高；其中选用蚯蚓粪肥作为基肥的假鳞茎的直径较腐殖土栽培提高4.03％；选用蚯蚓粪肥作为基肥的假鳞茎高度较腐殖土栽培提高28.66％；选用蚯蚓粪肥作为基肥的云南独蒜兰产量及假鳞茎单个鲜重较腐殖土栽培提高23.90％；
37.(3)施用优选的有机肥，云南独蒜兰总多糖含量、总多酚含量和类黄酮含量均有显著提高，其中选用蚯蚓粪肥作为基肥的总多糖含量较腐殖土栽培提高8.6％；其中选用蚯蚓粪肥作为基肥的类黄酮含量较腐殖土栽培最大提高7.32％；其中选用蚯蚓粪肥作为基肥的总多酚的含量较腐殖土栽培提高7.21％。
具体实施方式
38.为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明的技术方案进行详细的描述。显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动的前提下所得到的所有其它实施方式，都属于本文保护范围。
39.本实施方式公开一种云南独蒜兰的培育方法，包括以下步骤：挑选云南独蒜兰种茎进行种植，栽种时施用基肥为饼肥、腐熟羊粪、蚯蚓粪肥或腐熟鸡粪中至少一种。
40.本实施方式公开一种云南独蒜兰高产培育方法，栽种时施用基肥为饼肥、腐熟羊粪或蚯蚓粪肥中一种，培育的云南独蒜兰假鳞茎平均高度≧24.44mm，平均鲜重≧4.65g。
41.本实施方式公开一种云南独蒜兰高浸出物含量培育方法，栽种时施用基肥为饼肥，培育的云南独蒜兰平均浸出物含量≧63.12％。
42.本实施方式公开一种云南独蒜兰高类黄酮含量培育方法，栽种时施用基肥为蚯蚓粪肥，培育的云南独蒜兰平均类黄酮含量≧7.32％。
43.本实施方式公开一种云南独蒜兰高总多糖含量培育方法，栽种时施用基肥为饼肥，培育的云南独蒜兰平均总多糖含量≧129.75mg/g。
44.本实施方式公开一种云南独蒜兰高总多酚含量培育方法，栽种时施用的基肥为腐熟鸡粪、腐熟羊粪或蚯蚓粪肥中一种，培育的云南独蒜兰平均总多酚含量≧6.19％。优选的，栽种时施用的基肥为蚯蚓粪肥，培育的云南独蒜兰平均总多酚含量≧7.21％。
45.为了对上述方法培育的云南独蒜兰有效成分进行检测，本实施方式还公开一种类黄酮含量检测方法，用于上述培育方法培育的云南独蒜兰检测类黄酮，包括以下步骤：
46.将云南独蒜兰烘干至恒重，粉碎，过40目筛之后，加入60％乙醇溶液制备0.1-20g/l的混合液，60℃震荡提取2h，10000g，25℃，离心10min得第一产物；
47.取240μl体积所述第一产物的上清液加入30μl体积试剂一，混匀静置后再加入15μl体积试剂二，混匀静置后加入240μl试剂三，混匀静置得第一试验组样品；
48.同时取蒸馏水240μl加入30μl体积试剂一，混匀静置后再加入15μl体积试剂二，混匀静置后加入240μl试剂三，混匀静置得第一空白组样品；
49.分别测定所述第一试验组样品和所述第一空白组样品在510nm处吸光值，根据类黄酮标准曲线计算所述第一试验组样品实际浓度和类黄酮含量。
50.本实施方式还公开一种类黄酮含量检测方法，用于上述培育方法培育的云南独蒜兰检测类黄酮，包括以下步骤：
51.将云南独蒜兰烘干至恒重，粉碎，过40目筛之后，加入60％乙醇溶液制备20g/l的混合液，60℃震荡提取2h，10000g，25℃，离心10min得第一产物；
52.取600μl体积所述第一产物的上清液加入30μl体积试剂一，混匀静置后再加入45μl体积试剂二，混匀静置后加入450μl试剂三，混匀静置得第一试验组样品；
53.同时取蒸馏水600μl加入30μl体积试剂一，混匀静置后再加入45μl体积试剂二，混匀静置后加入450μl试剂三，混匀静置得第一空白组样品；
54.分别测定所述第一试验组样品和所述第一空白组样品在510nm处吸光值，根据类黄酮标准曲线计算所述第一试验组样品实际浓度和类黄酮含量。
55.本实施方式还公开一种类黄酮含量检测方法，用于上述培育方法培育的云南独蒜兰检测类黄酮，包括以下步骤：
56.将云南独蒜兰烘干至恒重，粉碎，过40目筛之后，加入60％乙醇溶液制备10g/l的混合液，60℃震荡提取2h，10000g，25℃，离心10min得第一产物；
57.取240μl体积所述第一产物的上清液加入30μl体积试剂一，混匀静置后再加入30μl体积试剂二，混匀静置后加入400μl试剂三，混匀静置得第一试验组样品；
58.同时取蒸馏水600μl加入30μl体积试剂一，混匀静置后再加入45μl体积试剂二，混匀静置后加入400μl试剂三，混匀静置得第一空白组样品；
59.分别测定所述第一试验组样品和所述第一空白组样品在510nm处吸光值，根据类黄酮标准曲线计算所述第一试验组样品实际浓度和类黄酮含量。
60.本实施方式还公开一种总多糖含量检测方法，用于上述培育方法培育的云南独蒜兰检测总多糖，包括以下步骤：
61.将云南独蒜兰烘干至恒重，粉碎，过40目筛之后，加入1ml体积水制备1g/l的混合液，100℃密封水浴2h，冷却后，10000g，离心10min；处理后离心得第二产物；
62.取所述第二产物的上清液0.01ml，加入0.4ml无水乙醇，混匀后4℃静置过夜，离心得第三产物，
63.所述第三产物离心后取沉淀加水1ml，充分混匀溶解沉淀得第四产物，取0.2ml第四产物，加入0.1ml试剂四和0.8ml浓硫酸，混匀后90℃水浴反应20min，流水冷却得第二试验组样品；
64.同时取蒸馏水代替第二产物制得第二空白组样品，制备过程同所述第二试验组样品；
65.分别测定所述第二试验组样品和所述第二空白组样品在490nm处吸光值，根据总多糖标准曲线计算所述第二试验组样品实际浓度和总多糖含量。
66.本实施方式还公开一种总多糖含量检测方法，用于上述培育方法培育的云南独蒜兰检测总多糖，包括以下步骤：
67.将云南独蒜兰烘干至恒重，粉碎，过40目筛之后，加入1ml体积水制备100g/l的混合液，100℃密封水浴2h，冷却后，10000g，离心10min；处理后离心得第二产物；
68.取所述第二产物的上清液0.5ml，加入2ml无水乙醇，混匀后4℃静置过夜，离心得第三产物，
69.所述第三产物离心后取沉淀加水30ml，充分混匀溶解沉淀得第四产物，取0.8ml第四产物，加入0.4ml试剂四和1.2ml浓硫酸，混匀后90℃水浴反应20min，流水冷却得第二试验组样品；
70.同时取蒸馏水代替第二产物制得第二空白组样品，制备过程同所述第二试验组样品；
71.分别测定所述第二试验组样品和所述第二空白组样品在490nm处吸光值，根据总多糖标准曲线计算所述第二试验组样品实际浓度和总多糖含量。
72.本实施方式还公开一种总多糖含量检测方法，用于上述培育方法培育的云南独蒜兰检测总多糖，包括以下步骤：
73.将云南独蒜兰烘干至恒重，粉碎，过40目筛之后，加入1ml体积水制备20g/l的混合液，100℃密封水浴2h，冷却后，10000g，离心10min；处理后离心得第二产物；
74.取所述第二产物的上清液0.2ml，加入0.8ml无水乙醇，混匀后4℃静置过夜，离心得第三产物，
75.所述第三产物离心后取沉淀加水16ml，充分混匀溶解沉淀得第四产物，取0.4ml第四产物，加入0.2ml试剂四和1ml浓硫酸，混匀后90℃水浴反应20min，流水冷却得第二试验组样品；
76.同时取蒸馏水代替第二产物制得第二空白组样品，制备过程同所述第二试验组样品；
77.分别测定所述第二试验组样品和所述第二空白组样品在490nm处吸光值，根据总多糖标准曲线计算所述第二试验组样品实际浓度和总多糖含量。
78.本实施方式还公开一种总多酚含量检测方法，用于上述培育方法培育的云南独蒜兰检测总多酚，包括以下步骤：
79.将云南独蒜兰烘干至恒重，粉碎，过筛之后，加入2.5ml的60％乙醇溶液制备10g/l的混合液，震荡提取后离心得第五产物；
80.取所述第五产物的上清液0.025ml体积加入60％乙醇定容至2.5ml加入0.125ml体积试剂五，混匀静置后再加入0.025ml试剂六和0.225ml水，混匀静置得第三试验组样品；另取所述第五产物的上清液0.025ml体积加入0.125ml试剂六和0.175ml水混合均匀作为第三空白组样品；
81.分别测定所述第三试验组样品和所述第三空白组样品在760nm处吸光值，根据总多酚标准曲线计算所述第三试验组样品的实际浓度和总多酚含量。
82.本实施方式还公开一种总多酚含量检测方法，用于上述培育方法培育的云南独蒜兰检测总多酚，包括以下步骤：
83.将云南独蒜兰烘干至恒重，粉碎，过筛之后，加入2.5ml的60％乙醇溶液制备80g/l的混合液，震荡提取后离心得第五产物；
84.取所述第五产物的上清液0.25ml体积加入60％乙醇定容至2.5ml加入1.25ml体积试剂五，混匀静置后再加入0.25ml试剂六和2.25ml水，混匀静置得第三试验组样品；另取所述第五产物的上清液0.25ml体积加入1.25ml试剂六和1.75ml水混合均匀作为第三空白组样品；
85.分别测定所述第三试验组样品和所述第三空白组样品在760nm处吸光值，根据总多酚标准曲线计算所述第三试验组样品的实际浓度和总多酚含量。
86.本实施方式还公开一种总多酚含量检测方法，用于上述培育方法培育的云南独蒜兰检测总多酚，包括以下步骤：
87.将云南独蒜兰烘干至恒重，粉碎，过筛之后，加入2.5ml的60％乙醇溶液制备80g/l的混合液，震荡提取后离心得第五产物；
88.取所述第五产物的上清液0.25ml体积加入60％乙醇定容至2.5ml加入0.25ml体积试剂五，混匀静置后再加入0.25ml试剂六和0.45ml水，混匀静置得第三试验组样品；另取所述第五产物的上清液0.25ml体积加入0.25ml试剂六和0.7ml水混合均匀作为第三空白组样品；
89.分别测定所述第三试验组样品和所述第三空白组样品在760nm处吸光值，根据总多酚标准曲线计算所述第三试验组样品的实际浓度和总多酚含量。
90.试验概况
91.试验材料：以云南独蒜兰为试验材料，选取个体大小一致的假鳞茎。
92.检测设备：紫外可见分光光度计。
93.试验方法
94.挑选大小均匀的云南独蒜兰种茎进行种植，栽种时施用不同基肥：采用单因素实验设计，设施用腐殖土的为对照。编号m1-m5分别为：饼肥、腐熟羊粪、蚯蚓粪肥、腐熟牛粪、腐熟鸡粪，ck腐殖土为空白对照组，每个处理3个平行，每个平行50株，基肥用量50g/株，其
余栽培方法相同。
95.浸出物含量测定：
96.参照2020版《中国药典》附录2201浸出物测定法测定，取供试品约4g，精密称定，置250ml-300ml的锥形瓶中，精密加水100ml，密塞，冷浸，前6h内时时振摇，再静置18h，用干燥滤器迅速滤过，精密量取续滤液20ml置已干燥置恒重的蒸发皿中，在水浴上蒸干后，于105℃干燥3h，置干燥器中冷却30min，迅速精密称定重量，以干燥瓶计算供试品中水溶性浸出物的含量。
97.类黄酮含量测定：
98.将云南独蒜兰烘干至恒重，粉碎，过40目筛之后，称取约0.02g，加入2.5ml60％乙醇，60℃震荡提取2h，10000g，25℃，离心10min，取上清液540μl加入30μl试剂一，混匀，25℃静置6min，再加入30μl试剂二，25℃静置5min，然后加入400μl试剂三，混匀25℃静置15min，用蒸馏水作为空白采用相同的处理方式，测定510nm处测定吸光值。按照标准曲线计算类黄酮的含量。标准曲线：y1＝5.02x1+0.0007，r
12
＝0.9996。
99.总多糖含量测定：
100.将云南独蒜兰烘干至恒重，粉碎，过40目筛之后，称取约0.05g，加入1ml纯水，充分匀浆，于100℃水浴2h(盖紧盖子)，冷却，10000g离心10min，取上清液0.2ml，加入0.8ml无水乙醇，混匀后4℃静置过夜，10000g离心10min，弃上清液，沉淀加纯水16ml，充分混匀溶解沉淀，取400μl溶液，加入200μl试剂四和1ml浓硫酸，混匀后90℃水浴反应20min，流水冷却，取1ml加入比色皿，于490nm下测定吸光值。以葡萄糖作为对照品，标准条件下测定回归方程为：y2＝15.962x
2-0.0037，r
22
＝0.9973。
101.总多酚含量测定：
102.将云南独蒜兰烘干至恒重，粉碎，过40目筛之后，称取约0.1g，加入2.5ml60％乙醇，60℃震荡提取2h，10000g，25℃，离心10min，取上清液，用60％无水乙醇定容至2.5ml，即为待测液，取待测液50μl加入250μl试剂五，混匀，25℃静置2min，加入试剂六250μl和纯水450μl，另取50μl待测液加入试剂六250μl和纯水700μl作为对照，混匀，25℃静置10min，加入1ml比色管内，于760nm处用对照管调零，测定吸光度。按照标准曲线计算总多酚的含量。标准曲线：y3＝5.615x3+0.0012，r
32
＝0.9994。
103.结果与分析
104.不同基肥对云南独蒜兰假鳞茎长势、单个假鳞茎鲜重的影响：
105.不同基肥处理对云南独蒜兰的假鳞茎直径、假鳞茎高度、须根个数和单个假鳞茎鲜重的影响情况见表1。
[0106][0107]
表1不同基肥对云南独蒜兰假鳞茎的影响
[0108]
注：同列数据后不同小写字母表示处理间差异显著(p＜0.05)，大写字母表示差异极显著(p＜0.01)。
[0109]
由表1可见，各基肥处理对云南独蒜兰假鳞茎直径有显著影响，假鳞茎直径的高低顺序为m3＞m1＞ck＞m2＞m4＞m5，其中m3处理假鳞茎直径最大，其次为m1处理，分别为21.67mm和21.59mm，比ck组增加了4.03％和3.65％，但两个处理均与ck没有显著差异；试验说明，无论上述哪种处理方式，对云南独蒜兰假鳞茎的直径都没有显著影响。
[0110]
假鳞茎高度的高低顺序为m2＞m3＞m1＞ck＞m5＞m4，m1、m2和m3处理假鳞茎高度均比ck处理高，其中以m2最高，为25.63mm，与m1，m3没有显著差异，与ck处理差异极显著；m5和m4处理假鳞茎高度均低于ck，且未与ck组呈现出统计学差异。试验说明m1、m2和m3处理有利于增加假鳞茎的高度，而m4和m5处理对假鳞茎高度没有影响。
[0111]
各处理的须根个数在7.27-8.75之间，且各处理之间没有差异；试验说明各处理对须根个数没有影响。
[0112]
单个假鳞茎的鲜重高低顺序为m3＞m2＞m1＞ck＞m4＞m5，m1、m2和m3处理组单个假鳞茎的鲜重均比ck高，其中以m3处理最高，为5.08
±
0.32g，比ck组增加了23.90％，且具有显著差异，但与m1、m2没有差异。试验说明m1、m2和m3处理有助于提高云南独蒜兰单个假鳞茎的鲜重。
[0113]
不同基肥对云南独蒜兰品质产生的影响：
[0114]
不同基肥对云南独蒜兰浸出物含量、总多糖含量、类黄酮含量和总多酚含量的影响见下表2。
[0115][0116]
表2不同基肥处理对云南独蒜兰品质的影响
[0117]
由表2可以看出，各个不同基肥处理组对各个品质指标都存在影响。浸出物含量高低顺序为m1＞m2＞m4＞ck＞m5＞m3，以m1处理为最高，达到63.12％，与其它各处理组均存在较明显的差异，其它各组之间无差异。
[0118]
总多糖含量的高低顺序为m3＞ck＞m2＞m1＞m4＞m5，m3处理的总多糖含量最高，为129.75mg/g，比ck增加了8.6％，二者具有显著的差异性。说明m3处理具有促进云南独蒜兰的总多糖合成和积累的作用。m2处理与ck组相比对云南独蒜兰总多糖含量没有显著的影响。m1、m4和m5处理都比ck组低，且与ck都具有显著的差异性，说明m1、m4和m5处理妨碍了云南独蒜兰中总多糖的合成和积累。
[0119]
类黄酮的含量高低顺序为m3＞ck＞m2＞m5＞m4＞m1，m3处理的类黄酮含量最高，为7.32％，比ck增加了4.57％，二者具有显著的差异性。说明m3处理有利于提高类黄酮的含量。m1、m2、m4、m5与ck之间没有统计学差异，说明m1、m2、m4、m5处理组对类黄酮的含量没有影响。
[0120]
总多酚的含量高低顺序为m3＞m5＞m2＞ck＞m1＞m4，m2、m3和m5处理的总多酚含量比ck高，其中以m3处理最高，为7.21％，比ck高19.37％，且具有统计学差异。m2和m5分别为6.19％和6.26％，比ck高2.48％和3.64％，但与ck相比都没有统计学差异。因此m3处理有利于云南独蒜兰总多酚的含量提高，而其余处理方式对云南独蒜兰总多酚的含量没有影响。
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结论
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不同基肥处理对云南独蒜兰产量产生的影响：
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在本试验条件下，栽种云南独蒜兰施用不同基肥后，70天测定不同基肥对云南独蒜兰假鳞茎直径、假鳞茎高度、须根数和单个假鳞茎鲜重的影响。云南独蒜兰适宜在疏松、透气、排水良好的蕨根，水苔或腐殖土中生长，因此本试验以腐殖土为对照，从试验结果分析来看，施用蚯蚓粪肥能提高云南独蒜兰的假鳞茎直径和单个假鳞茎鲜重，即可提高云南独蒜兰的产量，且效果较好。蚯蚓粪肥是将经蚯蚓消化有机废物产生的排泄物进行堆肥而制成的有机肥料，故含有丰富的营养物质和有益微生物，在作物生产上有着良好的应用前景。本试验与前人研究结果类似，确定了云南独蒜兰适宜施用蚯蚓粪肥，可以提高云南独蒜兰的产量。
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不同基肥处理对云南独蒜兰产量品质产生的影响：
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施用优选的有机肥，云南独蒜兰假鳞茎的直径、假鳞茎高度、假鳞茎单个鲜重及云南独蒜兰产量均有显著提高；其中假鳞茎的直径最大较腐殖土栽培提高4.03％；假鳞茎高度最大提高28.66％；云南独蒜兰产量及假鳞茎单个鲜重最大提高5.08％。
[0126]
施用优选的有机肥，云南独蒜兰总多糖含量、总多酚含量和类黄酮含量均有显著提高，其中总多糖含量最大较腐殖土栽培提高8.6％；类黄酮含量最大提高7.32％；总多酚的含量最大提高7.21％。
[0127]
研究表明有机肥对植物中的糖类有一定的提高作用。土壤中添加适量的有机肥可以改善水果，蔬菜、中药材等作物品质。本试验研究表明施用蚯蚓粪肥能显著提高云南独蒜兰的总多糖含量、总多酚含量和类黄酮含量，即提高云南独蒜兰的品质。而腐熟羊粪与腐殖土相比对云南独蒜兰中总多糖、总多酚和类黄酮的含量没有影响。
[0128]
在一些可选的实施例中，使用有机肥替代化肥可以有效避免化肥长期使用带来的土壤板结、肥力下降和生态环境破坏问题，能长期保持土壤肥力并同时为云南独蒜兰模拟更合适的自然种植环境和提供更为均衡的营养。
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在一些可选的实施例中，施用优选的有机肥，云南独蒜兰假鳞茎高度、假鳞茎单个鲜重及云南独蒜兰产量均有显著提高；其中选用蚯蚓粪肥作为基肥的假鳞茎的直径较腐殖土栽培提高4.03％；选用蚯蚓粪肥作为基肥的假鳞茎高度较腐殖土栽培提高28.66％；选用蚯蚓粪肥作为基肥的云南独蒜兰产量及假鳞茎单个鲜重较腐殖土栽培提高23.90％。
[0130]
在一些可选的实施例中，施用优选的有机肥，云南独蒜兰总多糖含量、总多酚含量和类黄酮含量均有显著提高，其中选用蚯蚓粪肥作为基肥的总多糖含量较腐殖土栽培提高8.6％；其中选用蚯蚓粪肥作为基肥的类黄酮含量较腐殖土栽培最大提高7.32％；其中选用蚯蚓粪肥作为基肥的总多酚的含量较腐殖土栽培提高7.21％。
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本领域的普通技术人员可以理解，上述各实施方式是实现本发明的具体实施例，而在实际应用中，可以在形式上和细节上对其作各种改变，而不偏离本发明的精神和范围。