1.本发明属于精油领域，具体涉及一种具有增效作用的防霉复合组合物及其制备方法和应用。
背景技术：
2.植物精油又被称为香精油，是从植物中提取到的天然生物活性成分，因具有独特气味和抑菌、杀菌功效，受到越来越多的关注和开发利用，又因天然植物中含有精油的属种数量丰富，具有取材方便的特点，在日常应用中的地位越来越高。
3.植物精油属于天然成分，它的产生及代谢早已有成熟的循环途径，植物精油的开发利用，不会对环境造成隐患，且由于化学类药剂的大量使用，菌类的耐药问题越来越棘手。植物精油是成分复杂的混合物，含有几十种甚至几百种成分，菌类难以产生抗性，同时具有高挥发性和低残留等特点，已成为绿色抑菌、杀菌药剂的重要来源之一。
4.肉桂精油是以樟科植物中国肉桂树的鲜枝叶、梗和树皮为原料，采用水蒸气蒸馏法提油，并经熏蒸精制而得。
5.芥末精油是通过将芥末种子研磨，与水混合并通过蒸馏提取所得的挥发油而得到的。
技术实现要素：
6.本发明目的是提供一种具有增效作用的防霉复合组合物及其制备方法和应用，本发明的防霉复合组合物具有高效抑菌效果，以弥补单一精油抑菌性能低下的不足。
7.植物精油的抑菌作用通常由其主要成分决定，不同的成分间也可能存在协同作用，复合精油将两种及以上的单方精油按照比例混合，不同植物精油产生的相加或协同作用可使其抑菌效果显著提升，使用复合精油会比单方具有显著优势。
8.本发明的具有增效作用的防霉复合组合物，按体积分数计，为肉桂精油10～50％和芥末精油50～90％。
9.进一步优选，具有增效作用的防霉复合组合物为肉桂精油和芥末精油的体积比为1:1～5。再进一步优选为具有增效作用的防霉复合组合物为肉桂精油和芥末精油的体积比为1:3～5。
10.本发明的第二个目的是提供上述具有增效作用的防霉复合组合物的制备方法，其是将肉桂精油和芥末精油进行混合均匀而得。
11.具体制备方法可以为：
12.s1、选择多个合适大小的调和复合精油需要的调和器具；
13.s2、选择精油种类，计算出总体积，并将其按照相应的比例添加到调和器具内部进行混合；
14.s3、在调和器具的表面贴上标签，并在标签上注明复合精油的种类和添加的各单方精油的比例；
15.s4、将调和之后的复合精油放置到阴凉的位置处进行保存。
16.优选的，所述调和复合精油的调和器具为深色玻璃瓶，方便保存精油。
17.本发明的第三个目的是提供上述具有增效作用的防霉复合组合物在制备防霉剂中的应用。
18.优选，所述的防霉剂是防黑曲霉、绿色木霉或产黄青霉剂。
19.例如将上述具有增效作用的防霉复合组合物在食品、纺织品、皮具制品等轻工业领域中的应用。
20.相较单种精油的应用，本发明的有益效果为：
21.1、本发明提供的具有增效作用的防霉复合组合物，通过各组分之间的相互作用，调配组合成具有抑菌效果显著，抗菌效果强的复合精油组合物，应用前景良好，以弥补单一精油抑菌性能低下的不足。
22.2、本发明提供的具有增效作用的防霉复合组合物的制备方法简单，操作方便，适用于大规模产业化生产，生产效率高。
23.3、本发明提供的具有增效作用的防霉复合组合物的应用为不同领域提供了具有杀菌、抑菌的产品，满足了不同行业的需求。
具体实施方式
24.以下实施例是对本发明的进一步说明，而不是对本发明的限制。
25.以下实施例中的肉桂精油购自生工生物工程(上海)股份有限公司，货号a501966
26.以下实施例中的芥末精油购自上海源叶生物科技有限公司,货号s27503
27.以下实施例中的平板购自南通百耀实验器材有限公司，货号yj-c-90，规格为90*15mm
28.实施例1
29.将培养基中的黑曲霉、绿色木霉、产黄青霉孢子分别用加入了0.05％吐温80的无菌水洗脱，多层纱布过滤后加入平板，再加入含有定量具有增效作用的防霉复合组合物的马铃薯葡萄糖琼脂(pda)培养基20ml，使培养基中最终孢子浓度为(1-3)
×
105cfu/ml，设置具有增效作用的防霉复合组合物中肉桂精油与芥末精油的体积比例为1：1(其制备方法是将肉桂精油与芥末精油按体积比1:1混合而得)，并设置浓度梯度：0.0078、0.0156、0.03125、0.0625ul/ml、0.125ul/ml，测定具有增效作用的防霉复合组合物的最小抑菌浓度，每个浓度3个重复。测定结果显示肉桂精油与芥末精油混合时，三种霉菌中黑曲霉和绿色木霉的最小抑菌浓度相同，为0.0625μl/ml；对产黄青霉的最小抑菌浓度为0.03125μl/ml。
30.实施例2
31.将培养基中的黑曲霉、绿色木霉、产黄青霉孢子分别用加入了0.05％吐温80的无菌水洗脱，多层纱布过滤后加入平板，再加入含有定量具有增效作用的防霉复合组合物的马铃薯葡萄糖琼脂(pda)培养基20ml，使培养基中最终孢子浓度为(1-3)
×
105cfu/ml，设置具有增效作用的防霉复合组合物中肉桂精油与芥末精油的比例为1：3(其制备方法是将肉桂精油与芥末精油按体积比1:3混合而得)，并设置浓度梯度：0.0078、0.0156、0.03125、0.0625ul/ml、0.125ul/ml，测定具有增效作用的防霉复合组合物的最小抑菌浓度，每个浓
度3个重复。测定结果显示肉桂精油与芥末精油混合时，对黑曲霉的最小抑菌浓度为0.03125μl/ml；对绿色木霉的最小抑菌浓度为0.125ul/ml；对产黄青霉的最小抑菌浓度为0.03125ul/ml。
32.实施例3
33.将培养基中的黑曲霉、绿色木霉、产黄青霉孢子分别用加入了0.05％吐温80的无菌水洗脱，多层纱布过滤后加入平板，再加入含有定量具有增效作用的防霉复合组合物的马铃薯葡萄糖琼脂(pda)培养基20ml，使培养基中最终孢子浓度为(1-3)
×
105cfu/ml，设置具有增效作用的防霉复合组合物中肉桂精油与芥末精油的比例为3：1(其制备方法是将肉桂精油与芥末精油按体积比3:1混合而得)，并设置浓度梯度：0.0078、0.0156、0.03125、0.0625ul/ml、0.125ul/ml，测定具有增效作用的防霉复合组合物的最小抑菌浓度，每个浓度3个重复。测定结果显示肉桂精油与芥末精油混合时，对黑曲霉的最小抑菌浓度为0.125ul/ml；对绿色木霉、产黄青霉的最小抑菌浓度为0.0625ul/ml。
34.实施例4
35.将培养基中的黑曲霉、绿色木霉、产黄青霉孢子分别用加入了0.05％吐温80的无菌水洗脱，多层纱布过滤后加入平板，再加入含有定量具有增效作用的防霉复合组合物的马铃薯葡萄糖琼脂(pda)培养基20ml，使培养基中最终孢子浓度为(1-3)
×
105cfu/ml，设置具有增效作用的防霉复合组合物中肉桂精油与芥末精油的比例为1：5(其制备方法是将肉桂精油与芥末精油按体积比1:5混合而得)，并设置浓度梯度：0.0078、0.0156、0.03125、0.0625ul/ml、0.125ul/ml，测定具有增效作用的防霉复合组合物的最小抑菌浓度，每个浓度3个重复。测定结果显示肉桂精油与芥末精油混合时，对黑曲霉、产黄青霉的最小抑菌浓度均为0.03125μl/ml；对绿色木霉最小抑菌浓度为0.125ul/ml。
36.实施例5
37.将培养基中的黑曲霉、绿色木霉、产黄青霉孢子分别用加入了0.05％吐温80的无菌水洗脱，多层纱布过滤后加入平板，再加入含有定量具有增效作用的防霉复合组合物的马铃薯葡萄糖琼脂(pda)培养基20ml，使培养基中最终孢子浓度为(1-3)
×
105cfu/ml，设置具有增效作用的防霉复合组合物中肉桂精油与芥末精油的比例为5：1(其制备方法是将肉桂精油与芥末精油按体积比5:1混合而得)，并设置浓度梯度：0.0078、0.0156、0.03125、0.0625ul/ml、0.125ul/ml，测定具有增效作用的防霉复合组合物的最小抑菌浓度，每个浓度3个重复。测定结果显示肉桂精油与芥末精油混合时，对黑曲霉的最小抑菌浓度为0.125ul/ml；；对绿色木霉、产黄青霉的最小抑菌浓度为0.0625ul/ml。
38.对比例1
39.将培养基中的黑曲霉、绿色木霉、产黄青霉孢子分别用加入了0.05％吐温80的无菌水洗脱，多层纱布过滤后加入平板，再加入含有定量单种肉桂精油的马铃薯葡萄糖琼脂(pda)培养基20ml，使培养基中最终孢子浓度为(1-3)
×
105cfu/ml，并设置浓度梯度0.0625、0.125、0.25、0.5ul/ml，测定单种肉桂精油的最小抑菌浓度，每个浓度3个重复，测定结果肉桂精油对三种霉菌的最小抑菌浓度。
40.对比例2
41.将培养基中的黑曲霉、绿色木霉、产黄青霉孢子分别用加入了0.05％吐温80的无菌水洗脱，多层纱布过滤后加入平板，再加入含有定量单种芥末精油的马铃薯葡萄糖琼脂
(pda)培养基20ml，使培养基中最终孢子浓度为(1-3)
×
105cfu/ml，并设置浓度梯度0.0625、0.125、0.25、0.5ul/ml，测定单种芥末精油的最小抑菌浓度，每个浓度3个重复，测定芥末精油对三种霉菌的最小抑菌浓度。
42.上述实施例和对比例所得的试验结果如下：
43.单种肉桂精油对黑曲霉的最小抑菌浓度(mic)为：0.25μl/ml；对绿色木霉最小抑菌浓度为0.125ul/ml；对产黄青霉最小抑菌浓度为0.125ul/ml。
44.单种芥末精油对黑曲霉的最小抑菌浓度(mic)为：0.125μl/ml；对绿色木霉最小抑菌浓度为0.125ul/ml；对产黄青霉最小抑菌浓度为0.0625ul/ml。
45.具有增效作用的防霉复合组合物中肉桂、芥末精油按照1：3，1：5混合时对黑曲霉的最小抑菌浓度(mic)均为：0.03125μl/ml。
46.具有增效作用的防霉复合组合物中芥末、肉桂精油按照1：3，1：5混合时，对绿色木霉的最小抑菌浓度均为0.125ul/ml。
47.具有增效作用的防霉复合组合物中肉桂、芥末精油按照1：1，1：3，1：5混合时，对产黄青霉的最小抑菌浓度为0.03125ul/ml。
48.上述实施例和对比例所得的试验结果通过fic指数分析。
49.联合抑菌效果评价：以分级抑菌浓度(fractional inhibitory concentration，fic)作为联合抗菌试验效果的判定依据。
[0050][0051]
fic指数判定标准：fic指数≤0.5时，为协同作用；0.5《fic≤1时，为相加作用；1《fic≤2时，为无关作用；fic指数》2时，为拮抗作用。
[0052]
对肉桂精油、芥末精油及两种复合精油(具有增效作用的防霉复合组合物)最小抑菌浓度结果分析：fic指数均小于等于1，具有明显抑菌增强效果，特别是在肉桂精油与芥末精油的体积比例为1：1～5(特别是1:3～5)的时候，其fic指数均小于≤0.5，具有协同作用。
[0053]
试验结果表明，由肉桂精油与芥末精油组成的复合精油(具有增效作用的防霉复合组合物)具有优异的抗霉菌活性，抑菌效果明显提高，对食品、纺织、皮革制品、五金制品具有优良防霉效果，通过对比实施案例及对比案例的抗菌试验结果可知，若缺少其中一种精油组分，抗菌活性大大减弱，由此可知，本发明的具有增效作用的防霉复合组合物中的精油组分缺一不可，精油组分具有显著增效的效果。
[0054]
以上对本发明的实施方式作了详细说明，但本发明不限于所描述的实施方式。对于本领域的技术人员而言，在不脱离本发明原理和精神的情况下，对这些实施方式进行多种变化、修改、替换和变型，仍落入本发明的保护范围内。