一种改善高龄南美白对虾人工受精率及孵化率的方法

本发明涉及海产品生产，具体涉及一种改善高龄南美白对虾人工受精率及孵化率的方法。

背景技术：

1、南美白对虾(litopenaeusvannamei)因肉质鲜美，含肉率高、抗逆性强、生长快、耐高密度及低盐度养殖、便于活体运输等优点，已成为我国产量最高、养殖面积最大的养殖对虾品种。随着南美白对虾养殖规模不断扩大，养殖户对其苗种的需求量也越来越大。在工厂化对虾人工育苗的过程中，大多数技术人员在对虾繁殖期内，周期性使其性腺发育成熟，以达到持续产苗的目的。现有技术中授权公告号为的cn109197717a的一种南美白对虾优质高产养殖方法，通过采用磁波互作法孵育虾苗，改善了育苗水质，使水中氨氮含量及化学耗氧量降低；提高了虾卵孵化率和虾苗成活率，起到了促进虾苗生长，增强抗逆能力的作用；通过施用生物诱孵液，进一步改善虾苗体质，使得虾苗虾体健壮；通过施用育饵肥，使虾池水体环境中有充足的饵料供放养的仔虾摄食，为南美白对虾的增产增收打下基础；通过搭配饲喂适合南美白对虾各生长发育时期的饲料，充分满足各时期的营养需求，最终实现南美白对虾的优质高产的目标。然而，实际人工育苗时，对于高龄南美白对虾(16月龄)的受精率和之后的孵化率与低龄南美白对虾(11月龄)的相比会明显下降。而技术人员为获得足够的苗种，通常会持续不断的对高龄南美白对虾亲本进行育肥、催产及受精，这不仅会显著降低南美白对虾的受精率及孵化率，还明显升高了高龄南美白对虾亲本的死亡率，增加育苗成本。因此，寻找一种高效、便捷的方法来提升高龄南美白对虾的人工受精率和孵化率已经是南美白对虾人工育苗亟待解决的关键问题之一。

技术实现思路

1、针对现有高龄南美白对虾受精率及孵化率降低的缺点，提供了一种高效、方便、廉价的提高高龄南美白对虾人工受精率和孵化率的方法。

2、为了实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

3、一种改善高龄南美白对虾人工受精率及孵化率的方法，包括以下步骤：

4、(1)挑选性腺排空的雌虾和雄虾；

5、(2)将epa(二十碳烯酸)和dha(二十二碳六烯酸)添加到高龄南美白对虾的饲料中，投喂南美白对虾直至其性腺发育成熟；

6、(3)选取性腺发育成熟的雌雄对虾，将雄虾精荚挤出，用经过酒精消毒的镊子将精荚上的精子刮下，黏附在挑选好的雌虾纳精囊上，将雌虾放入孵化水体中，排卵、受精及孵化。

7、南美白对虾体内脂类吸收、加工、储存的主要器官是肝胰腺。在繁殖期间，肝胰腺中的中性脂和磷脂被大量消耗，每日从食物中吸收的脂类也很快被肝胰腺加工并输送到性腺。即在南美白对虾性腺发育时期，脂类由肝胰腺吸收、加工、转运至对虾的卵巢或精巢，以支持卵细胞和精子的发育。在此过程中，大量的高度不饱和脂肪酸(epa和dha)从肝胰腺中转出，从而导致肝胰腺中饱和脂肪酸含量升高而n-3等多不饱和脂肪酸含量显著下降。在性腺发育时期，南美白对虾摄入的外源性长链多不饱和脂肪酸脂类大多用于合成卵磷脂和睾丸酮。因此，饲料中添加epa和dha对南美白对虾性腺发育、配子(卵细胞和精子)的数量、质量及之后受精卵的孵化至关重要。

8、作为优选，挑选的雌雄南美白对虾应处于繁育期，其中雌虾为11月龄，雄虾为16月龄。

9、作为优选，按雌虾和雄虾体重的5％投喂饲料，4次/日。

10、作为优选，epa和dha的添加比例为1∶1，且epa和dha相对于饲料的比重高达15-25％。

11、作为优选，步骤(2)中饲料包括鱼粉、豆粕、花生粕、小麦粉、啤酒酵母、血粉、虾壳粉、鸡肉粉、维c磷酸酯、大豆磷脂、维生素预混料、矿元素预混料、磷酸二氢钙、asp：glu、赖氨酸、苏氨酸、a-纤维素、豆油。

12、作为优选，步骤(2)中饲料按照重量份数比计包括鱼粉0.06份、豆粕0.285份、花生粕0.19份、小麦粉0.21份、啤酒酵母0.05份、血粉0.04份、虾壳粉0.05份、鸡肉粉0.03份、维c磷酸酯0.001份、大豆磷脂0.01份、维生素预混料0.0025份、矿元素预混料0.0025份、磷酸二氢钙0.016份、asp：glu0.0037份、赖氨酸0.0011份、苏氨酸0.0006份、a-纤维素0.0176份、豆油0.03份。

13、作为优选，所述维生素预混料按照质量百分比计包括维生素a 70-75％，维生素b10.06-0.07％，维生素b20.14-0.15％，维生素b60.06-0.07％，维生素b12 0.01％，维生素c1.25-1.6％，维生素d 20-22％，维生素e0.15-0.17％。

14、作为优选，所述矿元素预混料包括钙50-55mg/kg，铜4-6mg/kg，铁20-30mg/kg，锌8-12mg/kg，锰3-6mg/kg，硒8-12mg/kg，碘15-22mg/kg，钴5-10mg/kg，所述矿元素预混料还包括镁和钾，且镁占总量的0.5-1.5％，钾占总量的0.1-0.3％。

15、研究表明，高龄南美白对虾体内吸收及转运多不饱和脂肪酸的能力显著下降，进而导致其性腺发育滞缓、配子数量及质量下降，最终导致其受精率和孵化率明显降低。增加饲料中epa和dha的含量可以提高高龄南美白对虾体内不饱和脂肪酸的含量，促进其性腺发育及提高其配子质量，以缓解由性腺衰老而引发的配子受精能力及之后孵化能力下降。

16、综上所述，提高南美白对虾饲料中epa和dha的含量，一方面可以增加雌虾和雄虾性腺发育指数，增加配子数量。另一方面，epa和dha也可以增加卵细胞内卵黄的发生，从而提高高龄南美白对虾受精卵细胞孵化率。epa和dha为油状物质，常作为营养强化剂添加到食物中用于补充机体缺乏多不饱和脂肪酸的情况。因此，该方法用价格低廉且安全性高的epa和dha作为改善高龄南美白对虾受精率和孵化率的补充剂。

17、与现有技术相比，本发明的有益效果是：

18、(1)与现有方法比较，本发明方法操作简单，经济实用，不影响南美白对虾幼体发育和生长；

19、(2)在提高南美白对虾受精率的同时，增加了南美白对虾的孵化率；

20、实验证明，采用本发明方法对高龄南美白对虾进行人工受精，11月龄南美白对虾的gsi可以提高18-22％，受精率可以提高10-12％，孵化率升高22-30％。16月龄南美白对虾的gsi可以提高48-56％，受精率可以提高10-30％，孵化率升高19-20％。

技术特征：

1.一种改善高龄南美白对虾人工受精率及孵化率的方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的一种改善高龄南美白对虾人工受精率及孵化率的方法，其特征在于，挑选的雌雄南美白对虾应处于繁育期，南美白对虾为11月龄和16月龄。

3.根据权利要求2所述的一种改善高龄南美白对虾人工受精率及孵化率的方法，其特征在于，按雌虾和雄虾体重的5％投喂饲料，4次/日。

4.根据权利要求1所述的一种改善高龄南美白对虾人工受精率及孵化率的方法，其特征在于，epa和dha的添加比例为1:1，且epa和dha相对于饲料的比重高达15-25％。

5.根据权利要求4所述的一种改善高龄南美白对虾人工受精率及孵化率的方法，其特征在于，步骤(2)中饲料包括鱼粉、豆粕、花生粕、小麦粉、啤酒酵母、血粉、虾壳粉、鸡肉粉、维c磷酸酯、大豆磷脂、维生素预混料、矿元素预混料、磷酸二氢钙、asp：glu、赖氨酸、苏氨酸、a-纤维素、豆油。

6.根据权利要求5所述的一种改善高龄南美白对虾人工受精率及孵化率的方法，其特征在于，步骤(2)中饲料按照重量份数比计包括鱼粉0.06份、豆粕0.285份、花生粕0.19份、小麦粉0.21份、啤酒酵母0.05份、血粉0.04份、虾壳粉0.05份、鸡肉粉0.03份、维c磷酸酯0.001份、大豆磷脂0.01份、维生素预混料0.0025份、矿元素预混料0.0025份、磷酸二氢钙0.016份、asp：glu0.0037份、赖氨酸0.0011份、苏氨酸0.0006份、a-纤维素0.0176份、豆油0.005-0.03份。

7.根据权利要求5或6所述的一种改善高龄南美白对虾人工受精率及孵化率的方法，其特征在于，所述维生素预混料按照质量百分比计包括维生素a 70-75％，维生素b1 0.06-0.07％，维生素b2 0.14-0.15％，维生素b6 0.06-0.07％，维生素b12 0.01％，维生素c1.25-1.6％，维生素d 20-22％，维生素e 0.15-0.17％。

8.根据权利要求5或6所述的一种改善高龄南美白对虾人工受精率及孵化率的方法，其特征在于，所述矿元素预混料按照重量份数比计包括钙50-55mg/kg，铜4-6mg/kg，铁20-30mg/kg，锌8-12mg/kg，锰3-6mg/kg，硒8-12mg/kg，碘15-22mg/kg，钴5-10mg/kg。

9.根据权利要求8所述的一种改善高龄南美白对虾人工受精率及孵化率的方法，其特征在于，所述矿元素预混料还包括镁和钾，且镁占总量的0.5-1.5％，钾占总量的0.1-0.3％。

技术总结
本发明涉及海产品生产技术领域，公开了一种改善高龄南美白对虾受精率及孵化率的方法，将EPA和DHA(1：1)按0.025比重添加到高龄南美白对虾的饲料中，投喂饲料直至南美白对虾性腺发育成熟，人工受精后，将雌性高龄南美白对虾置于的30‰的海水环境中进行排卵、受精和孵化；本发明操作简单，成本低，操作时间短，不影响南美白对虾幼体发育和生长。

技术研发人员：刘广绪,韩毓,施巍,唐彧
受保护的技术使用者：浙江大学
技术研发日：
技术公布日：2024/1/13