一种防治菜青虫的液体制剂及其应用的制作方法

文档序号:35915634发布日期:2023-10-30 07:27阅读:64来源:国知局

本发明涉及植物病虫害防治,具体涉及一种防治菜青虫的液体制剂及其应用。


背景技术:

1、菜青虫主要危害大白菜、也可危害甘蓝、花椰菜、萝卜等十字花科蔬菜。以危害叶片为主,低龄幼虫仅啃食叶片的叶肉,留下一层透明的上表皮,在叶片上形成多个“天窗”,3龄后危害加重,被害后的叶片上,形成多个空洞或缺刻,发生严重时,可将叶片全部被吃光,只残留粗叶脉和叶柄,造成植株生长缓慢,甚至停止生长,苗期受害严重时,造成整株死亡,生长中后期,还会影响包心。由于叶片上出现大量的伤口,还容易引起白菜软腐病,结球期,幼虫还可以钻入心叶内为害,暴食心叶,并排出大量的粪便,污染菜心,使蔬菜品质变坏,降低蔬菜的品质。

2、目前,防治菜青虫的方法主要包括物理防治方法和化学药剂防治方法。其中,物理防治方法一般为在蔬菜上部加盖防虫网,或者是利用菜青虫成虫的趋向性(趋光性)在菜地里安放上黑光灯,以此来诱杀成虫;化学药剂防治方法一般使用800倍的25%灭幼脲3号、800倍的25%除虫脲、2000倍的4.5%高效氯氰菊酯、1500倍的5%氟虫腈、1500倍的2.5%多杀菌素等化学药剂在菜青虫高发期进行喷施防治。

3、然而,物理防治方法需要使用大量的防虫网,增加了防虫成本,且防治效果较差,化学防治法则容易导致农药残留污染,不符合现代绿色食品的理念。


技术实现思路

1、本发明提供的一种防治菜青虫的液体制剂及其应用,旨在解决上述背景技术中存在的问题。

2、为了实现上述技术目的,本发明主要采用如下技术方案:

3、第一方面,本发明公开了一种防治菜青虫的液体制剂,包括马尾草提取液和苏云金杆菌菌剂。

4、苏云金杆菌即苏云金芽孢杆菌(bacillus thuringiensis,bt)被发现已有100年的历史,其在害虫防治中发挥了巨大的作用,是近年来研究最深入、开发最迅速、应用最广泛的微生物杀虫剂。苏云金杆菌的防虫原理是其菌株可产生内毒素(伴胞晶体)和外毒素两类毒素,使害虫停止取食,害虫均因饥饿、血液败坏和神经中毒而死。

5、苏云金杆菌(bacillus thuringiensis,简称bt)是一种革兰氏阳性细菌,在形成芽胞的同时能产生对鳞翅目、双翅目、鞘翅目、同翅目、线虫等多种害虫具有特异杀虫活性的杀虫晶体蛋白(insecticidal crystal proteins,icps)。这些杀虫晶体蛋白具有对人畜无害、环境友好等优点。因此,苏云金杆菌被广泛地应用于农业、林业和公共卫生等领域的害虫防治,成为世界上应用最广产量最大的微生物杀虫剂。目前苏云金杆菌杀虫剂主流生产工艺是液体深层发酵,主要以各种工农业产品或农副产品为原料,其价格约占总生产成本35~59%,是生物杀虫剂难于普及的主要限制因素。研究表明苏云金杆菌在含氮,0.075-0.225%,含糖0.1-1.5%和碳比0.44~20.0%的范围内都能良好地生长。因此,如何采用低成本、当地可得的工农业废弃物为原料发酵生产苏云金杆菌杀虫剂是国内外的研究热点,例如,味精废水、废啤酒酵母浸出液、鸡舍垫料浸出液、乳清等都被尝试用作苏去全杆菌生产的发酵原料,然而这些原料通常需要繁琐、昂贵的预处理(如:脱脂、蛋白洗脱与浓缩等),发酵过程稳定性差,且往往不能及时供给。

6、苏云金杆菌可做微生物源低毒杀虫剂,以胃毒作用为主。该菌可产生两大类毒素,即内毒素(伴胞晶体)和外毒素,使害虫停止取食,最后害虫因饥饿和细胞壁破裂、血液败坏和神经中毒而死亡;而外毒素作用缓慢,在蜕皮和变态时作用明显,这两个时期是rna合成的高峰期,外毒素能抑制依赖于dna的rna聚合酶。该药作用缓慢,害虫取食后2天左右才能见效,持效期约1天,因此使用时应比常规化学药剂提前2~3天,且在害虫低龄期使用效果较好。对鱼类、蜜蜂安全,但对家蚕高毒。

7、苏云金杆菌制剂主要对部分鳞翅目害虫幼虫有较好的防治效果,可用来防治菜青虫、稻苞虫,尺蠖、松毛虫、烟青虫、玉米螟、棉铃虫、稻纵卷叶螟、蓑蛾、地老虎等。其杀虫原理是,苏云金杆菌经害虫食入后,寄生于寄主的中肠内,在肠内合适的碱性环境中生长繁殖,晶体毒素经过虫体肠道内蛋白酶水解,形成有毒效的较小亚单位,它们作用于虫体的中肠上皮细胞,引起肠道麻痹、穿孔、虫体瘫痪、停止进食。随后苏云金杆菌进入血腔繁殖,引起败血症,导致虫体死亡。

8、马尾草是禾本科狗尾草属一年生草本植物,因其形似马尾得名。根为须状,茎呈直立状,叶片扁平,为长三角状狭披针形或线状披针形,边缘粗糙,圆锥花序紧密呈圆柱状,直立或稍弯垂,主轴被较长柔毛,刚毛绿色或褐黄到紫红或紫色,颖果为灰白色。

9、马尾草虽然是杂草的一种,但是有着很高的药用价值,马尾草可以促进人体代谢,体内含有多种维生素以及矿物质元素,有清热解毒之功效,马尾草能够治疗跌打损伤,能够缓解淤血,同时还能减少疼痛,马尾草对于筋骨疼痛有很好的治疗效果,这是马尾草的医用价值。

10、马尾草提取液中含有丰富的营养素和矿物质,如维生素a、b、e,矿物质硅、锰、钾等等。尤其是含有丰富的硅酸和硅酸盐。同时,马尾草也具有杀虫的效果,能够提高被侵染部位细胞中具有抑菌杀菌效果的酶的活力,在受侵染时植株自身的抗病性更有效。同时,高浓度的硅酸对真菌孢子的萌发和菌丝生长均具有明显的抑制作用(ph值低抑制菌丝生长),硅化细胞的形成使作物表层细胞壁加厚,角质层增加,构成一个巩固的保护层,使昆虫不易咬动,病菌难以入侵,从而增强对病虫害的抵抗能力。

11、在本发明的较佳实施方式中,所述液体制剂中,马尾草提取液和苏云金杆菌菌剂的体积比为马尾草提取液:苏云金杆菌菌剂=1:3。

12、在本发明的较佳实施方式中,所述马尾草提取液采用如下方法制备:将马尾草放入锅中,加水煮沸15~20分钟,然后用纱布过滤,收集滤液,待冷却后使用。

13、在本发明的较佳实施方式中,所述苏云金杆菌菌剂采用如下方法制备:

14、(1)苏云金杆菌的培养:将苏云金杆菌接种于牛肉汁蛋白胨斜面培养基中培养,然后向含有菌株的斜面培养基中加入矿物油,于冰箱中冷藏备用;

15、(2)将步骤(1)培养后的菌株活化后转入茄瓶中培养,在菌株生长良好时用灭菌生理盐水洗脱,洗脱物即为苏云金杆菌接种物;

16、(3)苏云金杆菌接种物的发酵:将苏云金杆菌接种物接种至含有发酵培养基的发酵罐中,发酵,待孢子生成达90%以上后,完成液体发酵,然后将发酵物过滤除渣,向滤液中加入黄原胶,当菌数达到40亿/毫升时,将滤液冷冻干燥,即得苏云金杆菌菌剂。

17、进一步的,步骤(1)中,所述牛肉汁蛋白胨斜面培养基采用如下方法制备:将牛肉膏3克,蛋白胨5~10克,nacl 5克,用蒸馏水溶解定容至1000毫升,调节ph值至7。

18、进一步的,步骤(1)中,培养温度为28℃,培养时间为48小时。

19、进一步的,步骤(3)中,所述发酵培养基采用如下方法制备:将玉米粉20kg、豆饼粉20kg、k2hpo47.2kg、kh2po45.3kg、mgso40.5kg、花生油2kg、水45kg混合均匀,调节ph值至6.8。

20、更进一步的,步骤(3)中,苏云金杆菌接种物的接种量为50kg。

21、在本发明的较佳实施方式中,步骤(3)中,发酵培养温度为30℃,通风量以每分钟料液体积:空气体积计为0.6:1,罐压为0.05mpa/cm2,搅拌速度为220rpm/min。

22、第二方面,本发明公开了一种如第一方面所述的液体制剂在防治菜青虫中的应用。

23、与现有技术相比,本发明具有如下有益效果:

24、本发明采用把苏云金杆菌制成细菌原液,通过对不同龄期的几种蚊虫幼虫进行敏感性测定,表明此种细菌原液对各类蚊幼虫有着较好的速杀和持效作用,无刺激性,对人、畜禽、鱼类安全,成本较低,操作方法简单,节省人力物力。

25、本发明的苏云金杆菌菌剂适合工厂化规模生产,由该苏云金杆菌菌剂配制而成的液体制剂使用安全,不污染环境,对非靶标生物无毒,与集约化养殖场现用防蚊制剂相比,它是一种杀蚊谱广、安全高效、使用便捷环境友好的高科技生物杀蚊制剂。

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