本发明属于植物组织培养,具体涉及一种小叶红豆快速繁殖培养基及其应用和种苗快速繁殖方法。
背景技术:
1、小叶红豆(ormosiamicrophylla)为豆科蝶形花亚科红豆属灌木或乔木,高约3~10m;树皮灰褐色,不裂。老枝圆柱形,紫褐色,近光滑,小枝密被浅褐色短柔毛;裸芽,密被黄褐色柔毛。奇数羽状复叶,近对生,长12~16厘米,叶柄长2.2~3.2cm,叶轴长6.5~7.8cm,密被黄褐色柔毛,叶轴在最上部一对小叶处延长5~7mm生顶小叶;小叶5~7对,纸质,椭圆形,长2~4cm,宽1~1.5cm,先端急尖,基部圆,上在榄绿色,无毛或疏被柔毛,下面苍白色,多少贴生短柔毛,中脉具黄色密毛,侧脉5~7对,纤细,下面隆起,边缘不明显弧曲不相连接,细脉网状;小叶柄长1.5~2mm,密被黄褐色柔毛。花序顶生。荚果有梗,近菱形或长椭圆形,长5~6cm,宽2~3cm,压扁,顶端有小尖头,果瓣厚革质或木质,黑褐色或黑色,有光泽,内壁有横隔膜,有种子3-4粒;种子长约2.2cm,宽6~8mm,种皮红色,坚硬,微有光泽,种脐长3~3.5mm,位于短轴一端。
2、小叶红豆因边材浅黄褐色,心材深紫红色至紫黑色,纹理通直,材质坚重,有光泽,为优良珍贵用材,是制高级家具及美术工艺品的优良材料。此外,小叶红豆具有通经、理气的功效,根也可入药。因此,小叶红豆具有较高的开发潜力。
3、而由于乱砍滥伐,小叶红豆赖以生存的生态环境遭到严重破坏,加之该树种生长缓慢,自然条件下种子传播扩散和自然繁衍的能力差,种子来源少,种苗紧缺,严重制约了该树种的发展规模。而常规采用播种繁殖,生长周期长,生长缓慢。利用组织培养可以快速繁育种苗的特点,目前,对小叶红豆组培快繁的研究尚未见报道。
技术实现思路
1、针对现有技术中的缺陷,本发明的目的提供一种小叶红豆快速繁殖培养基,能够提高种子萌发率,促进幼苗生长,进而为快速繁育小叶红豆种苗提供条件。
2、本发明的目的是通过以下技术方案实现的:
3、本发明提供了一种小叶红豆快速繁殖培养基,包括初代诱导培养基、继代增殖培养基和生根培养基,所述初代诱导培养基以ms培养基为基础培养基,还包括以下质量浓度组分:6-ba0.1~2.0mg·l-1、iaa0.01~0.5mg·l-1、蔗糖20~30g·l-1和琼脂3~4g·l-1;
4、所述初代诱导培养基的ph为5.0~5.8;
5、所述继代增殖培养基以b5培养基为基础培养基,还包括以下质量浓度组分:6-ba0.2~2.0mg·l-1、iaa0.02~0.2mg·l-1、kt0.02~0.2mg·l-1、维生素b22~10mg·l-1、蔗糖20~30g·l-1和卡拉胶3~5g·l-1;
6、所述继代增殖培养基的ph为5.0~5.8;
7、所述生根培养基以1/2ms培养基为基础培养基,还包括以下质量浓度组分:naa0.2~1.0mg·l-1、蔗糖15~25g·l-1和卡拉胶3~5g·l-1;
8、所述生根培养基的ph为5.0~5.8。
9、优选的,所述初代诱导培养基以ms培养基为基础培养基,还包括以下质量浓度组分:6-ba1.2~1.8mg·l-1、iaa0.08~0.16mg·l-1、蔗糖20~30g·l-1和琼脂3~4g·l-1;
10、所述初代诱导培养基的ph为5.0~5.8;
11、所述继代增殖培养基以b5培养基为基础培养基,还包括以下质量浓度组分:6-ba1.0~1.5mg·l-1、iaa0.08~0.1mg·l-1、kt0.04~0.1mg·l-1、维生素b25~8mg·l-1、蔗糖20~30g·l-1和卡拉胶3~5g·l-1;
12、所述继代增殖培养基的ph为5.0~5.8;
13、所述生根培养基以1/2ms培养基为基础培养基,还包括以下质量浓度组分:naa0.2~0.5mg·l-1、蔗糖20~25g·l-1和卡拉胶3~5g·l-1;
14、所述生根培养基的ph为5.0~5.8。
15、本发明提供了一种上述技术方案所述种苗快速繁殖培养基在小叶红豆种苗快速繁殖中的应用。
16、本发明提供了一种基于上述技术方案所述小叶红豆快速繁殖培养基的小叶红豆种苗快速繁殖的方法,包括以下步骤:
17、将小叶红豆外植体在所述初代诱导培养基中进行初代诱导培养,得到小叶红豆幼苗;
18、将小叶红豆幼苗在所述继代增殖培养基中进行继代增殖培养,得到小叶红豆丛生苗;
19、将小叶红豆丛生苗分株后在所述生根培养基中进行生根培养,得到小叶红豆生根苗。
20、优选的,所述初代诱导培养的温度为22~28℃;所述初代诱导培养的时间为30~50d;所述初代诱导培养的光照时间为10~15h·d-1;所述初代诱导培养的光照强度为35~45μmol·m-2·s-1。
21、优选的,所述继代增殖培养的温度为22~28℃;所述继代增殖培养的时间为30~50d;所述继代增殖培养的光照时间为10~15h·d-1;所述继代增殖培养的光照强度为35~45μmol·m-2·s-1。
22、优选的,所述生根培养的温度为22~28℃;所述生根培养的时间为10~20d;所述生根培养的光照时间为10~15h·d-1;所述生根培养的光照强度为35~45μmol·m-2·s-1。
23、优选的,种子进行初代诱导培养前,将种子进行消毒处理;所述消毒处理的方法包括:
24、将剥去外种壳的种子置于无纺布袋中;
25、将装有种子的无纺布袋于酒精中第一消毒后,再置于hgcl2水溶液中进行第二消毒。
26、优选的,将小叶红豆幼苗剪成带有1~2个腋芽的茎段在继代增殖培养基中进行继代增殖培养。
27、优选的,将小叶红豆丛生苗分株后选择株高为3~5cm的继代苗进行生根培养。
28、本发明的有益效果:
29、本发明提供了一种小叶红豆快速繁殖培养基,包括初代诱导培养基、继代增殖培养基和生根培养基。本发明提供的初代诱导培养基能够促进种子发芽,提高小叶红豆的种子萌发率,同时能促进小叶红豆幼苗的生长;本发明提供的继代增殖培养基能够促进幼苗增殖分化,显著提高不定芽苗的增殖系数;本发明提供的生根培养基可显著促进根的伸长,提高生根率的同时,还可增加生根数。采用本发明提供的小叶红豆快速繁殖培养基对小叶红豆外植体进行培养,培养得到的生根苗(即种苗)生长均匀,植株健壮,增殖系数稳定,并且能够在短时间内得到大量优良种苗。本发明提供的小叶红豆种苗繁殖培养基为小叶红豆的可持续利用和规模化种植奠定基础,为小叶红豆的快速繁殖、种质资源保护和利用提供技术参考。
1.一种小叶红豆快速繁殖培养基,其特征在于,包括初代诱导培养基、继代增殖培养基和生根培养基,所述初代诱导培养基以ms培养基为基础培养基,还包括以下质量浓度组分:6-ba0.1~2.0mg·l-1、iaa0.01~0.5mg·l-1、蔗糖20~30g·l-1和琼脂3~4g·l-1;
2.根据权利要求1所述的快速繁殖培养基,其特征在于,所述初代诱导培养基以ms培养基为基础培养基,还包括以下质量浓度组分:6-ba1.2~1.8mg·l-1、iaa0.08~0.16mg·l-1、蔗糖20~30g·l-1和琼脂3~4g·l-1;
3.权利要求1或2所述种苗快速繁殖培养基在小叶红豆种苗快速繁殖中的应用。
4.一种基于权利要求1或2所述小叶红豆快速繁殖培养基的小叶红豆种苗快速繁殖的方法,其特征在于,包括以下步骤:
5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,所述初代诱导培养的温度为22~28℃;所述初代诱导培养的时间为30~50d;所述初代诱导培养的光照时间为10~15h·d-1;所述初代诱导培养的光照强度为35~45μmol·m-2·s-1。
6.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,所述继代增殖培养的温度为22~28℃;所述继代增殖培养的时间为30~50d;所述继代增殖培养的光照时间为10~15h·d-1;所述继代增殖培养的光照强度为35~45μmol·m-2·s-1。
7.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,所述生根培养的温度为22~28℃;所述生根培养的时间为10~20d;所述生根培养的光照时间为10~15h·d-1;所述生根培养的光照强度为35~45μmol·m-2·s-1。
8.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,种子进行初代诱导培养前,将种子进行消毒处理;所述消毒处理的方法包括:
9.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,将小叶红豆幼苗剪成带有1~2个腋芽的茎段在继代增殖培养基中进行继代增殖培养。
10.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,将小叶红豆丛生苗分株后选择株高为3~5cm的继代苗进行生根培养。