一种腹主动脉瘤模型构建方法

本发明涉及生物，具体涉及一种腹主动脉瘤模型及其构建方法和应用。

背景技术：

1、主动脉瘤是因血管中层病变引起的主动脉直径的扩张，其一旦进展成为主动脉夹层或破裂时，危险系数大增，24小时自然病死率达50％。在腹主动脉瘤进程中，主动脉管壁炎症细胞浸润导致血管平滑肌细胞损伤和功能的失调是腹主动脉瘤发生发展中重要的病理过程。主动脉平滑肌细胞在经历过动脉瘤早期的凋亡后，逐渐由收缩表型转化为合成表型，导致平滑肌细胞收缩能力不足，不足抵抗血压的冲击，导致管壁进一步扩张。

2、目前，对于研究腹主动脉瘤的动物模型主要是弹性蛋白酶模型或apoe-/-小鼠联合ang ii模型。其中apoe-/-小鼠联合ang ii模型虽然操作简单，死亡率低，但是诱导的主动脉瘤主要在肾上腹主动脉和主动脉弓部，与人体腹主动脉瘤多见于肾下不同；其次，ang ii诱导的多为夹层动脉瘤且瘤形成部位不定，不利于机制的研究；最后该模型的造模成本高，不适合大批量的构建。弹性蛋白酶灌注模型通过动脉腔内弹力蛋白酶灌注，降解中层弹力蛋白，使其无法适应正常血流冲击，导致平滑肌细胞凋亡和动脉短期(14天)瘤样扩张，但是该模型操作较复杂，灌注时间长(1-3小时)，且无法构建一个动脉持续扩张的状态，不能很好模拟人腹主动脉瘤的逐步扩张的病程。

技术实现思路

1、为了解决上述问题，本发明提供了一种新型腹主动脉瘤模型及其构建方法和应用。

2、本发明第一方面提供了一种腹主动脉瘤动物模型的构建方法，所述构建方法包括肾动脉结扎及木瓜蛋白酶处理的步骤。

3、在某些实施方式中，所述肾动脉为左肾动脉。

4、在某些实施方式中，所述结扎为部分结扎；优选地，所述部分结扎为结扎左肾动脉30％-80％；更优选地为50％左右。

5、在某些实施方式中，所述木瓜蛋白酶处理为表面湿敷；优选地，所述表面湿敷时间为10-30分钟；更优选地，所述表面湿敷时间为15-20分钟。

6、在某些实施方式中，所述木瓜蛋白酶使用浓度为20-30g/l；优选地，所述木瓜蛋白酶使用浓度为25g/l左右。

7、在某些实施方式中，所述木瓜蛋白酶处理部位为腹主动脉与左肾动脉开口远端约1cm处。

8、在某些实施方式中，所述动物选自小鼠、大鼠或兔；优选地，所述动物为兔。

9、在某些实施方式中，所述方法进一步包括的肾动脉结扎前的动物准备、动物麻醉、腹部脱毛、切口以暴露左肾动脉及其远端的腹主动脉的步骤；可选地，所述方法进一步包括术后切口缝合、预防感染、模型功能验证步骤。

10、本发明第二方面提供了根据本发明第一方面所述的方法获得的动物模型在腹主动脉瘤发病机理研究中的应用。

11、本发明第三方面提供了根据本发明第一方面所述的方法获得的动物模型在筛选腹主动脉瘤治疗药物中的应用。

12、与现有技术相比，本发明的有益效果在于：

13、本发明联合左肾动脉部分结扎及木瓜蛋白酶湿敷构建了一种新型的兔腹主动脉瘤模型，更好地模拟人腹主动脉瘤高血压状态下持续扩张的病理状态。木瓜蛋白酶是木瓜乳胶中提取的一种酶，具有很强的弹性蛋白分解能力，可以破坏血管壁，其作用机制与弹力蛋白酶类似，但是其使用方法简单，无需动脉腔内灌注，仅需表面湿敷15-20min。结合左肾动脉结扎50％，诱导肾缺血性高血压，模拟人体高血压状态，导致腹主动脉瘤逐步扩张，整个建模周期28天，可以观察到动脉逐步扩张的状态。构建获得的动物模型可用于腹主动脉瘤发病机理研究及治疗药物筛选。

技术特征：

1.一种腹主动脉瘤动物模型的构建方法，其特征在于，所述构建方法包括肾动脉结扎及木瓜蛋白酶处理的步骤。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述肾动脉为左肾动脉。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述结扎为部分结扎；优选地，所述部分结扎为结扎左肾动脉30％-80％；更优选地为50％左右。

4.根据权利要求1-3任一项所述的方法，其特征在于，所述木瓜蛋白酶处理为表面湿敷；优选地，所述表面湿敷时间为10-30分钟；更优选地，所述表面湿敷时间为15-20分钟。

5.根据权利要求1-4任一项所述的方法，其特征在于，所述木瓜蛋白酶使用浓度为20-30g/l；优选地，所述木瓜蛋白酶使用浓度为25g/l左右。

6.根据权利要求1-5任一项所述的方法，其特征在于，所述木瓜蛋白酶处理部位为腹主动脉与左肾动脉开口远端约1cm处。

7.据权利要求1-6任一项所述的方法，其特征在于，所述动物选自小鼠、大鼠或兔；优选地，所述动物为兔。

8.根据权利要求1-7任一项所述的方法，其特征在于，所述方法进一步包括肾动脉结扎前的动物准备、动物麻醉、腹部脱毛、切口以暴露左肾动脉及其远端的腹主动脉的步骤；可选地，所述方法进一步包括术后切口缝合、预防感染、模型功能验证步骤。

9.根据权利要求1-8任一项所述的方法获得的动物模型在腹主动脉瘤发病机理研究中的应用。

10.根据权利要求1-8任一项所述的方法获得的动物模型在筛选腹主动脉瘤治疗药物中的应用。

技术总结
本发明公开了一种腹主动脉瘤动物模型的构建方法，包括左肾动脉部分结扎及木瓜蛋白酶湿敷处理的步骤。本发明的构建方法能够诱导肾缺血性高血压，模拟人体高血压状态，导致腹主动脉瘤逐步扩张，整个建模周期28天，可以观察到动脉逐步扩张的状态。构建获得的动物模型可用于腹主动脉瘤发病机理研究及治疗药物筛选。

技术研发人员：胡诚凯,谭辉,王利新,赖颢,程登峰,吴忱烨,张宇翀
受保护的技术使用者：复旦大学附属中山医院
技术研发日：
技术公布日：2024/1/15