本发明属于器官移植,具体涉及一种等容器官过冷保存方法。
背景技术:
1、器官移植是治疗器官晚期疾病的最为有效的治疗方法,随着器官移植技术的进步,高质量的供体器官成为了器官移植成功的关键条件。安全长效的器官保存技术是生物医药、器官移植等领域的共同迫切诉求。目前临床使用的保存方法可分为静态冷保存和机械灌注两种,存在着技术复杂、成本高昂及保存时间短的问题。低温过冷保存因其一方面可以通过较低的保存温度降低器官代谢水平,延长保存时间;另一方面可以避免冷冻保存中冰晶形成带来的机械损伤及渗透性损伤,有效实现器官高质量保存,被认为是临床人体器官保存的未来方向。
2、大部分供受体器官在时间、空间上存在差异,需要对离体器官进行长途运输(如飞机、高铁运输方式等),但运输过程中保存环境不稳定(如温度波动、振动、跌落等)。由于低温过冷保存处于亚稳态状态,在外界扰动条件下(机械扰动、热扰动等)易触发成核发生不可控结冰,对保存的器官造成严重损伤,包括冰晶损伤和渗透损伤,因此,目前低温过冷保存难以实现运输过程中的保存。
技术实现思路
1、鉴于此,本发明提供了一种等容器官过冷保存方法,能够提高过冷保存的抗扰动能力,提高过冷保存的稳定性,可实现运输过程中的过冷保存。
2、为达到上述目的,本发明采用以下技术方案:
3、本发明提供了一种等容器官过冷保存方法,包括以下步骤:
4、s1、将离体器官放置于保存容器内,加入保存液,使所述保存液浸没所述离体器官;
5、s2、加入液态的低温凝固疏冰材料,使所述低温凝固疏冰材料覆盖所述保存液;
6、s3、使所述低温凝固疏冰材料凝固,以构建等容条件,并在过冷保存温度下进行过冷保存;其中,所述低温凝固疏冰材料的熔点高于所述过冷保存温度。
7、优选地,在步骤s2中,所述低温凝固疏冰材料包括天然脂类、蜡质以及脂肪酸酯中的至少一种。
8、优选地,所述天然脂类包括橄榄油、亚麻籽油、葵花籽油、大豆油、核桃油、花生油、椰子油、棕榈仁油、牛油以及猪油中的至少一种;和/或,
9、所述蜡质包括蜂蜡、石蜡以及小烛树蜡中的至少一种;和/或,
10、所述脂肪酸酯包括肉豆蔻酸异丙酯以及棕榈酸乙酯中的至少一种。
11、优选地,所述低温凝固疏冰材料的熔点与所述过冷保存温度之间的差值小于等于10℃时,步骤s3包括:
12、s31、对所述低温凝固疏冰材料进行冷却,使所述低温凝固疏冰材料凝固,以构建等容条件;
13、s32、将所述保存容器放入温度设备中,在过冷保存温度下进行过冷保存。
14、优选地,步骤s31包括:
15、在所述低温凝固疏冰材料上放置铜盘,向所述铜盘内加入冷源,对所述低温凝固疏冰材料进行冷却,使所述低温凝固疏冰材料凝固,以构建等容条件;其中,所述冷源包括液氮以及干冰中的至少一种。
16、优选地,步骤s32包括:
17、将所述保存容器放入温度为4℃的温度设备中,所述温度设备以0.1℃/min的速率降温至过冷保存温度,进行过冷保存。
18、优选地,在步骤s3中,所述过冷保存温度为-10℃~0℃。
19、优选地,在步骤s3之后,还包括:
20、s4、取出离体器官之前,使所述低温凝固疏冰材料融化为液态。
21、优选地,步骤s4包括:
22、取出离体器官之前,将所述温度设备以0.1℃/min的速率升温至所述低温凝固疏冰材料的熔点以上,使所述低温凝固疏冰材料融化为液态。
23、优选地,在步骤s1中,所述保存液为uw保存液。
24、与现有技术相比,本发明的有益效果为:
25、(1)本发明的器官过冷保存的稳定性强,用于大动物离体器官(猪心脏)保存时,可在-4℃下稳定过冷保存40小时以上,在-3℃下稳定过冷保存144小时。
26、(2)本发明具有较强的环境适应性,在过冷保存温度下,固态的低温凝固疏冰材料能够有效抑制界面空化和体积空化的发生,具有很强的抗扰动能力,可适应多种运输方式下的环境。
27、(3)本发明具有极好的密封性,液态的低温凝固疏冰材料具有良好延展性,加入保存容器后良好覆盖保存液,凝固后有效密封保存液。
28、(4)本发明的操作简单、成本低廉,可在任意尺寸、形状容器内构建等容条件,适用于各种保存体积(1ml-1l),且对保存容器的密封性无较高要求,相比于传统利用刚性容器完全密封构建等容条件更为简便,可以有效降低保存容器的成本,同时不需要价格高昂设备,使用的低温凝固疏冰材料价格低廉,经济成本低,具有优异的推广前景。
29、(5)本发明具有较强的耐用性,取出器官之前,可通过升温使固态的低温凝固疏冰材料融化为液态,便于取样,且液态的低温凝固疏冰材料与保存液互不相溶分为油液两相,可通过简单分离两相进行重复循环利用。
1.一种等容器官过冷保存方法,其特征在于,包括以下步骤:
2.根据权利要求1所述的等容器官过冷保存方法,其特征在于,在步骤s2中,所述低温凝固疏冰材料包括天然脂类、蜡质以及脂肪酸酯中的至少一种。
3.根据权利要求1所述的等容器官过冷保存方法,其特征在于,所述天然脂类包括橄榄油、亚麻籽油、葵花籽油、大豆油、核桃油、花生油、椰子油、棕榈仁油、牛油以及猪油中的至少一种;和/或,
4.根据权利要求1所述的等容器官过冷保存方法,其特征在于,所述低温凝固疏冰材料的熔点与所述过冷保存温度之间的差值小于等于10℃时,步骤s3包括:
5.根据权利要求4所述的等容器官过冷保存方法,其特征在于,步骤s31包括:
6.根据权利要求1所述的等容器官过冷保存方法,其特征在于,步骤s32包括:
7.根据权利要求1所述的等容器官过冷保存方法,其特征在于,在步骤s3中,所述过冷保存温度为-10℃~0℃。
8.根据权利要求1所述的等容器官过冷保存方法,其特征在于,在步骤s3之后,还包括:
9.根据权利要求8所述的等容器官过冷保存方法,其特征在于,步骤s4包括:
10.根据权利要求1所述的等容器官过冷保存方法,其特征在于,在步骤s1中,所述保存液为uw保存液。