一种采用混配Sr18生物杀线剂防控蔬菜根结线虫病害的方法
【专利说明】一种采用混配Sr18生物杀线剂防控蔬菜根结线虫病害的 方法
[0001] 本发明得到国家自然科学基金项目资助(项目编号31272019)。
技术领域
[0002] 本发明涉及生物农药的混配方法，尤其一种采用混配SrlS生物杀线剂防控蔬菜 根结线虫病害的方法混剂中利用了SrlS制剂的促长、速杀以及阿维菌素持效期长的优点， 通过二者间的增效作用，弥补了单一制剂自身不足，克服了线虫的抗药性，提高了药剂的防 控效果，延长作物采摘期，增产增收明显，扩大了药剂的使用范围。
【背景技术】
[0003] 植物线虫是一类世界性分布的重要植物病原物，其寄生范围广，环境适应性强， 几乎每种作物都受到植物线虫的侵害，其中对作物危害最为严重的是根结线虫和孢囊线 虫。根结线虫可危害蔬菜、烟草、花生、果树、粮食、观赏植物以及中草药等2000多种植物， 尤其以番茄、黄瓜、西瓜、烟草、花生等经济作物受害严重。目前，全世界已经发现报道的 根结线虫有90余种，我国记载有发生的根结线虫50余种，以南方根结线虫 花生根结线虫（i￡areaaria)、北方根结线虫（i￡Aa/7/a)、爪睡根结线虫（i￡ 等四种常见根结线虫发生危害最普遍和严重，从我国海南岛到辽东半岛的广大 温暖地区均有发生，并且危害严重。根结线虫的危害程度仅次于真菌，已超过细菌、病毒成 为第二大植物病害，全球因根结线虫的危害每年损失达数十亿美元。蔬菜根结线虫病害在 保护地中造成的损失达20-30%，严重的可达70%，甚至绝产。华北、西北、东北等地区保护地 和华南露地蔬菜种植区根结线虫病已泛滥成灾，已成为保护地发展的主要限制因素，防控 形势十分严峻。
[0004] 蔬菜是我国第一大经济作物和最大的出口创汇农产品。发展以设施蔬菜为代表 的设施农业是实现传统农业向现代农业生产方式转变，建设新型现代农业的重要内容。 "十一五"期间我国政府加大了对设施农业的重视程度和投入力度，使得我国设施蔬菜获得 迅猛的发展，截至2012年底，种植面积约达470万hm2,分别占我国设施栽培的95%和世界设 施园艺的80%面积，成为世界上设施面积最大的国家，而且每年以10%左右的速度在增长。 我国设施蔬菜产值已达7000亿元，分别占蔬菜和全国种植业总产值65%和20%，已成为我国 许多区域的农业支柱产业。随着设施蔬菜专业化和规模化的发展，主要由土传病虫害等原 因引起的连作障碍问题也日益突出，因根结线虫病和番茄黄化曲叶病毒造成黄瓜、番茄等 作物大量减产甚至毁棚的现象在一些区域不断发生。此外，由于我国设施生产存在品种单 一、连作障碍等问题，导致蔬菜根结线虫病和番茄黄化曲叶病毒为害日益严重，已成为设施 蔬菜可持续生产的瓶颈，严重制约了我国设施蔬菜产业的发展。据报道，山东省蔬菜主产区 保护地蔬菜根结线虫病的发生已相当普遍，大棚发病率达到67. 6%，老棚发病率接近95%， 严重地区产量损失在70%以上，严重影响了当地蔬菜的品种和产量、降低了农户的经济效 益。北京市目前至少有23个乡镇发生线虫病害，受害的保护地面积达25万亩，以规模化的 种植园区尤为突出。河北省保护地总面积约400万亩，其中黄瓜、番茄、茄子、青椒等瓜果类 蔬菜面积约250万亩，受根结线虫危害约150万亩，严重危害面积近70万亩；另据不完全统 计，仅在以砂质土为主的广东地区，蔬菜根结线虫病的发生面积超过1500万亩，病害发生 后，一般减产10%_20%，严重达75%以上甚至绝收，有些蔬菜地不得不废弃或改种其它作物。 据估计，我国蔬菜每年因根结线虫危害造成的损失超数亿元。
[0005] 我国目前虽然农药生产企业上千家，生产的农药品种已有200多种，可唯独缺乏 杀线虫剂。因此，开发杀线虫剂已引起有关农药科研部门和生产企业的高度重视。随着植 物寄生线虫病害日趋严重以及人们环境和健康意识的增强，目前国内外对防治植物线虫病 害生物农药的市场需求量很大，但却缺少合适的生防制剂，在这方面存在很大空白。.真菌 的次生代谢产物作为第二代线虫生防因子，此种生物农药以直接作用于农作物线虫的方式 发挥作用，因此有着作用快、药效高、环境相容性好、不容易造成二次污染等优点而成为目 前国内外研究非常热门的领域。尽管已经报道的真菌杀线活性代谢物很多，但这其中已实 现产业化生产，作为生物农药用于防治植物线虫病害的则极少。在我国，绝大部分杀线剂是 高毒或中毒的化学农药，随着国家对环境保护力度的不断加大，它们面临着禁用的危险；相 比之下，生物农药则极少，主要是活菌剂淡紫拟青霉和代谢产物阿维菌素(未作为杀线虫剂 登记）两种。如长期使用同一种农药，必定会加速线虫对它们的抗性。因此，迫切需要开发 出新型的、环境友好的第二代线虫生防制剂农药，其潜在市场巨大。
[0006] 2014年课题组黄文坤发表在plosone上的文章：Wen-KunHuang,Jian-Hua Sun，Jiang-KuanCuijGang-FengWang,Ling-AnKong,HuanPeng,Shu-LongChen, De-LiangPeng.EfficacyEvaluationofFungusSyncephalastrumracemosumand ematicideAvermectinagainsttheRoot-KnotNematodeMeloidogyneincognitaon Cucumber[J].PlosOne, 2014,9(2):1-6.)文章中药剂发酵规模小，配方是PS,没有加麦 芽精，在PS培养基条件下形成的多为酸性物质，不利于在中性条件下起作用的杀虫物质的 产生，而且发酵滤液用l.Omol/LNaOH将pH调到7.0,会降低药效，增加土壤盐污染。同时未 充分体现SrlS对线虫的控制效果，与药剂使用配比不合适有关，由于试验地为根结线虫发 病严重大棚，土壤中线虫密度大，如使用SrlS剂量不足，不能将线虫控制在有效范围内，会 造成土壤中线虫再繁殖及加重对植株的侵染危害；再者施药时间方面也不甚合理，在移栽 前2天施药，未达到药剂作用的最佳时间，因此不能使药剂的作用得以充分发挥。
【发明内容】
[0007] 本发明针对上述存在的问题进行了改进： 1、采用5t罐规模发酵生产，使用PSM培养基添加了国产麦芽精，而且浓缩药剂使用前 未调PH值。其优点在于：（1)发酵规模放大后，产量增加，可扩大应用面积；（2)SrlS杀线 活性是多组分共同作用的结果，添加麦芽精有利于菌株在积累酸性代谢产物的同时，产生 在中性条件下起作用的杀线虫活性物质，从而提高其杀线虫的综合效果，而且使用国产麦 芽精的成本要大大低于进口麦芽精；（3)发酵滤液用I.Omol/LNaOH将pH调到7. 0,会降低 药效，增加土壤盐污染。
[0008] 2、对Srl8与阿维菌素的配比进行了改进，加大了Srl8的使用量，由原来的5:2 变为7. 5:2。其优点在于：（1)SrlS杀线剂的杀虫活性极高，而且发挥作用快，还能促进植 株生长，增加植株对线虫侵染的抗性，但其持效期较阿维菌素短，且没有内吸作用，而阿维 菌素对线虫的作用是使其麻痹，可进入到植株内发挥作用，二者混配使用可达到优势互补； (2)在移栽前适当加大SrlS的剂量，可充分发挥其对线虫速杀及对植株促生长和增强抗病 性的优势，从而有效降低土壤中的线虫数量及增强植株抵御线虫病害的能力。
[0009] 3、在施药方法上（1)改进了施药时间，提前3 - 5天处理土壤。其优点在于：室内 杀虫活性实验证实SrlS对松材线虫的最佳作用时间为5天，而根结线虫由于体壁构造不 同于松材线虫，对药剂更敏感，所以致死时间短于松材线虫。因此在移栽前3-5天施药，可 充分发挥其对土壤中线虫的致死作用，有效降低虫口密度，减少线虫对植株的侵染；（2)根 据线虫发病实际情况改进施药次数，对于长季节蔬菜，除移栽前进行土壤处理外，在种植中 期，增加1 - 2次用药，方法为随水浇灌，药剂量和比例不变，可有效控制根结病害，大大减 少阿维菌素的用药量及次数，且大大延长了黄瓜采摘期近3个月，番茄坐果率增加30%。
[0010] 本发明立足于生产实践的需要，针对目前国内外有关线虫生防存在的问题，利用 从土壤中筛选出的总状共头霉丝状真菌Srl8,对其杀线虫活性物质的发酵工艺条件以及 SrlS生物杀线剂与阿维菌素乳油混配用于植物根结线虫病害的生物防控技术，开发用于治 理设施蔬菜连作障碍中日趋严重的线虫病害的高效安全的生物杀线虫混剂，不仅可有效控 制虫口密度，同时还可促进植物生长、显著提高作物产量。
[0011] 本发明涉及生物农药的混配方法，尤其以SrlS生物杀线剂与阿维菌素乳油进行 混配，混剂中利用了SrlS制剂的促长、速杀以及阿维菌素持效期长的优点，通过二者间的 增效作用，弥补了单一制剂自身不足，克服了线虫的抗药性，提高了药剂的防控效果，延长 作物采摘期，增产增收明显，扩大了药剂的使用范围。
[0012] SrlS生物杀线剂具有耐热、水溶性、