培育苦瓜再生苗的方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及苦瓜再生苗培育领域，特别是涉及一种培育苦瓜再生苗的方法。
【背景技术】
[0002]苦瓜是一种保健蔬菜，主治中暑、暑热烦渴、暑疖、痱子过多、痢疾、疮肿、结膜炎、目赤肿痛、痈肿丹毒、烧烫伤、少尿等病症。另外，苦瓜的维生素C含量很高，具有预防坏血病、保护细胞膜、防止动脉粥样硬化、提高机体应激能力、保护心脏等作用苦瓜里面含有一种成分，可以有效抑制正常一包的癌变和促进特变细胞的复原，具有一定的抗癌作用。随着对品质要求的提高，引进了一些比较昂贵的苦瓜品种，但因价格较贵平常百姓消费不起。而如何保存种质资源前提下有效降低这类苦瓜品种的种子成本，达到工厂化生产，反季节栽培，可以满足大众的要求，是需要解决的问题。
[0003]通过组织培养技术，可以有效的降低种子成本，达到工厂化生产，反季节栽培，保存种质资源并且可以随着大众的要求改良品种成分。目前，组织培养技术发展迅速，也是应用最广泛的领域之一，在国内已经非常成熟。
【发明内容】
[0004]基于上述现有技术所存在的问题，本发明提供一种培育苦瓜再生苗的方法，能实现降低种子成本，工厂化栽培和反季节栽培，提高经济效益。
[0005]为解决上述技术问题，本发明提供一种培育苦瓜再生苗的方法，包括以下步骤:
[0006]对选择苦瓜品种的种子进行预处理，预处理后进行消毒处理，用消毒处理后的种子进行无菌苗培育，利用培育得到的无菌苗进行离体栽培，将苦瓜的细胞组织置于适合诱导愈伤和分化芽的培养基中培育，获得再生苗。
[0007]本发明的有益效果为:通过对选择苦瓜品种的种子进行预处理、消毒处理后进行无菌苗培育，再利用培育得到的无菌苗进行离体栽培，将苦瓜的细胞组织置于适合诱导愈伤和分化芽的培养基中培育得到再生苗，该方法可以降低种子成本，实现工厂化生产，进而降低高品质苦瓜的价格，满足市场需求。
【具体实施方式】
[0008]下面对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明的保护范围。
[0009]本发明实施例提供一种培育苦瓜再生苗的方法，可以培育出高品质苦瓜品种的再生苗，包括以下步骤:
[0010]对选择苦瓜品种的种子进行预处理，预处理后进行消毒处理，用消毒处理后的种子进行无菌苗培育，利用培育得到的无菌苗进行离体栽培，将苦瓜的细胞组织置于适合诱导愈伤和分化芽的培养基中培育，获得再生苗。
[0011]上述方法中，对选择苦瓜品种的种子预处理为:将种子皮用刀全部刻除，浸泡在无菌水中，放置温度40C的冰箱内暗处理24小时。
[0012]上述方法中，预处理后进行的消毒处理为:
[0013]用75%质量浓度的酒精，对预处理后的种子表面消毒30秒，用无菌水反复冲洗3次，再用0.2%质量浓度的次氯酸钠消毒15分钟，用无菌水反复冲洗5次。
[0014]上述方法中，用消毒处理后的种子进行无菌苗培育为:
[0015]将预处理并消毒后的种子接种到MS培养基上，在温度为25 °C，光照强度为20001x,日照长度为16小时的条件下培育无菌苗。
[0016]上述方法中，利用培育得到的无菌苗进行离体栽培，将苦瓜的细胞组织置于适合诱导愈伤和分化芽的培养基中培育，获得再生苗包括:
[0017]当培育的无菌苗长到8?12cm时，进行愈伤培养，将切好的苦瓜材料放置在培养基为MS培养基、浓度为1.5mg/L的6-BA和浓度为0.lmg/L的NAA激素组合中，诱导愈伤组织和分化芽，获得再生苗。
[0018]上述方法中，选择苦瓜品种为北京农学院的月华品种。
[0019]本发明实施例的适合苦瓜诱导分化苗的培养基配方，在确定配方前，首先要确定最适合分化的激素为6-BA和NAA。其次调配MS+6-BA+NAA的浓度，以满足苦瓜诱导愈伤组织和分化芽的条件。经反复调试确定最终培养基配方为MS+1.5mg/L 6-BA+0.lmg/L NAA。
[0020]下面将结合具体实施例对本发明的方法作进一步说明。
[0021]实施例:用苦瓜诱导分化再生苗的品种是“月华”品种；
[0022]操作流程为:培育无菌苗一诱导愈伤分化一分化芽；
[0023](I)种子的预处理:
[0024]于2014年6月，在北京农学院组织培养中心进行苦瓜“月华”无菌苗的培育，先对种子进行预处理，将种子皮用刀全部刻除，浸泡在无菌水中，放置4°C冰箱内暗处理24h，由于苦瓜种皮过硬，将会阻碍胚生长，并且将种皮完全去除放置培养基上有利于其充分吸收培养基中所需养分，所以对种子进行预处理是非常有必要的；
[0025](2)种子消毒方法:
[0026]用75%质量浓度的酒精，表面消毒30s，无菌水反复冲洗3次，再用0.2%质量浓度的次氯酸钠消毒15min，无菌水反复冲洗5次；
[0027](3)培育无菌苗:
[0028]将消毒后的去皮种子，在无菌条件下放置MS培养基中，最后放入温度为25°C，光照强度为20001x，日照强度为16h的培养室中培养成无菌苗；
[0029](4)诱导愈伤及分化芽:
[0030]当培养的无菌苗长到1cm左右，进行愈伤培养，将切好的苦瓜材料放置在培养基为MS+1.5mg/L的6-BA+0.lmg/L的NAA激素组合中，诱导愈伤组织和分化芽，得到再生苗。利用这种特定配方的培养基能有效的诱导出再生苗。该方法有效解决了高品质苦瓜品种的种子成本，有利于高品质苦瓜降低售卖价格，适合普通消费者购买。
[0031]本发明的方法通过组织培养技术，解决了种子成本过高的苦瓜品种，因种子成本高不利于推广的问题。该方法使苦瓜的细胞组织再分化出新的植株，可以有效的避免种子成本，并且达到人工无菌操作和适宜的环境条件下进行大规模的人工培养和工厂化生产，有利于对苦瓜品种的种质资源的保存和反季节生产栽培。
[0032]以上所述，仅为本发明较佳的【具体实施方式】，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明披露的技术范围内，可轻易想到的变化或替换，都应涵盖在本发明的保护范围之内。因此，本发明的保护范围应该以权利要求书的保护范围为准。
【主权项】
1.一种培育苦瓜再生苗的方法，其特征在于，包括以下步骤: 对选择苦瓜品种的种子进行预处理，预处理后进行消毒处理，用消毒处理后的种子进行无菌苗培育，利用培育得到的无菌苗进行离体栽培，将苦瓜的细胞组织置于适合诱导愈伤和分化芽的培养基中培育，获得再生苗。
2.根据权利要求1所述的培育苦瓜再生苗的方法，其特征在于，所述对选择苦瓜品种的种子预处理为:将种子皮用刀全部刻除，浸泡在无菌水中，放置温度4°C的冰箱内暗处理24小时。
3.根据权利要求1或2所述的培育苦瓜再生苗的方法，其特征在于，所述预处理后进行的消毒处理为: 用75 %质量浓度的酒精，对预处理后的种子表面消毒30秒，用无菌水反复冲洗3次，再用0.2%质量浓度的次氯酸钠消毒15分钟，用无菌水反复冲洗5次。
4.根据权利要求1至3任一项所述的培育苦瓜再生苗的方法，其特征在于，所述用消毒处理后的种子进行无菌苗培育为: 将预处理并消毒后的种子接种到MS培养基上，在温度为25°C，光照强度为20001x，日照长度为16小时的条件下培育无菌苗。
5.根据权利要求1至3任一项所述的培育苦瓜再生苗的方法，其特征在于，所述利用培育得到的无菌苗进行离体栽培，将苦瓜的细胞组织置于适合诱导愈伤和分化芽的培养基中培育，获得再生苗包括: 当培育的无菌苗长到8?12cm时，进行愈伤培养，将切好的苦瓜材料放置在培养基为MS培养基、浓度为1.5mg/L的6-BA和浓度为0.lmg/L的NAA激素组合中，诱导愈伤组织和分化芽，获得再生苗。
6.根据权利要求1至3任一项所述的培育苦瓜再生苗的方法，其特征在于，所述选择苦瓜品种为北京农学院的月华品种。
【专利摘要】本发明公开了一种培育苦瓜再生苗的方法，该方法通过组织培养技术，在无菌的条件下，将苦瓜材料放置适合诱导出愈伤组织的培养基下，进行无菌培养，之后在进行调配苦瓜分化芽的激素浓度，并能长出新的可用再生苗。该方法解决了种子成本过高的苦瓜品种不利于推广的问题。通过组织培养技术，使苦瓜的细胞组织再分化出新的植株，可以有效避免种子成本高的问题，并且达到人工无菌操作和近期温的环境条件下进行大规模的人工培养和工厂化生产，有利于苦瓜品种的种质资源的保存和反季节生产栽培。
【IPC分类】A01H4-00
【公开号】CN104620989
【申请号】CN201510080859
【发明人】韩莹琰, 黄冠华, 王绍辉, 杨瑞, 刘超杰, 王建立
【申请人】北京农学院
【公开日】2015年5月20日
【申请日】2015年2月13日