一种黑皮鸡枞菌菌丝体的培养方法
【技术领域】
[0001]本发明属于食用菌培养领域，具体涉及一种黑皮鸡枞菌菌丝体的培养方法。
【背景技术】
[0002]鸡枞菌具有很高的食用和药用价值，也是我国传统的药用真菌之一。因其鲜嫩醇香，肉质细嫩、洁白如玉、口感独特、生熟皆可食、食药两用、营养丰富而备受人们的青睐。鸡枞菌具有“益胃、清神、治痔及降血脂”等作用，有养血润燥、健脾胃等功效，可用于治疗食欲不振、久泻不止、痔疮下血诸症。现在医学研宄发现，鸡枞菌中含有麦角留醇类物质及治疗糖尿病的有效成份，对降低血糖有明显效果。并有抑制人体癌细胞生长的作用。鸡枞菌是菌类丰富资源宝库中的一枝奇葩。鸡枞菌因其口感独特，营养丰富，从古至今都是市场上的畅销品种。
[0003]黑皮鸡枞菌属担子亚门口蘑科目，其与白蚁有共生关系，是鸡枞菌的一种，由于鸡枞菌与白蚁共生，而愈显神奇名贵。其子实体仅能在白蚁巢上生长，是由于鸡枞菌与白蚁二者之间有着复杂的营养关系和生态背景。其人工培养及难以攻克，至今还没有人工批量栽培成功的先例。
【发明内容】
[0004]本发明的目的在于提供一种黑皮鸡枞菌菌丝体的培养方法，提供了一种简单、培养周期短，菌丝体产率高，可以进行产业化生产的培养方法。
[0005]为实现上述目的，本发明采用如下技术方案:
一种黑皮鸡枞菌菌丝体的培养方法，所述方法包括如下:
(1)选择黑皮鸡枞菌母种活化后接种到斜面培养基上，扩大培养至菌丝体长满斜面2/3以上；
(2)选择菌丝体生长良好的菌种接种到液体培养基中，置于23-24°C摇床中恒温培养
3-5 天；
(3)将步骤(2)中培养好的菌种，投入发酵罐中培养，发酵温度为22-25°C，转速为120-125rpm/min，培养时间为72_96h，过滤获得菌丝体，将菌丝体于65 °C烘箱中烘干至恒重。
[0006]所述的斜面培养基成分为:马铃薯200g，葡萄糖25_30g，酵母浸膏2.5-3.5g/L，VBl 3.5-4mg/L，蛋白胨为 1.5_2g/L，水 1L，pH 为 6.5-7.5。
[0007]所述的液体培养基成分为:玉米粉25-30g/L，麸皮15_20g，Vc 2-3.5mg/L，VBl3.5-4mg/L，山药提取物4-6g/L，水1L，pH为6.5-7.5，将配置好的液体培养基高温灭菌后，冷却后，无菌条件下接入菌种，接种量为7-10%。
[0008]所述步骤(3)发酵培养基成分为:麸皮13.7~14.5g/L、玉米精粉10.8~ll.2g/L、大豆粉 1.9~2.lg/L、磷酸二氢钾 1.18~1.21g/L、硫酸镁 0.89~0.92g/L、有机锗Ge-132 900~2800ppm,山药提取物2_4g/L，枸杞粉2_3g/L，PH值6.0，将配置好的发酵培养基高温灭菌后，冷却后，无菌条件下接入菌种，接种量为12-15%。
[0009]山药提取物为薯蓣科多年蔓生草本植物薯蓣的干燥块茎，具有健脾、补肺、固肾、益精等功效。
[0010]天然有机锗是许多药用植物的成分之一，人参等药用植物富含有机锗，具有独特的保健功能。自从1971年日本学者浅井一彦合成了羟乙基锗倍半氧化物(GeCH2C00H)203，简称Ge-132，并证实了其具有抗癌活性。
[0011]本发明的优点在于:本发明发酵周期短，菌丝体得率高，生产过程中无污染、无废弃物等，获得的菌丝体有机锗含量高，具有补锗功效。另外本发明采用特点的培养基以及培养方法发酵的富锗黑皮鸡枞菌菌丝体，可以增加产品的功效，在黑皮鸡枞菌在发酵过程中在培养基中添加了有机锗Ge-132、山药提取物、枸杞粉，通过黑皮鸡枞菌在生长过程中对锗元素的吸收和转化，使锗能安全、高效的发挥对人体的医疗保健功效，同时有机锗Ge-132在以上发酵条件下，能促进黑皮鸡枞菌菌丝对还原糖和多肽的利用；Ge-132大大提高深层发酵产物菌丝体的得率。另外本发明在培养基中加入山药提取物、枸杞粉，鸡枞菌可以有效的吸收这2者的有效成分，促进菌丝体的生长。对发酵培养获得菌丝体的营养源进行抽样检测:以GB5009.5-2010第一法检测蛋白蛋，结果为2.85g/100g ；以GB/T5009.84-2003 检测硫胺素(VBl )，结果为 0.13mg/100g ;以 GB/T5009.85-2003 第一法检测核黄素(VB2)，结果为 0.20mg/100g ；以 GB/T5009.89-2003 检测烟酸，结果 3.47mg/100g ；以GB/T5009.124-2003方法检测多种氨基酸，发现谷氨酸GLU指标突出其检测数据为
0.395g/100g?黑皮鸡枞菌富锗液体深层培养获得菌丝体的营养物质和药用成份与其子实体所含的，十分相似；其菌丝体所含的多糖、皂苷、纤维素酶、多酚、麦角留醇类化合物等多种活性成分，有增强人体免疫力和抑制人体癌细胞生长的作用。
【具体实施方式】
[0012]实施例1
所述方法包括如下:
1、选择黑皮鸡枞菌母种活化后接种到斜面培养基上，扩大培养至菌丝体长满斜面2/3以上；
2、选择菌丝体生长良好的菌种接种到液体培养基中，置于24°C摇床中恒温培养4天；
3、将步骤(2)中培养好的菌种，投入发酵罐中培养，发酵温度为24°C，转速为125rpm/min，培养时间为96h，过滤获得菌丝体，将菌丝体于65°C烘箱中烘干至恒重。
[0013]所述的斜面培养基成分为:马铃薯200g，葡萄糖25g，酵母浸膏2.5g/L，VBl3.5mg/L，蛋白胨为 1.5g/L，水 lL，pHS6.5。
[0014]所述的液体培养基成分为:玉米粉25g/L，麸皮15g，Vc 2mg/L，VBl 3.5mg/L，山药提取物4g/L，水1L，pH为6.5，将配置好的液体培养基高温灭菌后，冷却后，无菌条件下接入菌种，接种量为7%。
[0015]所述步骤(3)发酵培养基成分为:麸皮13.7g/L、玉米精粉10.8g/L、大豆粉
1.9g/L、磷酸二氢钾1.18g/L、硫酸镁0.89g/L、有机锗Ge-132 900ppm，山药提取物2g/L，枸杞粉2g/L，PH值6.0，将配置好的发酵培养基高温灭菌后，冷却后，无菌条件下接入菌种，接种量为12%。
[0016]实施例2
所述方法包括如下:
1、选择黑皮鸡枞菌母种活化后接种到斜面培养基上，扩大培养至菌丝体长满斜面2/3以上；
2、选择菌丝体生长良好的菌种接种到液体培养基中，置于24°C摇床中恒温培养3天；
3、将步骤(2)中培养好的菌种，投入发酵罐中培养，发酵温度为24°C，转速为120rpm/min，培养时间为72h，过滤获得菌丝体，将菌丝体于65°C烘箱中烘干至恒重。
[0017]所述的斜面培养基成分为:马铃薯200g，葡萄糖30g，酵母浸膏3.5g/L，VB14mg/L，蛋白胨为2g/L，水lL，pHS7.0。
[0018]所述的液体培养基成分为:玉米粉30g/L，麸皮20g，Vc 3.5mg/L，VBl 4mg/L，山药提取物6g/L，水1L，pH为7.0，将配置好的液体培养基高温灭菌后，冷却后，无菌条件下接入菌种，接种量为10%。
[0019]所述步骤(3)发酵培养基成分为:麸皮14.5g/L、玉米精粉11.2g/L、大豆粉
2.lg/L、磷酸二氢钾1.21g/L、硫酸镁0.92g/L、有机锗Ge-132 2800ppm，山药提取物4g/L，枸杞粉3g/L，PH值6.0，将配置好的发酵培养基高温灭菌后，冷却后，无菌条件下接入菌种，接种量为15%。
[0020]实施例3
1、选择黑皮鸡枞菌母种活化后接种到斜面培养基上，扩大培养至菌丝体长满斜面2/3以上；
2、选择菌丝体生长良好的菌种接种到液体培养基中，置于23°C摇床中恒温培养5天；
3、将步骤(2)中培养好的菌种，投入发酵罐中培养，发酵温度为25°C，转速为125rpm/min，培养时间为96h，过滤获得菌丝体，将菌丝体于65°C烘箱中烘干至恒重。
[0021]所述的斜面培养基成分为:马铃薯200g，葡萄糖27g，酵母浸膏3g/L，VBl 4mg/L，蛋白胨为1.7g/L，水lL，pH为7.5。
[0022]所述的液体培养基成分为:玉米粉27g/L，麸皮18g，Vc 3mg/L，VBl 3.7mg/L，山药提取物6g/L，水1L，pH为7.5，将配置好的液体培养基高温灭菌后，冷却后，无菌条件下接入菌种，接种量为8%。
[0023]所述步骤(3)发酵培养基成分为:麸皮14.0g/L、玉米精粉11.lg/L、大豆粉2g/L、磷酸二氢钾1.2g/L、硫酸镁0.9g/L、有机锗Ge-132 2000ppm，山药提取物3g/L，枸杞粉2.41g/L，PH值6.0，将配置好的发酵培养基高温灭菌后，冷却后，无菌条件下接入菌种，接种量为14%。
[0024]以上所述仅为本发明的较佳实施例，凡依本发明申请专利范围所做的均等变化与修饰，皆应属本发明的涵盖范围。
【主权项】
1.一种黑皮鸡枞菌菌丝体的培养方法，其特征在于:所述方法包括如下: (1)选择黑皮鸡枞菌母种活化后接种到斜面培养基上，扩大培养至菌丝体长满斜面2/3以上； (2)选择菌丝体生长良好的菌种接种到液体培养基中，置于23-24°C摇床中恒温培养3-5 天； (3)将步骤(2)中培养好的菌种，投入发酵罐中培养，发酵温度为22-25°C，转速为120-125rpm/min，培养时间为72_96h，过滤获得菌丝体，将菌丝体于65 °C烘箱中烘干至恒重。2.根据权利要求1所述的一种黑皮鸡枞菌菌丝体的培养方法，其特征在于:所述的斜面培养基成分为:马铃薯200g，葡萄糖25-30g，酵母浸膏2.5-3.5g/L，VBl 3.5_4mg/L，蛋白胨为 1.5-2g/L，水 1L，pH 为 6.5-7.5。3.根据权利要求1所述的一种黑皮鸡枞菌菌丝体的培养方法，其特征在于:所述的液体培养基成分为:玉米粉25-30g/L，麸皮15-20g，Vc 2-3.5mg/L，VBl 3.5_4mg/L，山药提取物4-6g/L，水1L，pH为6.5-7.5，将配置好的液体培养基高温灭菌后，冷却后，无菌条件下接入菌种，接种量为7-10%。4.根据权利要求1所述的一种黑皮鸡枞菌菌丝体的培养方法，其特征在于:所述步骤(3)发酵培养基成分为:麸皮13.7~14.5g/L、玉米精粉10.8~11.2g/L、大豆粉 1.9~2.lg/L、磷酸二氢钾 1.18-1.21g/L、硫酸镁 0.89~0.92g/L、有机锗 Ge-132900~2800ppm,山药提取物2_4g/L，枸杞粉2_3g/L，PH值6.0，将配置好的发酵培养基高温灭菌后，冷却后，无菌条件下接入菌种，接种量为12-15%。
【专利摘要】本发明提供一种黑皮鸡枞菌菌丝体的培养方法，选择黑皮鸡枞菌母种活化后接种到斜面培养基上，扩大培养至菌丝体长满斜面2/3以上；选择菌丝体生长良好的菌种接种到液体培养基中，置于23-24℃摇床中恒温培养3-5天；将步骤（2）中培养好的菌种，投入发酵罐中培养，发酵温度为22-25℃，转速为120-125rpm/min，培养时间为72-96h，过滤获得菌丝体，将菌丝体于65℃烘箱中烘干至恒重。本发明发酵周期短，菌丝体得率高，生产过程中无污染物、废弃物等，含有的有机锗含量高，具有补锗的功效。
【IPC分类】A01G1/04, C05G3/00
【公开号】CN104885788
【申请号】CN201510343009
【发明人】张可池
【申请人】福建万亿店中店电子商务有限责任公司
【公开日】2015年9月9日
【申请日】2015年6月19日