一种鸡胚蛋性别鉴定方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及生物技术领域，具体说是一种鸡胚蛋性别鉴定方法。尤指基于尿囊液中雌激素含量的鸡胚蛋性别鉴定的方法，所述雌激素为雌二醇E2或雌激素硫酸盐El。
【背景技术】
[0002]鸡的性别与其生产力息息相关。在商品鸡蛋生产中，母鸡作为唯一的生产工具，而公鸡不具备生产能力要被淘汰。在受精蛋的生产中，而公鸡只作为受精蛋的生产工具之一，数量极少，只有鸡总数量的3%，其余公鸡也要被淘汰。在商品肉鸡生产中，由于公鸡比母鸡需要的饲料少，生产母鸡肉鸡的成本要比公鸡高5%以上，大型的肉鸡厂会将小母鸡淘汰。据统计，仅在2001年，德国有9200万只雏鸡被杀，在美国和欧盟则更达到了惊人的2.82亿和2.26亿只。在中国，对北京周边蛋鸡场的调查发现，很多具有孵化能力的蛋鸡场在小公鸡出雏后即出售，大部分作为生产原料被宰杀。受精的发生先于蛋壳的形成，且在鸡育种上并不能控制性别的偏向。因此，如何在鸡胚发育阶段对其进行性别鉴定，并根据生产需要对不同性别雏鸡进行重新配置和合理处理，不仅可以极大的提高养鸡业的生产效益，同时还可以有效避免伦理问题。
【发明内容】
[0003]针对现有技术中存在的缺陷，本发明的目的在于提供一种鸡胚蛋性别鉴定方法，在鸡胚发育阶段对其进行性别鉴定，以达到提高生产效益。
[0004]为达到以上目的，本发明采取的技术方案是:
[0005]—种鸡胚蛋性别鉴定方法，其特征在于:基于尿囊液中雌激素含量对鸡胚蛋性别进行鉴定，包括如下步骤:
[0006]步骤I，鸡胚蛋尿囊液采集；
[0007]步骤2，尿囊液的预处理；
[0008]步骤3，尿囊液中雌激素浓度检测；
[0009]步骤4，根据尿囊液中雌激素浓度判断鸡胚蛋性别；
[0010]所述雌激素为雌二醇E2或雌激素硫酸盐El。
[0011]在上述技术方案的基础上，步骤I的具体步骤为:
[0012]步骤1.1，在种鸡蛋进行孵化8到17天后，在室温条件下选取鸡胚蛋进行表面消毒，
[0013]步骤1.2，将鸡胚蛋长轴固定在水平方向并静置10到20分钟，
[0014]步骤1.3，对鸡胚蛋表面进行钻孔，
[0015]步骤1.4，负压抽取尿囊液:使用靠负压的抽取装置从孔中扎入蛋壳，扎入深度保持在5毫米以内，抽取液体的量不超过5毫升，抽取到的液体即为鸡胚蛋尿囊液，
[0016]步骤1.5，抽取完成后再次对蛋孔处消毒，用滴管抽取融化为液体的石蜡滴涂在蛋孔处，待石錯冷却后将蛋孔完全堵住。
[0017]在上述技术方案的基础上，步骤1.1中，所述室温指温度大于15°C，小于40°C。
[0018]在上述技术方案的基础上，步骤1.1中，孵化8到17天的鸡胚蛋用75%医用酒精或1:2500的高锰酸钾溶液进行表面消毒。
[0019]在上述技术方案的基础上，步骤1.3中，对鸡胚蛋表面进行钻孔时，对于鸡胚蛋长轴竖直与短轴竖直孵化两种孵化方式，钻孔位置不同:
[0020]对于鸡胚蛋长轴竖直孵化，步骤1.2后，选择距离最高点15到25mm的长轴上小头位置的点，将鸡胚蛋位置保持不动，用光源从蛋底部向上照射，用微型钻避开血管进行竖直钻孔，钻孔完成后进行消毒并将蛋沿长轴顺时针旋转45度，再次消毒同样采用75%医用酒精或1:2500的高锰酸钾溶液；
[0021]对于鸡胚蛋短轴竖直孵化，步骤1.2后，选择距离最高点8到15mm的长轴上大头位置的点，将鸡胚蛋位置保持不动，用光源从蛋底部向上照射，用微型钻避开血管与气室进行竖直钻孔，钻孔完成后进行消毒并将蛋沿长轴顺时针旋转45度，再次消毒同样采用75%医用酒精或1:2500的高锰酸钾溶液。
[0022]在上述技术方案的基础上，步骤1.3中，所述微型钻钻头直径为0.5毫米的钻头。
[0023]在上述技术方案的基础上，步骤1.4中，所述靠负压的抽取装置为注射器，且所用针头直径为0.45毫米或0.5毫米。
[0024]在上述技术方案的基础上，步骤2的具体步骤为:
[0025]步骤2.1，将采集到的尿囊液注入无菌离心管中，使用每分钟2000到3000转转速的离心机离心20分钟，
[0026]步骤2.2，仔细收集离心处理后的上清液，收集过程中如有沉淀形成，应该再次按步骤2.1进行离心处理；
[0027]采用光源照射避开血管钻孔的方法能省略步骤2，对不采取避开血管钻孔的方法必须进行步骤2。
[0028]在上述技术方案的基础上，步骤2.1中所述无菌离心管为1.5毫升或2毫升的无菌离心管。
[0029]在上述技术方案的基础上，步骤3所述尿囊液中雌激素浓度检测采用酶联免疫分析法、放射免疫分析法、时间分辨焚光免疫分析法、拉曼光谱分析法、液相色谱分析法中的任意一种。
[0030]在上述技术方案的基础上，判别鸡胚蛋性别的依据是尿囊液中雌激素的浓度，将尿囊液中雌激素浓度在阈值以上的鸡胚蛋判断为雌胚，浓度在阈值以下的鸡胚蛋判断为雄胚。
[0031]在上述技术方案的基础上，判断鸡胚蛋性别的尿囊液中的雌二醇E2浓度的阈值为 109.9pg/ml，
[0032]判断鸡胚蛋性别的尿囊液中的雌激素硫酸盐El浓度的阈值为380.6pg/ml。
[0033]本发明所述的鸡胚蛋性别鉴定方法，在鸡胚发育阶段对其进行性别鉴定，以达到提高生产效益。本发明使得在鸡胚发育阶段进行性别鉴定得以实现。
[0034]11.如权利要求1所述的鸡胚蛋性别鉴定方法，其特征在于步骤4的具体步骤为:判别鸡胚蛋性别的依据是尿囊液中雌激素的浓度，将尿囊液中雌激素浓度在阈值以上的鸡胚蛋判断为雌胚，浓度在阈值以下的鸡胚蛋判断为雄胚。
[0035]12.如权利要求11所述的鸡胚蛋性别鉴定方法，其特征在于:
[0036]判断鸡胚蛋性别的尿囊液中的雌二醇E2浓度的阈值为109.9pg/ml，
[0037]判断鸡胚蛋性别的尿囊液中的雌激素硫酸盐El浓度的阈值为380.6pg/ml。
【附图说明】
[0038]本发明有如下附图:
[0039]图1本发明的流程图。
【具体实施方式】
[0040]以下结合附图对本发明作进一步详细说明。
[0041]如图1所示，本发明所述的鸡胚蛋性别鉴定方法，具体说是基于尿囊液中雌激素含量对鸡胚蛋性别进行鉴定，包括如下步骤:
[0042]步骤I，鸡胚蛋尿囊液采集；
[0043]步骤2，尿囊液的预处理；
[0044]步骤3，尿囊液中雌激素浓度检测；
[0045]步骤4，根据尿囊液中雌激素浓度判断鸡胚蛋性别；
[0046]所述雌激素为雌二醇E2或雌激素硫酸盐El。
[0047]本发明所述的鸡胚蛋性别鉴定方法，将鸡胚蛋尿囊液中雌激素浓度在阈值以上的鸡胚蛋判断为雌胚，浓度在阈值以下的鸡胚蛋判断为雄胚。
[0048]在上述技术方案的基础上，步骤I的具体步骤为:
[0049]步骤1.1，选取孵化8到17天的鸡胚蛋:在种鸡蛋进行孵化8到17天后，在室温条件下选取鸡胚蛋进行表面消毒，
[0050]步骤1.2，将鸡胚蛋长轴固定在水平方向并静置10到20分钟，
[0051]步骤1.3，对鸡胚蛋表面进行钻孔，
[0052]步骤1.4，负压抽取尿囊液:使用靠负压的抽取装置(例如消毒注射器)从孔中扎入蛋壳，扎入深度保持在5毫米以内，抽取液体的量不超过5毫升，优选缓慢抽取I到1.5毫升液体，抽取到的液体即为鸡胚蛋尿囊液，
[0053]步骤1.5，抽取完成后再次对蛋孔处消毒，用滴管抽取融化为液体的石蜡滴涂在蛋孔处，待石錯冷却后将蛋孔完全堵住。
[0054]更进一步，对【步骤1.1】、【步骤1.3】、【步骤1.5】中打孔前、打孔后、封口前都进行消毒，与不消毒进行对比试验:
[0055]1、对100个受精打孔样本