专利名称：香料植物互叶白千层的组织培养方法
技术领域：
本发明属于生物技术领域，具体指香料植物互叶白千层的组织培养方法。
背景技术：
互叶白千层(Melaleuca altennifolia)是桃金娘科白千层属植物，原产于澳大利亚，是一种常绿小乔木，适于在我国华南地区推广种植。其新鲜枝叶提取的茶树油，具有消毒剂性质，能有效地抑制许多普遍存在的致病细胞和霉菌，广泛应用于医药、食品、防腐、化妆、护眼及保健品等行业。但是由于种源缺乏、扦插难生根、繁育周期长以及遗传变异等诸多因素，用常规繁殖方法难以在短期内满足日益增长的市场需求。
植物组织培养(Tissue culture)是指利用植物细胞的全能性，从植物体内取出器官(部分)、组织和细胞，模拟体内生理环境，在无菌、适当温度和一定培养条件下，使之生存、生长，维持其正常结构和功能的方法。
本发明人经研究发现，若采用组织培养方法，既可以保持母体的优良性状，有效节约生产成本，又可以缓解目前互叶白千层苗木的供需矛盾。本案油然而生。
发明内容
本发明旨在提供一种香料植物互叶白千层的组织培养方法，从而实现商业化快速繁育。
为了实现上述发明目的，本发明的技术方案是香料植物互叶白千层的组织培养方法，从具有优良性状的互叶白千层母体上剪取腋芽作为外植体，先对外植体进行清洗、消毒，然后接入诱导培养基进行诱导培养，诱导培养基配比为7/10MS-MS(Marashige & Sroog)常规基本培养基、6-BA(6-卞基嘌呤)0.1-0.3mg/L、NAA(萘乙酸)0.1-0.3mg/L；再接入继代培养基进行继代培养，继代培养基配比为7/10MS-MS、6-BA0.4-0.6mg/L、NAA0.05-0.15mg/L；最后，进入生根培养阶段，生根培养基配比为2/5MS-3/5MS、IBA(吲哚丁酸)0.5-0.7mg/L；以上诱导培养、继代培养、生根培养的条件均为光照强度为2500-3000Lux，温度为26±1℃。
上述外植体进行清洗、消毒的具体步骤是先用洗衣粉浸泡10分钟，置于清水下冲洗30分钟；用75％的酒精浸泡20秒，无菌水冲洗2次，再用0.1％HgCl2消毒7分钟，无菌水冲洗5次。
上述外植体进行清洗、消毒后，吸干水分切为1±0.1cm的茎段，然后接入诱导培养基进行诱导培养。
采用上述方法后，本发明的组织培养方法解决了互叶白千层种子繁殖出圃周期长、成活率低、生产成本高等问题，实现商业化规模化快速繁育，30天增殖倍率达4.6倍，生根率接近100％，移栽成活率在96％以上，为大面积推广种植互叶白千层解决了苗木需求的根本问题。
具体实施例方式
运用本发明进行香料植物互叶白千层的组织培养的具体实施例。
A、外植体处理及诱导培养从具有优良性状的互叶白千层母体上剪取腋芽作为外植体，先对外植体进行清洗、消毒，具体步骤是用洗衣粉浸泡10分钟，置于清水下冲洗30分钟；用75％的酒精浸泡20秒，无菌水冲洗2次，再用0.1％HgCl2消毒7分钟，无菌水冲洗5次，吸干水分切为1cm左右的茎段，然后在超净工作台上接种到诱导培养基上进行诱导分化培养，培养条件光照强度为2500-3000Lux，温度为26±1℃。诱导培养基配比是7/10MS-MS、6-BA0.1-0.3mg/L、NAA0.1-0.3mg/L。
B、继代培养在诱导培养大约30天左右，待腋芽高3-4cm时，即可进入继代培养，培养条件与诱导培养相同，增殖培养基配比是7/10MS-MS、6-BA0.4-0.6mg/L、NAA0.05-0.15mg/L，增殖倍率达4.6倍。
C、生根培养在继代培养25天左右，苗高在1.0CM以上时，就可以进行生根培养，培养条件与以上培养相同，生根培养基配比是2/5MS-3/5MS、IBA(吲哚丁酸)0.5-0.7mg/L，生根培养大约20天左右，生根率接近100％，根长约1.5CM，苗高3-4CM，就可以出瓶移栽，移栽成活率在96％以上，完全适合于工业化生产的要求。
权利要求
1.香料植物互叶白千层的组织培养方法，其特征在于从互叶白千层母体上剪取腋芽作为外植体，先对外植体进行清洗、消毒；然后接入诱导培养基进行诱导培养，诱导培养基配比为7/10MS-MS、6-BA0.1-0.3mg/L、NAA0.1-0.3mg/L；再接入继代培养基进行继代培养，继代培养基配比为7/10 MS-MS、6-BA0.4-0.6mg/L、NAA0.05-0.15mg/L；最后，进入生根培养阶段，生根培养基配比为2/5 MS-3/5MS、IBA0.5-0.7mg/L；以上诱导培养、继代培养、生根培养的条件均为光照强度为2500-3000Lux，温度为26±1℃。
2.如权利要求1所述香料植物互叶白千层的组织培养方法，其特征在于外植体进行清洗、消毒的具体步骤是先用洗衣粉浸泡10分钟，置于清水下冲洗30分钟；用75％的酒精浸泡20秒，无菌水冲洗2次，再用0.1％HgCl2消毒7分钟，无菌水冲洗5次。
3.如权利要求1所述香料植物互叶白千层的组织培养方法，其特征在于外植体进行清洗、消毒后，吸干水分切为1±0.1cm的茎段，然后接入诱导培养基进行诱导培养。
全文摘要
本发明公开一种香料植物互叶白千层的组织培养方法，从母体上剪取腋芽作为外植体，先进行清洗、消毒；然后进行诱导培养，诱导培养基7/10MS－MS、6－BA0.1－0.3mg/L、NAA0.1－0.3mg/L；再进行继代培养，继代培养基为7/10 MS－MS、6－BA0.4－0.6mg/L、NAA0.05－0.15mg/L；最后进入生根培养阶段，生根培养基为2/5MS－3/5MS、IBA0.5－0.7mg/L；以上诱导培养、继代培养、生根培养的条件均为光照强度为2500－3000Lux，温度为26±1℃。此方法能实现工业化规模化快速繁育，30天增殖倍率达4.6倍，生根率接近100％，移栽成活率96％以上，为大面积推广种植互叶白千层解决了苗木需求问题。
文档编号C12N5/04GK101032223SQ200610037340
公开日2007年9月12日 申请日期2006年8月24日 优先权日2006年8月24日
发明者赖桂星, 林良科, 石斗开, 朱文辉, 陈文炳, 王建红, 郭逸成 申请人:厦门涌泉科技有限公司