一种复合发酵剂及其应用的制作方法

本发明涉及微生物发酵工程，具体涉及一种复合发酵剂及其应用。

背景技术：

1、n-乙酰氨基葡萄糖（glcnac）是一种被广泛应用的重要多功能单糖，n-乙酰氨基葡萄糖作为自然界第二大天然多糖几丁质的基本组成单位，具有较强的还原性，其不仅是合成双歧因子的重要前提，还在生物体内作为多糖透明质酸、肝素和硫酸角质素的重要组成部分之一，维持着生物体正常的生理功能，在生物体正常生长代谢中起着重要作用。现有技术中，n-乙酰氨基葡萄糖在医药保健、饲料、食品和化妆品领域中都具有广阔的前景。

2、植物提取物，主要为单萜、倍单萜类化合物和多种含生物活性的苯丙类化合物组成，通常由植物的根、皮、枝、叶、种子或果实提炼而得，具有可挥发性和抗水解性的特点。植物提取物的种类和成分含量较为复杂，具有多样性，这是因为，自然界中不同植物的不同部位所含有的植物精油成分，在种类、数量或提取方法上均有差异。目前已知的植物提取物已超三千多种，且数量还在增加。现有技术中，植物提取物已经广泛运用于食用香料、日用化工、化医药产品和饲料添加剂等领域。在饲料添加剂方面，植物提取物与其他饲料添加剂相比，具有以下优点：第一，植物提取物不仅能够调节机体的生理机能，促进新陈代谢，而且具有清热解毒、抗菌、消炎、驱虫等作用，从而达到促进生长，防病治病的目的；第二，能够改善动物机体的免疫体状态，憎强免疫力；第三，天然草本植物还具有低毒性。无抗药性。无残留等特点，能够改善禽畜肉、蛋、奶的质量，且禽畜长期食用也不会致癌、畸变或性早熟；最后，草本植物资源丰富，取材方便，易于推广。

3、青贮饲料由含水分多的植物性饲料经过密封、发酵后而成，主要用于喂养反刍动物。青贮饲料比新鲜饲料耐储存，营养成分强于干饲料。此外，青贮饲料储存占地少，节省空间。因此，青贮饲料已得到广泛运用。

4、青贮饲料的原理，即是在密封状态下，利用乳酸菌的发酵作用，产生大量乳酸，使饲料呈酸性，从而抑制有害菌生长，达到长期保存青贮饲料营养特性。因此，拥有较高乳酸含量，且ph相对较低的青贮饲料具有较高的发酵品质。此外，乙酸、丙酸、丁酸和氨态氮的含量也是评价青贮饲料发酵品质的重要标准。乙酸与丙酸能够抑制青贮饲料中好氧菌、酵母菌以及其它致病微生物的增殖，因此，适量的乙酸和丙酸能够保饲料的品质；品质良好的青贮饲料中不应检测出丁酸，因为丁酸的出现意味着梭菌的代谢，会导致严重的干物质和能量损失；氨态氮是蛋白质降解的副产物，氨态氮的含量越高，说明较多的蛋白质和氨基酸被分解，引起梭菌发酵，意味着青贮饲料品质不佳。现有技术中，青贮饲料在制作、储存和使用过程中容易受到霉菌毒素的污染，对动物和人类健康带来危害，因此，为避免霉菌污染，人们会向饲料中添加防霉剂，但是防霉剂需大量使用，增加了成本，且防霉剂对禽畜肠胃的刺激性也较大，适口性差。因此，如何避免青贮饲料的污染，提高其发酵品质已经成为行业研究的一个热点。发明专利cn111903844b公开了一种提高青贮饲料发酵品质的方法及其制得的饲料，该发明提高青贮饲料发酵品质的方法为：在青贮原料中添加褪黑素进行发酵，可以显著降低青贮饲料ph值、丙酸和丁酸含量，显著提高乳酸、总酸含量。目前，尚未有使用n-乙酰氨基葡萄糖、迷迭香提取物和紫苏籽提取物复配制得发酵剂，从而提高青贮饲料发酵品质的相关报道。

技术实现思路

1、针对上述现有技术的不足，本发明的目的是提供一种复合发酵剂及其应用。

2、为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

3、本发明的第一方面，提供一种复合发酵剂，所述复合发酵剂由n-乙酰氨基葡萄糖、植物提取物、蛋白酶和复合菌液按照重量比（0.5-2）：（18-22）：（2-5）：（9-15）的比例组成；

4、所述植物提取物由迷迭香提取物和紫苏籽提取物按照重量比为（1-2）：（1.5-3）的比例复配而成，复合菌液由地衣芽孢杆菌和乳酸片球菌按照重量比为1:（1-1.2）的比例复配而成。

5、优选的，所述蛋白酶包括木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶和胰蛋白酶中的一种或多种。

6、优选的，所述地衣芽孢杆菌的保藏编号为cctcc ab 2010437，所述乳酸片球菌的保藏编号为cctcc ab 204055。

7、优选的，所述迷迭香提取物由如下方法制备：

8、取新鲜的迷迭香叶于-10℃冷冻6h，冷冻结束后粉碎过筛，得到迷迭香叶粉末，向迷迭香叶粉末中加入10重量倍的超纯水，在110℃条件下煎煮1h，冷却后过滤、收集滤液，即得到迷迭香提取物。

9、优选的，所述紫苏籽提取物由如下方法制备：

10、向紫苏籽中加入10-12重量倍、体积分数60%的乙醇，加热至80-100℃回流提取40-60min，冷却后过滤，收集滤液，即得紫苏籽提取物。

11、优选的，所述复合发酵剂中，地衣芽孢杆菌的活菌数为（1-1.5）×109cfu/g，乳酸片球菌的活菌数为（0.5-2）×109cfu/g。

12、本发明的第二方面，提供上述复合发酵剂在提高饲料发酵品质中的应用。

13、优选的，所述饲料为青贮饲料。

14、本发明的有益效果：

15、（1）本发明选用n-乙酰氨基葡萄糖、植物提取物、蛋白酶和复合菌液复配得到复合发酵剂，其中n-乙酰氨基葡萄和植物提取物能够为复合菌液提供充足的营养物质，提高发酵剂的生物活性，同时，植物提取物所选用的紫苏籽提取物和迷迭香提取物均具有较高的抗氧化性，能够减少饲料有氧暴露后的腐烂、发霉程度，抑制霉菌的增殖；复合菌液中的地衣芽孢杆菌具有较高的酶活性，能够与蛋白酶相配合，充分分解饲料中的营养物质，减少有害菌种对蛋白质、氨基酸的利用，从而降低青贮饲料中氨态氮的含量，同时，地衣芽孢杆菌自身也具有抑制微生物腐败和霉菌毒素产生的功能，进一步减少了青贮饲料中霉菌污染的程度。

16、（2）使用本发明所提供的复合发酵剂发酵制备青贮饲料，各组分之间相互配合，协同作用，可以减少青贮饲料受到霉菌的污染程度，提高其发酵品质。

技术特征：

1.一种复合发酵剂，其特征在于，所述复合发酵剂由n-乙酰氨基葡萄糖、植物提取物、蛋白酶和复合菌液按照重量比（0.5-2）：（18-22）：（2-5）：（9-15）的比例组成；

2.根据权利要求1所述的复合发酵剂，其特征在于，所述蛋白酶包括木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶和胰蛋白酶中的一种或多种。

3.根据权利要求1所述的复合发酵剂，其特征在于，所述地衣芽孢杆菌的保藏编号为cctcc ab 2010437，所述乳酸片球菌的保藏编号为cctcc ab 204055。

4.根据权利要求1所述的复合发酵剂，其特征在于，所述迷迭香提取物由如下方法制备：

5.根据权利要求1所述的复合发酵剂，其特征在于，所述紫苏籽提取物由如下方法制备：

6.根据权利要求1所述的复合发酵剂，其特征在于，所述复合发酵剂中，地衣芽孢杆菌的活菌数为（1-1.5）×109cfu/g，乳酸片球菌的活菌数为（0.5-2）×109cfu/g。

7.权利要求1所述的复合发酵剂在提高饲料发酵品质中的应用。

8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述饲料为青贮饲料。

技术总结
本发明公开了一种复合发酵剂及其应用，涉及微生物发酵工程技术领域。复合发酵剂由N‑乙酰氨基葡萄糖、植物提取物、蛋白酶和复合菌液组成；所述植物提取物由迷迭香提取物和紫苏籽提取物复配而成，复合菌液由地衣芽孢杆菌和乳酸片球菌复配而成。使用本发明的复合发酵剂发酵制备青贮饲料，可以减少青贮饲料受到霉菌的污染程度，提高其发酵品质。

技术研发人员：卢健行,张敏,赵鹏,张永华,李贵伶,袁涛,徐艳
受保护的技术使用者：山东润德生物科技有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/4/24