专利名称：海洋全珍珠贝粉及其制备方法
技术领域：
本发明涉及一种天然保健食品，具体来说是一种以无污染的全天然海洋珍珠贝类为原料制备的海洋全珍珠贝粉。
目前，珍珠类保健品多以淡水珍珠或珍珠层为原料，如CN1035467的水溶性全成份珍珠粉，CN1046283的水溶性珍珠层粉，却忽略了珍珠贝类中贝肉所含的高牛磺酸营养成份，并且大多以淡水养殖的珍珠或珍珠层来满足工业化大生产，却忽略了海洋珍珠或珍珠层粉所具有的独特营养价值及其丰富的资源。
本发明就是克服目前珍珠类保健品所存在的上述缺陷，提供一种选用海洋珍珠贝类为原料，将海洋珍珠贝类的珍珠层和贝肉进行超低温加工制备而成的海洋全珍珠贝粉，具有全面独特的营养价值。
本发明还提供了这种海洋全珍珠贝粉的制备工艺，采用了超低温技术加工贝肉以及酸水解的方法处理珍珠层粉，有效地保存了海洋珍珠贝所含有的全部营养成份而又极易为人体所吸收。
本发明海洋全珍珠贝粉是由水溶性海洋珍珠层粉和海洋珍珠贝肉以(1-1.5)∶1的重量比组成。其中的海洋珍珠层粉和海洋珍珠贝肉是合浦珍珠贝(Pinctadamartensii(Danker))的珍珠层及其贝肉，比淡水蚌类含有更多的营养成份和微量元素，其特点为海洋贝类所受污染小，有极丰富的资源。
水溶性海洋珍珠层粉的制备可以采用现有已知的许多技术如高温水解、酸水解、高温煅烧等。而本法优选酸水解法。当酸水解时，采用食用醋精，用量为原料的10倍(按重量计)，温度保持在60-80℃之间，水解4小时。水解完全后，用食用碱中和调节PH至6.5-7，优选PH为6.8。
海洋珍珠贝肉粉常采用鲜活合浦珍珠贝肉。在-176℃超低温条件下将其进行粉碎至80-100mm粒度为止。一般进行两次粉碎，间隔进行冷冻干燥。不破坏贝肉中所含牛磺酸等的结构，有效保留了贝肉中全部营养成份。
本发明的海洋全珍珠贝粉可以被制成药学中常用的各种剂型，如口服液，胶囊，片剂等等。
本发明海洋全珍珠贝粉与市售水溶性全成份珍珠粉相比有更好的溶解度和更多营养成份特别是大量的牛磺酸。经分析发现它含有包括人体各种必需氨基酸和大量的牛磺酸等19种氨基酸和大量易被人体吸收的钙、镁、磷、钾、铁、锌、锗、硒等28种元素，经动物实验证实其具有降血脂和抗疲劳等的功效，可提高体内超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)的活性，升高白血球和血小板数目，增强机体免疲功能，及抗衰老等。并且本发明海洋全珍珠贝粉的制备工艺系超低温技术的结晶，方法简单可靠，并可保留天然的各种营养成份，易于推广掌握，并可应用于其它贝类的深加工。
以下结合实施例和试验例对本发明作进一步说明。
实施例1海洋全珍珠贝粉胶囊的制备。
(1)将鲜活珍珠贝的贝壳与贝肉分离，洗净，并从贝壳上取下珍珠层，研磨备用。
(2)取珍珠层粉300g，加入3000g食用醋精在60-80℃条件下恒温水解4小时。冷却至室温，用食用碱中和至PH为6.8。静置半小时，过滤，将滤液冷冻干燥，制得白色水溶性海洋珍珠层粉，备用。
(3)把珍珠贝肉300g在-176℃超低温条件下进行第一次粉碎，将粗粉碎物冷冻干燥，在-176℃超低温条件下进行第二次粉碎，粒度为80-100mm，制得淡黄色海洋珍珠贝肉粉，备用。
(4)取上述水溶性海洋珍珠层粉与海洋珍珠贝肉粉混合均匀，填充胶囊，铝塑封袋。
(5)辐照杀菌，辐照剂量＜5KGr。
试验例一海洋珍珠贝粉胶囊的成份分析测试1、蛋白含量测定珍珠层粉和全珍珠贝粉经1.0mol/LNaOH消化(60℃)6小时，当蛋白完全溶解后，用考马斯亮兰定氮法测定其蛋白含量，在595nm光谱下，用BSA作标准换算得出1)珍珠层粉(海健1号)蛋白含量为0.28%，每个胶囊(以210mg计算)约含0.5mg2)全珍珠贝粉(海健2号)蛋白含量为7.4%每个胶囊约含16mg2、氨基酸含量测定委托我院生物物理研究所分析测试技术中心测定，把珍珠层粉和全珍珠贝粉经酸水解(色氨酸另作特殊处理)后，用高压液相色谱仪进行测定，分析的结果见表1。
由表1所见，在全珍珠贝粉中除含有人体必需的8种氨基酸外，还有多种有益于人体的氨基酸和含量很高的具有抗衰老功效的牛磺酸(每个全贝粉胶囊达2.5mg)等19种氨基酸。
3、宏量及微量元素分析委托我院地理研究所化学地理室用原子吸收光谱，等离子光谱和萤光法综合分析，其结果见表2。
由表2所见在珍珠层粉中钙的含量极其丰富(每个胶囊中约含45mg)和很高量的锶、锌、铌和少量的锗等。而在全珍珠贝粉中则各种宏量和微量元素都极其丰富，除含有大量钙、钠、磷、镁、钾外，锌、锶、锰以及较高量的硒和锗等28种元素。
表1氨基酸分析测试报告
试验例二海洋珍珠贝粉胶囊的药效学试验我们根据现代衰老学说，从医疗保健角度，对以下几个方面进行了药效研究。
1)从血液中三个生化指标(MDA.SOD和GSH-PX)出发研究其消除机体内自由基对细胞的毒化作用和低密度血脂对血管壁的影响。
2)从免疫功能方面研究其对中枢免疫器官胸腺的重量和血中成熟T细胞数的影响。
3)从强身健体出发研究其对小白鼠持续游泳的耐疲劳能力的影响4)从细胞膜抗低渗能力出发研究其对小鼠外周血红细胞脆性的影响5)从老年人易患高血脂症出发，研究其对血液高密度脂蛋白，甘油三脂和总胆固醇含量的影响6)从提高性功能出发，研究其对小白鼠睾丸，储精囊重量和血液中促性腺激素释放激素含量的影响。
经过以上一系列研究，结果表明，海洋珍珠贝胶囊对上述各项指标都有不同程度的作用，对肿瘤病人或放、化疗病人免疫机能低下具有良好的辅助作用，对性功能也有一定程度的促进作用。现将试验结果汇报如下材料和方法一、材料小白鼠，昆明种非特殊要求时每次试验均用雄性动物，体重25-30克左右。
海洋珍珠贝胶囊按我们研制的工艺步骤由生产单位生产。注射用环磷酰胺由上海第十二制药厂生产，批号921209。饲料除标明高脂饲料(即含高脂肪、高胆固醇、胆酸)外，一般都用常规鼠料。
二、方法全珍珠贝粉或珍珠层粉，剂量为25和100mg两组，用自来水0.7ml混匀每天灌胃一次，连续给药14天，对照组灌胃等量的自来水。
(一)血液MDA，SOD和GSH-PX测量，委托北京医科大学药学院理化研究室进行，丙二醛(MDA)测定采用丙二醛一硫代巴妥酸比色法，在波长535nm下测定OD值。
超氧化物岐化酶(SOD)购用海军总医院药盒，在波长550nm下，测定OD值。
谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)用改进的OTNB法，在波长422nm下，测定OD值。
(二)免疫功能1)胸腺、脾脏称重法2)外周成熟T淋巴细胞计数采用α-醋酸萘酯(ANAE)染色法。
3)环磷酰胺(CY)致毒副作用连续灌胃12天全珍珠贝粉后，每天皮下注射CY70mg/Kg连续注射三天，于末次注射24小时后，取血采用常规计数法检查白细胞和血小板数。
(三)小鼠抗疲劳试验采用小鼠持续游泳致死法(四)小鼠外周血红细胞脆性试验采用红细胞在低渗溶液(0.45%NaCl)中的红细胞数为指标。
(五)高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、甘油三脂(TG)和总胆固醇(TC)的测定由海淀医院化验室常规化验。
(六)性功能试验小鼠睾丸和储精囊采用称重法，血液中促性腺激素释放激素(GnRH)含量采用我室建立的LHRH放射免疫测量法结果(一)全珍珠贝粉和珍珠层粉对血液中MDA、SOD和GSH-PX含量的影响结果见表1表1珍珠层粉和全珍珠贝粉对小鼠血中MDA、SOD和GSH-PX含量的影响(Mean±SD)MDASODGSH-PX组别(nmol/ml)(NU/ml)(EU/ml)普食7.62±1.2418.50±3.8038.37±3.20n=10n=8n=10高脂 9.67±2.29△9.09±5.66△△35.86±5.14n=6n=6n=10珍珠 5.25±1.09***10.16±4.49 41.41±8.03+高脂+层粉25mgn=6n=6n=10珍珠 6.06±1.87**14.67±3.91+40.32±6.20+高脂+层粉100mgn=7n=6n=10全珍 6.66±0.99***13.93±4.04+37.13±4.90高脂+珠贝粉25mgn=9n=8n=10全珍 7.50±1.29*14.15±5.71+42.66±7.30*高脂+珠贝粉100mgn=7n=6n=10与普食相比:△P<0.025,△△P<0.005与高脂相比:*P<0.05,**P<0.01,***P<0.001+0.1>P>0.05由表1可见，珍珠层粉和全珍珠贝粉对高脂饲料下小鼠血中的MDA含量有非常明显的降低作用，SOD活性有一定的促进作用，GSH-PX活性明显提高。
(二)全珍珠贝粉对小鼠免疫功能的影响结果见表2、3、4。
表2.全珍珠贝粉对小鼠胸腺和脾脏重量的影响(Mean±SD)体重(g)胸腺(mg/g体重)脾脏(mg/g体重)组别给药前给药后对照28.46±1.6035.04±1.801.90±0.673.94±0.87(14)(14)(14)(14)全珍珠 28.50±0.90 35.89±1.96 2.39±0.71+3.77±0.46贝粉25mg(14)(14)(14)(14)全珍珠 28.69±0.78 34.38±2.63 2.19±0.62 4.66±1.89*贝粉100mg(13)(13)(13)(13)()内为动物数与对照相比:*P<0.05;+0.1>P>0.05由表2可见，全珍珠贝粉使小鼠胸腺增重表明对胸腺有一定的保护作用;可延缓其退化萎缩。并对脾脏重量也有增重作用。
表3全珍珠贝粉对小鼠外周血中成熟T淋巴细胞数的影响(Mean±SD)组别动物数ANAE阳性率(%)对照组1464.88±4.25全珍珠贝粉 14 69.21±3.86**(25mg)全珍珠贝粉 14 77.46±4.47***(100mg)**P<0.01,***P<0.001由表3可见，全珍珠贝粉对小鼠外周血中T淋巴细胞数量有明显的促进作用。
表4全珍珠贝粉对环磷酰胺致小鼠外周血中白细胞和血小板减少的对抗作用组别动物数血小板数/mm3血液 P值白细胞数/mm3血液 P值(×1000)(Mean±SD)(Mean±SD)正常对照14784.50±89.20<0.01251.70±81.90<0.01环磷酰胺12619.10±80.4063.30±20.30全珍珠贝粉25mg+121015.10±257.90<0.00179.92±19.00>0.05环磷酰胺全珍珠贝粉100mg+121019.90±176.70<0.001108.10±39.00<0.001环磷酰胺P值系指各组与环磷酰胺组相比由表4可见，全珍珠贝粉在100mg的剂量下有明显的升高白血球数量的作用，而对血小板数的升高在25mg时即有极明显的作用。
(三)全珍珠贝粉对小鼠的抗疲劳作用结果见表5表5全珍珠贝粉对小鼠耐疲劳能力的影响(游泳试验，水温20.5℃，室温22℃)组别死亡数平均死亡时间20min40min60min>90min(min)对照组7(50)2(14)05(36)43.28±35.08(n=14)全珍珠贝粉25mg组4(29)2(14)1(7)7(50)51.86±34.82(n=14)全珍珠贝粉100mg组3(23)2(15)08(62)62.38±35.15(n=13)()内为死亡百分率由表5可见，全珍珠贝粉有一定的抗疲劳作用
(四)全珍珠贝粉对小鼠红细胞膜抗低渗能力的影响。
结果见表6表6全珍珠贝粉对小鼠红细胞膜抗低渗能力的影响组别动物数红细胞数/mm3P值Mean±SD对照组14151.30±56.62全珍珠贝粉14126.71±54.98P>0.05(25mg)全珍珠贝粉14244.57±106.34P<0.01(100mg)由表6可见全珍珠贝粉可明显提高小鼠红细胞抗低渗能力
(五)珍珠层粉对小鼠血脂和总胆固醇的影响结果见表7表7珍珠层粉对小鼠HDL-C，TG和TC水平的影响(Mean±SD)体重组别HDL-CTGTC给药前给药后(mg/dl)(mg/dl)(mg/dl)n=10n=9n=9n=9n=9n=10n=8n=8n=8n=8高脂+25mgn=10n=8n=8n=8n=8高脂+100mgn=10n=10n=10n=10n=10与普食相比:△P<0.05,△△P<0.01与高脂相比:*P<0.025,**P<0.005由表7可见，可溶性珍珠层粉对小鼠血液中高密度脂蛋白含量有非常明显的促进作用，对甘油三脂含量有明显的降低作用而对总胆固醇含量则无影响。
(六)全珍珠粉对小鼠性功能的影响结果见表8，9。
表8全珍珠贝粉对小鼠睾丸和精囊重量的影响(Mean±SD)体重(g)组别睾丸(mg/g体重)精囊(mg/g体重)给药前给药后对照28.46±1.6035.04±1.806.00±0.804.55±1.06(14)(14)(13)(14)全珍珠贝粉28.50±0.9035.89±1.968.55±0.914.58±1.1925mg(14)(14)(14)(14)全珍珠贝粉 28.69±0.78 34.38±2.63 6.66±0.89+4.03±1.17100mg(13)(13)(13)(13)()内为动物数与对照相比:+0.1>P>0.05由表8可见全珍珠贝粉对小鼠睾丸重量有所增加，提示它有一定的促进性功能的作用。
表9全珍珠贝粉对小鼠血浆GnRH含量的影响组别GnRH含量(pg/ml)组别GnRH含量(pg/ml)(雄性)Mean±SD(雄性)Mean±SD对照4.72±0.50对照4.69±0.60(3)(6)全珍珠贝粉4.69±0.50全珍珠贝粉5.78±0.3942mg(5)42mg(5)全珍珠贝粉5.82±0.90全珍珠贝粉5.53±0.51225mg(5)225mg(5)()内为动物数注本实验连续灌胃7天由表9可见，全珍珠贝粉有增加小鼠血浆中GnRH含量的趋势，表明通过下丘脑GnRH释放的增加而起到促进性功能的效应。除上述几项作用外还观察到喂饲珍珠贝粉的小鼠，其皮毛的色泽光亮而浓密。
讨论综观以上分析结果可以看出，海洋珍珠层粉胶囊和全珍珠贝粉胶囊含有大量的钙质，各种微量元素和氨基酸。其中全珍珠贝粉中各种成份更为全面，含量更高，特别是有对抗衰老和防治心血管疾病有益的镁、锌、锶、锗和牛磺酸等，其含量都极为丰富，在各种全天然保健品中是极少见的。
从动物实验也清楚地看出，这二种珍珠贝胶囊产品对消除体内自由基的超氧化物歧化酶(SOD)的活性有提高的效应，对丙二醛(MDA)有极明显的降低，而且对脂类过氧化作用的损害有保护作用的谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)的含量也有明显的提高，并有明显的抗疲劳作用。有资料报道认为，衰老从细胞膜开始，而全珍珠贝粉对红细胞膜抗低渗能力有明显的提高，表明全珍珠贝粉是有明显的抗衰老作用。
全珍珠贝粉对中枢免疫器官胸腺的退萎有一定的保护作用，而对脾脏功能和T淋巴细胞也有明显的促进作用。提示全珍珠贝粉对机体免疫功能和中枢免疫器官都有良好的促进作用。此外全珍珠贝粉还有很好的升高白细胞和增加血小板数量的作用;提示全珍珠贝粉对白血球低下患者和贫血患者可能也有良好的治疗作用。
最后，全珍珠贝粉对小鼠睾丸的重量有一定的增重作用，而且不论对雄性或雌性小鼠血浆中GnRH的含量都有所增高。因此全珍珠贝粉对性能方面可能有促进作用。
总之，从以上一系列试验可以清楚地表明，不论珍珠层粉或全珍珠贝粉胶囊，不仅是很好的保健品，而且还是一类很好的美容，抗衰老疗效型产品，其作用的广泛性和高效应是当前同类产品中所少有的。
主要参考文献1.RotruchJ.T.HoeksteaW.GScience，1973，179∶588-590.
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试验例三海洋珍珠贝粉胶囊的毒性试验按照一九九二年九月一日施行的“新药审批办法”(有关中药部分的修订和补充规定)中有关毒理研究的技术要求，我们对全珍珠贝粉进行了急性毒性试验，由于一次给药无法测出LD50，因此做了最大耐受量试验，结果如下一、试验剂量1、动物有效量为25mg/天。
2、临床试验每人每日口服全珍珠贝粉约1.5g可达到明显的保健作用。若以每人平均体重60公斤计算，有效剂量为每公斤体重25mg。根据中草药急性毒理实验选用60-100倍药量给予动物，若动物全部存活、状态良好，可将此药归为安全性药。根据这一点我们计算比临床用药量大100倍，即每公斤体重用药量为2.5克，为此我们选用2.5克上下剂量的5个不同剂量给药连续7天后观察结果。
3、试验药量对照组，胃饲自来水0.5ml;实验组，每日给予全珍珠贝粉量为每公斤7.5、5、3.3、2.2、1.4克，用水混匀后灌胃，它们分别为临床剂量的300，200，132，88和56倍。
二、试验步骤1、取昆明种小鼠80只，雌雄各半，在新环境中喂养三天，选用活动正常，饮水、采食良好的动物60只做实验。
2、实验当天称体重，按体重随机分6组，每组雌、雄鼠各5只。
3、每日下午200定时灌胃，对照组灌自来水0.5ml，每日观察动物状态，连续给药和观察7天。
4、8天后解剖观察动物各脏器、并取血测量血浆中GnRH(最高，最低剂量及对照组)的含量。
三、试验结果小白鼠进食正常均无死亡，粪便、活动及毛色光泽均正常;给药组与对照组体重增重无明显差异(见表10)。解剖结果心、肝、脾、肺、肾、消化道等均无异常改变;血浆GnRH含量测定结果，给药组比对照组，其含量不论雌雄动物均有不同程度的增高(见资料二表9)
四、结论试验过程中小鼠无死亡，进食活动及内脏各器官均无异常症状发生，按急性毒理剂量分级标准，全珍珠贝粉胶囊属无毒级，提示该药服用安全范围大。
权利要求
1.一种以海洋珍珠贝类为原料的全珍珠贝粉，其特征在于它是由水溶性海洋珍珠层粉和海洋珍珠贝肉粉按1-1.5∶1的重量比组成。
2.根据权利要求1所述的全珍珠贝粉，其中水溶性海洋珍珠层粉是用食用酸精在60-80℃保温水解4小时制成的。
3.根据权利要求1所述的全珍珠贝粉，其中的海洋珍珠贝肉粉是将新鲜海洋珍珠贝肉在-176℃超低温两次粉碎制成的。
4.一种全珍珠贝粉的制备方法，它包括下列步骤a.将鲜活海洋珍珠贝壳与贝肉分离。b.在-176℃超低温条件下，进行第一次粉碎，然后将粉碎后的贝肉粗粉冷冻干燥，在-176℃超低温下进行第二次粉碎，粒度为80-100mm，制得贝肉粉。c.取海洋珍珠贝的珍珠层，研碎，按1∶10的重量比加入食用醋精，在恒温箱内60-80℃水解4小时。将水解溶液冷却到室温，用食用碱中和至PH6.5-7，静置半小时，过滤，将滤液经超低温冷冻干燥，得到水溶性海洋珍珠层粉。d.将上述制得的水溶性海洋珍珠层粉与海洋珍珠贝肉粉按(1-1.5)∶1的重量比混合均匀即可。
5.根据权利要求4所述的制备方法，其中酸系食用醋精，碱系食用碱。
全文摘要
本发明公开一种全天然保健品全珍珠贝粉，它是由水溶性海洋珍珠层粉和海洋珍珠贝肉粉组成；它含有人体各种必需氨基酸和大量牛磺酸等19种氨基酸和大量钙、磷、镁、钾、铁、锌、硒、锗等28种元素；经动物试验证实该保健品具有降血脂、抗疲劳等功效，可提高体内超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)的活性，升高白血球和血小板数，增强机体的免疫功能和抗衰老等作用，其药用营养价值甚为突出。本品可广泛用于饮料、食品、医药和日用化工等行业。
文档编号A23L1/30GK1105244SQ9410532
公开日1995年7月19日 申请日期1994年5月23日 优先权日1994年5月23日
发明者张崇理, 程丽仁 申请人:中国科学院动物研究所