专利名称：促血清脂质减少及抗氧化的吗啉衍生物的制作方法
技术领域：
本发明涉及新的吗啉衍生物的合成及其降低血胆固醇、促血清脂质减少以及抗氧化活性的评价。特别地，本发明涉及式I吗啉衍生物的合成及药物化学评价。 其中R1＝CH2CH3，R2＝CH3，R3，R4＝H，R5＝C6H5(化合物1)或R1＝CH2CH2CH2ONO2，R2＝CH3，R3，R4＝H，R5＝C6H5(化合物2)或R1＝H，R2-R3＝(CH2)4，R4＝H，R5＝C6H5(化合物3)或R1＝CH2CH2CH3，R2-R3＝(CH2)4，R4＝H，R5＝C6H5(化合物4)或R1＝CH2CH2CH2ONO2，R2-R3＝(CH2)4，R4＝H，R5＝C6H5(化合物5)或R1＝H，R2＝CH3，R3-R4＝(CH2)4，R5＝C6H5(化合物6)或R1＝CH2CH2CH3，R2＝CH3，R3-R4＝(CH2)4，R5＝C6H5(化合物7)或R1＝CH2CH2CH2ONO2，R2＝CH3，C3-R4＝(CH2)4，R5＝C5H5(化合物8)或R1＝CH2CH2CH2ONO2，R2＝CH3，R3，R4＝H，R5＝H(化合物9)或R1＝H，R2＝p-NO2-C6H4CH2CH2，R3，R4＝H，R5＝C6H5(化合物10)。
人们已知动脉粥样硬化的发病机理与许多因素有关，最重要的有-低密度脂蛋白的氧化修饰(LDL)-血中胆固醇和LDL-胆固醇水平增加-血中甘油三脂水平增加-血中HDL-胆固醇水平降低-血栓形成、内皮损伤以及血液动力因素。特别地，LDL的氧化修饰似乎是最具风险的致动脉粥样硬化过程，其导致了炎症、细胞调亡机制以及最终的泡沫细胞和脂肪条纹的形成。在本研究领域内，大多数化合物具有降低胆固醇血、促血清脂质减少或抗氧化活性。尚无有关具有抗氧活性的化合物能够降低血中总胆固醇、甘油三脂和LDL-胆固醇的报道。
考虑到上述问题，我们认为人们对具有降低胆固醇血、促血清脂质减少以及氧化活性化合物的设计、合成及评价应具有兴趣。
我们在这里所报道的新的衍生物能够明显降低血浆中总胆固醇的水平。
新的衍生物除了它们的促血清脂质减少活性外还具有强的抗氧化活性。我们认为促血清脂质减少活性与抗氧化活性的结合对于更为有效地预防和治疗动脉粥样硬化来说是必需的。
本发明涉及通式(I)新的吗啉衍生物的合成及其抗氧化、降低胆固醇血以及促血清脂质减少活性的评价。方法合成2-羟基吗啉衍生物3，6和10是通过使合适的氨基醇(22mmol)与2-溴-4-苯基苯乙酮或2-溴-苯乙酮(10mmol)在乙醚或丙酮溶液中于室温下反应15小时得到的。用饱和氯化钠溶液洗涤后，碳酸钾干燥，真空蒸发，用10％的盐酸乙醚溶液中和，得到2-羟基衍生物，再用丙酮和乙醚进行重结晶。
2-烷氧基吗啉衍生物1，4和7是通过使相应的2-羟基衍生物与合适的醇在酸性介质进行回流反应得到的。
化合物2，5，8和9是通过使相应的2-羟基衍生物与3-溴代丙醇在酸性介质进行回流得到的。然后使2-(3-溴丙氧基)衍生物与硝酸银在乙腈中进行回流反应。 a)室温，HCl的乙醚溶液；b)3-溴丙醇回流3小时；c)硝酸银，乙腈，回流2小时；d)乙醇或丙醇，回流15小时。路线1吗啉的合成途径抗氧化活性评价[方法]通过大鼠肝微粒体膜脂类的过氧化作用，在体外对新化合物的抗氧化活性进行评价。用Fe2+/抗坏血酸系统诱导了脂类过氧化作用。使大鼠的肝微粒体进行热失活(90℃下90秒)。将新鲜的抗坏血酸(0.2mM)的Tris-HCl缓冲液(pH7.4)以及受试化合物一起溶于DMSO中，得到终浓度为1-0.1mM的溶液，将此溶液加到微粒体中。向对照样品中加入等量的缓冲液。然后加入硫酸亚铁FeSO4(10μM)启动反应。混合物在37℃下培养45分钟。在各个时间间隔下取等分试样，在535nm下通过2-硫代巴比妥酸反应活性物质的分光光度法测定来评价脂类的过氧化作用。[结果]
所有的受试化合物在1mM的浓度下显示出100％的脂类过氧化抑制作用，这种作用甚至在0.1mM的浓度下也能保持。促血清脂质减少活性的评价[方法]所合成化合物的降低胆固醇血以及促血清脂质减少活性的评价是通过对大鼠Triton WR 1339诱导的高脂血症的抑制来进行的。通过腹膜内(i.p.)注射的Triton WR 1339是由于引入了HMG-CoA还原酶而发挥作用的。采用雄性Fischer大鼠(230-280g)，每组5只(实验组)，经i.p.注射200mg/KgTriton WR1339溶液，同时经i.p.注射给予28-56μmol/Kg受试化合物和安慰剂(作为对照)的悬浮水溶液。对照组经i.p.注射给予Triton WR 1339和10ml/Kg受试化合物的载体。24小时后，从腹主动脉取血，收集到肝素化管中。在3000rpm下离心15分钟，利用市售的试剂盒测定血浆中的总胆固醇(TC)，LDL-胆固醇(LDL-C)以及甘油三酯(TG)。[结果]我们的结果显示受试化合物使血浆中的总胆固醇水平下降了54％，甘油三酯水平下降了49％，LDL-胆固醇水平下降了51％，并且所有的化合物均比安慰剂更有效(表1)。
上述结果还表明，新化合物具有抗氧化活性及强的促血清脂质减少和降低胆固醇血作用。抗氧化活性与促血清脂质减少活性的结合可用来抵抗动脉粥样硬化。
表1 选择的化合物及安慰剂对于血浆总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)及低密度脂蛋白(LDL)水平的作用化合物剂量(μmol/kg，ip) 与对照相比的降低百分比TC TG LDL15630* 39* 22*35622* 20* 51*45636* 34* 17NS62854**49* 51*75650* 41* 28*安慰剂 5618* 11NS18NS所有的测定至少进行两次，SD总在吸收值的±10％之间。星号表明统计显著性(Student’s t-检验)如下**P＜0.005，*P＜0.05，NS不显著(P＞0.1)。
权利要求
1.式I取代吗啉衍生物的合成 其中R1＝CH2CH3，R2＝CH3，R3，R4＝H，R5＝C6H5(化合物1)或R1＝CH2CH2CH2ONO2，R2＝CH3，R3，R4＝H，R5＝C6H5(化合物2)或R1＝H，R2-R3＝(CH2)4，R4＝H，R5＝C6H5(化合物3)或R1＝CH2CH2CH3，R2-R3＝(CH2)4，R4＝H，R5＝C6H5(化合物4)或R1＝CH2CH2CH2ONO2，R2-R3＝(CH2)4，R4＝H，R5＝C6H5(化合物5)或R1＝H，R2＝CH3，R3-R4＝(CH2)4，R5＝C6H5(化合物6)或R1＝CH2CH2CH3，R2＝CH3，R3-R4＝(CH2)4，R5＝C6H5(化合物7)或R1＝CH2CH2CH2ONO2，R2＝CH3，R3-R4＝(CH2)4，R5＝C6H5(化合物8)或R1＝CH2CH2CH2ONO2，R2＝CH3，R3，R4＝H，R5＝H(化合物9)或R1＝H，R2＝p-NO2-C6H4CH2CH2，R3，R4＝H，R5＝C6H5(化合物10)，其中2-羟基吗啉衍生物3，6和10是通过使合适的氨基醇(22mmol)与2-溴-4-苯基苯乙酮或2-溴-苯乙酮(10mmol)在乙醚或丙酮溶液中在室温下反应15小时得到的，用饱和氯化钠溶液洗涤后，碳酸钾干燥，真空蒸发，用10％盐酸醚溶液中和，得到2-羟基衍生物，从丙酮和乙醚中结晶，2-烷氧基吗啉衍生物1，4和7是通过使相应的2-羟基衍生物与合适的醇在酸性介质进行回流反应得到的，化合物2，5，8和9是通过使相应的2-羟基衍生物与3-溴代丙醇在酸性介质进行回流得到的，然后使2-(3-溴丙氧基)衍生物与硝酸银在乙腈中进行回流反应得到的。
2.权利要求1中所述的式I取代吗啉衍生物，其根据权利要求1合成得到。
3.权利要求1中所述的式I取代吗啉衍生物用于抑制脂类过氧化及其强抗氧化活性。
4.权利要求1中所述的式I取代吗啉衍生物用于降低血浆胆固醇水平。
5.权利要求1中所述的式I取代吗啉衍生物用于降低血浆甘油三酯水平。
6.权利要求1中所述的式I取代吗啉衍生物用于降低血浆LDL-胆固醇水平。
7.权利要求1-6任意一个中所述式I取代吗啉衍生物用于制备预防和治疗高胆固醇血症药物的用途。
8.权利要求1-6任意一个中所述式I取代吗啉衍生物用于制备预防和治疗高脂血症药物的用途。
9.权利要求1-6任意一个中所述式I取代吗啉衍生物用于制备预防和治疗动脉粥样硬化药物的用途。
全文摘要
本发明涉及式I取代吗啉衍生物的合成及其抗氧化、低胆固醇血以及低脂血活性的评价,其中R
文档编号A61K31/538GK1336922SQ00802766
公开日2002年2月20日 申请日期2000年1月14日 优先权日1999年1月14日
发明者M·克里塞利斯, E·莱卡, P·库罗纳其斯 申请人:艾尔彭股份有限公司